高效液相色谱法测定25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂

2023-12-31洪陈艳颜高俊王学林安燕萍

云南化工 2023年12期

洪陈艳，颜高俊，王学林，安燕萍

(昆明农药有限公司，云南昆明 650401)

硝磺草酮(英文通用名：mesotrione)属于HPPD抑制剂，广谱苯胺类除草剂，主要用于玉米田防除苍耳、藜、荠菜、稗草、龙葵、繁缕、马唐等杂草，对磺酰脲类除草剂产生抗性的杂草有效[1]。

莠去津(英文通用名：atrazine)又名阿特拉津，是一种三氮苯类除草剂，除草范围广，效果好，对植物安全，残效期短。莠去津是选择性内吸传导型苗前、苗后除草剂，用于玉米、高粱、甘蔗、茶树及果园、林地防除一年生禾本科杂草和阔叶杂草[2]。

25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂有效成分硝磺草酮和莠去津可分别采用液相色谱法和气相色谱法进行分析检测。本文通过实验研究建立了一种操作快捷、方便准确的高效液相色谱分析方法，该方法在同一根C18色谱柱上能同时对25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂样品中的有效成分硝磺草酮和莠去津进行同柱液相色谱分离和定量测定，分析方法的精密度和准确度满足定量分析的要求。

1 实验部分

1.1 试剂

硝磺草酮标样(w=99.01%)；莠去津标样(w=99.30%)；甲醇：分析纯；乙腈：色谱纯；冰乙酸：分析纯；水：蒸馏水(新蒸二次蒸馏水)。

1.2 仪器

高效液相色谱仪：具可变波长紫外检测器；色谱数据处理机；色谱柱：250 mm×φ4.6 mm 不锈钢柱，内装C18填充物，粒径 5 μm；过滤器；滤膜孔径 0.45 μm；微量进样器：50 μL；超声波清洗器。

1.3 高效液相色谱操作条件

柱温：室温(温差变化应不大于 2 ℃)；流动相：乙腈+水=50+50(体积)，水用冰乙酸调试pH到3.0，经滤膜过滤并超声脱气；检测波长：254 nm；流速：0.8 mL/min；进样体积：5 μL。

1.4 操作步骤

1.4.1 配制标样溶液

准确称取 0.02 g 硝磺草酮标样、莠去津标样 0.08 g(精确至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，超声波振荡 5 min，冷却至室温，摇匀备用。

1.4.2 配制试样溶液

准确称取25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂试样 0.4 g(精确至 0.0002 g)于 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，超声波振荡 5 min，冷却至室温，摇匀备用。

1.4.3 测定

在上述色谱操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻两针标样溶液中的硝磺草酮、莠去津响应值变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样进行分离测定[1]。25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂高效液相色谱图(如图1)。保留时间(min)：硝磺草酮约5.5，莠去津约7.0。

1.硝磺草酮(5.5 min)；2.莠去津(7.0 min)。图1 25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂高效液相色谱图

1.4.4 计算

将测得的两针试样溶液以及试样前后两针标样溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面积分别进行平均。试样中硝磺草酮(莠去津)的质量分数X1(%)按公式计算：

式中：A2为试样溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面积的平均比值；m1为标样硝磺草酮(莠去津)的质量，g；w为标准品硝磺草酮(莠去津)的质量分数，%；A1为标样溶液中硝磺草酮(莠去津)峰面积的平均比值；m2为试样的质量，g；X1为试样硝磺草酮(莠去津)的质量分数，%。

1.4.5 允许差

硝磺草酮、莠去津两次平行测定结果之差应分别不大于0.1%和0.4%，取其算术平均值作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 液相色谱操作条件的选择

为了保证25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂样品中辛硝磺草酮和莠去津的峰型能够较好地分离，分别取了不同配比的乙腈和水为流动相进行分析检测，通过比较和对比分析硝磺草酮和莠去津以及杂质峰的峰型、出峰时间、分离完全度等因素，确定使用乙腈+水=50+50(体积)为流动相时，样品色谱图基线平稳，峰型好，分离效果较好，出峰时间适宜，因此确定选用乙腈+水=50+50作为流动相。

2.2 波长的选择

使用使用紫外可变波长检测器，在不同波长下对25%硝磺草酮·莠去津可分散油悬浮剂样品中硝磺草酮和莠去津进行扫描，当扫描波长为 254 nm 时，硝磺草酮和莠去津的响应值最大，并且能与杂质峰分离彻底，因此选择 254 nm 作为检测波长。

2.3 溶剂的选择

根据硝磺草酮和莠去津的性质，当选用甲醇为试样溶剂时，能较好地溶解试样，且峰型分离较好，满足试剂的选择条件。

2.4 分析方法线性关系测定

配制一系列质量浓度梯度的硝磺草酮、莠去津混合标样溶液，按本文1.3、1.4中的方法进行分析检测，每个质量浓度分析两次，求其峰面积的平均值，得出了一系列色谱峰面积(表1、表2)。以硝磺草酮(莠去津)质量浓度为横坐标，以硝磺草酮(莠去津)平均峰面积为纵坐标绘制标准曲线。测得硝磺草酮标准曲线线性方程为：y=1.0(107x+35341，相关系数为：R2=0.9997；莠去津标准曲线线性方程为：y=3.0(106x-1322.9，相关系数为：R2=0.9996，结果表明本方法对硝磺草酮(莠去津)的分析具有良好的线性相关性，可以满足定量分析的要求。

表1 不同质量浓度硝磺草酮标样与对应的峰面积

表2 不同浓度莠去津标样与对应的峰面积

2.5 分析方法的精密度测定

分别称取5个平行试样，按上述色谱条件和测定步骤进行测定，硝磺草酮和莠去津的标准偏差分别为0.19%、0.37%；变异系数分别为3.77%、1.83%，结果(表3)。

表3 分析方法的精密度测定结果

2.6 分析方法准确度测定

称取硝磺·莠去津可分散油悬浮剂试样配制成试样溶液，分别称取相同体积的上述溶液制备7份相同的样品。其中，6份分别加入一定量的硝磺草酮(莠去津)标样。如此配制成6个混合样品溶液和1个空白溶液，按本标准操作条件进行分析，分别测定每个样品的硝磺草酮(莠去津)总质量，计算回收率，测定结果见(表4)，表明该方法确确度较高。