急性脑梗死患者血清miR-206 及miR-122表达水平及其诊断价值分析

周宇立，费丹婷，索源，叶飞龙

急性脑梗死（ACI）是一种急性缺血性脑血管疾病，具有高发病率、高致残率和高病死率等特点[1-2]。研究指出，miRNA在脑血管疾病的发生和预后中起着重要的作用，但其确定的基因靶标和信号通路仍不十分清楚[3]。miR-122 是一种机体组织特异性miRNA，参与调节机体神经发育过程，并在脑组织缺血、缺氧、脑梗死的发生发展过程中扮演重要角色，并与脑梗死病情及预后密切相关[4]。miR-206 属于miR-1家族成员之一，具有调控细胞生长、增殖及凋亡等作用[5]。本研究旨在探讨ACI 患者血清miR-206、miR-122 表达水平及其诊断价值，报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集2021 年1 月至2022 年6 月嘉兴市第一医院收治的ACI 患者156 例（观察组），纳入标准：（1）符合《中国急性缺血性脑卒中诊疗指南2018》中ACI 诊断标准[6]；（2）行头颅CT/MRI 检查；（3）发病后24 h 内入院；（4）首次发病。排除标准：（1）合并感染性疾病者；（2）并发心房颤动引起的心源性脑栓塞者；（3）既往有脑血管病史者；（4）有血液病、恶性肿瘤、自身免疫性疾病，以及心、肾、肺及肝等重要器官功能严受损者；（5）哺乳期或孕妇。选取同期在院体检，且年龄、性别匹配的健康者150 例设为对照组。本研究征得患者及家属知情同意，经嘉兴市第一医院医学伦理委员会批准通过。

1.2 方法

1.2.1 标本采集及临床指标检测 观察组于入院当日，对照组于体检当日清晨空腹抽取10 ml 外周静脉血，在4 ℃和1 600 r/min 下离心10 min，收集血清，并在-80℃下保存。采用电子血压计测量两组收缩压及舒张压。

1.2.2 检测血清miR-206 及miR-122 水平 采用实时荧光定量PCR 法检测血清miR-206、miR-122 的表达水平。使用Trizols 溶解试剂提取血清总RNA，通过逆转录反应获得cDNA，以U6 为内参，按照制造商的指导进行PCR 扩增。采用2-CT法计算miR-206、miR-122 相对表达水平。

1.2.3 疾病严重程度及脑梗死面积评估 观察组入院后第1 天采用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分进行疾病严重程度评估：轻度（n=44），NIHSS评分＜5 分；中度（n=49），5 分≤NIHSS评分＜16 分；重度（n=63），NIHSS 评分≥16 分。ACI 患者均进行头颅MRI DWI 检查，记录脑梗死病灶大小。根据病灶的最大直径分为：小梗死面积（直径1.6 ～3.0 cm）、中梗死面积（直径3.1 ～5 cm）及大梗死面积（直径＞5 cm）。

1.3 统计方法 数据采用SPSS 23.0 软件分析，计数资料采用检验。计量资料符合正态分布以均数±标准差表示，多组间比较采用F检验，多重比较采用SNK-q 检验，组间比较采用配对t 检验；相关性分析采用Pearson法分析；受试者工作特征（ROC）曲线分析诊断价值。P ＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较 观察组收缩压及舒张压水平均显著高于对照组（均P ＜0.05），见表1。

表1 两组一般资料比较

2.2 血清miR-206 及miR-122 表达水平比较 观察组血清miR-206 及miR-122 表达水平高于对照组（均P ＜0.05），见表2。

表2 两组血清miR-206、miR-122 表达水平比较

2.3 观察组不同严重程度亚组血清miR-206及miR-122表达水平比较 3 组miR-206、miR-122 表达水平及NIHSS 评分差异均有统计学意义（均P ＜0.05）。与轻度组比较，重度组和中度组患者血清miR-206 表达、miR-122 表达及NIHSS评分均升高，且重度组表达水平高于中度组（q≥2.81，均P ＜0.05），见表3。

表3 观察组不同严重程度亚组血清miR-206、miR-122 表达水平及NIHSS 评分比较

2.4 观察组血清miR-206、miR-122 水平与NIHSS评分的相关性 Pearson 相关性分析显示，观察组miR-206 与miR-122 水平与NIHSS评分均呈显著正相关（r=0.455、0.696，均P ＜0.05）。

2.5 观察组不同严重程度亚组miR-206、miR-122 水平比较 观察组不同梗死面积患者miR-206 与miR-122 水平差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 miR-206、miR-122 与急性脑梗死患者临床参数的关系

2.6 血清miR-206 及miR-122 水平对ACI 的诊断价值 血清miR-206、miR-122 水平预测ACI 的AUC 分别为0.819（95%CI：0.771 ～0.860）及0.891（95% CI：0.851 ～0.924），截断值分别为1.08 及1.38，对应的敏感度分别为73.08%及87.82%，特异度分别为92.00%及79.33%；血清miR-206、miR-122水平联合预测的AUC 为0.896（95% CI：0.856 ～0.928），敏感度为72.44%，特异度为92.67%，见图1。

图1 血清miR-206、miR-122 水平预测ACI 的ROC 曲线

3 讨论

ACI又称缺血性脑卒中，其发病率占所有脑卒中的87%，且由于脑梗死发病的紧迫性和神经元功能的特殊性，往往导致高致残率和高死亡率[7]。因此及早评估ACI疾病的发生及病情发展可有效改善患者预后。血清学监测由于便捷、快速及无创等优点在临床应用广泛，可为ACI患者的诊断提供参考依据[8]。

研究发现，在ACI患者血清中可检测到miRNA的异常表达，提示miRNA 可能作为判断ACI 发生的标志物[9]。miR-206 位于人类染色体6p12.2 上，参与细胞分化与血管形成[10]。吴小杨等[11]研究发现miR-206 在腔隙性脑梗死伴脑白质病变患者血清中表达升高，并参与患者认知功能损伤过程。本研究中ACI 患者血清miR-206 表达水平高于对照组，且随着NIHSS评分的增加，血清miR-206 表达水平逐渐升高，并进一步发现miR-206 表达与NIHSS 评分呈正相关，提示miR-206 可能参与ACI 的发生、发展过程。ROC曲线显示，血清miR-206 水平预测ACI 的AUC 为0.819，敏感度为73.08%，特异度为92.00%，表明通过检测ACI 患者血清miR-206 水平可用于判断ACI 发生。

既往研究表明，miR-122 影响缺血性脑卒中疾病的发生及发展过程，并与缺血后梗死面积有关[12]。王蒙蒙等[13]研究也表明miR-122 可有效诊断急性缺血性脑卒中的发生。本研究ACI 患者血清miR-122表达水平高于对照组，且随着NIHSS 评分的增加，血清miR-122 表达水平逐渐升高，Pearson 相关性分析结果显示ACI 患者血清miR-122、miR-206 表达与NIHSS 评分均呈正相关，表明miR-122 与ACI 的发生密切相关，对疾病严重程度评估具有积极意义。miR-206 与miR-122 表达随着梗死面积的增加逐渐上升，表明血清中miR-206 与miR-122 的表达水平受梗死面积的影响。本研究ROC 曲线显示血清miR-122 水平预测ACI 的AUC 为0.891，敏感度为87.82%，特异度为79.33%，与miR-206 水平联合预测的AUC 为0.896，敏感度为72.44%，特异度为92.67%，表明联合检测二者在ACI 患者血清中的表达可用于预测ACI 发生，且预测效能高于单一指标检测，可为ACI 疾病的预防和治疗提供依据。

综上所述，miR-206 及miR-122 在ACI 患者血清中表达均升高，二者与ACI 疾病严重程度密切相关，对ACI 疾病具有一定诊断价值。

利益冲突 所有作者声明无利益冲突