血清LncRNA-MALAT1 水平与心肌梗死患者疾病严重程度和预后的关系

邵灿，周文，陈芙蓉

心肌梗死是老年人群中心血管疾病的好发类型，发病率、死亡率较高，部分严重者可能导致胸痛、休克。急性心肌梗死（AMI）的发病机制相对复杂，认为与心肌损伤、炎症进展和血流改变有关[1-2]，手术治疗的效果良好，可有效降低患者病死率和致残率，但依然有部分患者因各种原因出现近期心血管不良事件（MACE）。既往临床多将肌钙蛋白作为AMI 临床诊断和预后评价的监测指标[3]，但其在早期心肌损伤时敏感性较差。近年来随医学进步和分子生物学发展，越来越多的研究者发现，AMI患者的发病与进展可能与基因表达和调控有关[4]。长链非编码RNA（lncRNA）是分子生物学中一种非编码转录RNA，参与诸多心血管疾病的发病进展。肺腺癌转移相关转录本1（MALAT1）是lncRNA中的家族成员，权瑜等[5]发现，LncRNA-MALAT1可以调节血管内皮功能，抑制其表达可以抑制心肌细胞氧化应激损伤状态，发挥一定的心脏保护效果。鉴于此，本研究探讨LncRNA-MALAT1 与AMI 患者病情进展及预后的关系，旨在为临床治疗AMI，改善预后挖掘潜在治疗靶点，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性选取2019 年3 月至2020 年8 月在温州市中西医结合医院接受治疗的120 例AMI 患者为观察对象。其中男71 例，女49 例；年龄40 ～75 岁，平均（55.9±5.1）岁；基础疾病：高血压42例，糖尿病49 例，高血脂29 例。纳入标准：符合AMI诊断标准[6]，经心电图、冠脉造影检查确诊；年龄＞18岁；急性胸痛发作至就诊时间＜8 h；接受经皮冠状动脉介入（PCI）术治疗；临床资料无缺失，可完成研究。排除标准：既往或现在明确存在肿瘤疾病者；合并心绞痛、肥厚型心肌病、糖尿病视网膜病变、严重血管病变、严重感染和肺部疾病；妊娠期、哺乳期女性；合并免疫系统障碍者；既往存在心脏手术史者。本研究过程符合《赫尔辛基宣言》相关伦理要求，经温州市中西医结合医院医学伦理委员会批准[伦研批第（2023-L040）号]，且已豁免患者及家属知情同意。

1.2 方法

1.2.1 临床资料收集 通过电子病历系统收集研究对象的临床资料，包括患者性别、年龄、体质量指数（BMI）、吸烟史、血脂情况[总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白]、收缩压、舒张压、血清心肌肌钙蛋白I（cTnⅠ）、超敏C 反应蛋白（hs-CRP）及肌酸激酶（CK-MB）等水平。

1.2.2 实时荧光定量PCR 法测定血清LncRNAMALAT1 水平 采集研究患者外周静脉血5 ml，离心分离取上清液，利用密度梯度离心法分离PBMC。用Trizol 法（上海双达生物技术有限公司）提取PBMC 细胞的总RNA，并使用紫外分光光度计（赛默飞，型号：Multiskan SkyHigh）检测RNA 的浓度。先采用逆转录试剂盒进行逆转录获得cDNA，将产物置于4 ℃条件下保存，再以获得的cDNA 为模板进行荧光定量PCR 扩增，在RT-PCR 仪上设置反应条件：95℃5min 预变性；随后经95℃变性10s，60℃退火35 s，65 ℃延伸30 s，扩增35 个循环。引物序列如下：LncRNA-MALAT1 上游引物：5’-AGGCGTTGTG-CGTAGAGGA-3’，下游引物：5’-GGATTTTTACCAA-CCACTCGC-3’；内参GAPDH上游引物：5’-AGACAGCCGCATCTTCTTGT-3’，下游引物：5’-CTTGCCGTGGGTAGAGTCAT-3’。引物由上海生工生物工程有限公司合成。LncRNAMALAT1 表达量=，其中CT=CT（target）-C（tcalibrator），CT=CTlnRNA-CT18S。

1.2.3 Gensini 评分 对研究对象行冠状动脉造影检查，并以Gensini评分标准[7]评价冠脉狭窄程度，分为Gensini 评分≥60 分组（n=52）和Gensini 评分＜60 分组（n=68）。

1.2.4 MACE 评估 研究对象均在本院接受手术，且电话或门诊随访6 个月。记录随访期间再发心肌梗死、血管重建、恶性心律失常、慢性心力衰竭、心源性休克等MACE 发生情况。

1.3 观察指标（1）比较Gensini 评分≥60 分组和Gensini 评分＜60 分组患者的临床资料。（2）比较非MACE 组和MACE 组患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平。（3）分析血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 预测AMI 患者近期发生MACE 的价值。

1.4 统计方法 使用SPSS 23.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，两组间比较行t检验；计数资料采用[例（%）]表示，比较采用检验。预测价值分析采用受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC）。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Gensini 评分≥60 分组和Gensini 评分＜60 分组患者临床资料比较 Gensini 评分≥60 分组和Gensini评分＜60 分组患者在性别、年龄、BMI、吸烟史、收缩压、舒张压、低密度脂蛋、总胆固醇、三酰甘油等差异均无统计学意义（均P ＞0.05），两组高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 等差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 Gensini 评分≥60 分组和Gensini 评分＜60 分组AMI 患者临床资料比较

2.2 非MACE 组和MACE 组患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平比较 120 例AMI 患者经6 个月随访后有36 例患者出现MACE，将其纳为MACE 组，其余纳为非MACE 组。MACE 组患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高于非MACE 组（均P ＜0.05），见表2。

表2 非MACE 组和MACE 组AMI 患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平比较

2.3 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 预测AMI 患者近期发生MACE 价值 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 水平均具有预测AMI 患者MACE 价值，AUC 分别为0.641，0.692。以高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1水平截断值为临界点，采用并联的方式进行联合检测预测AMI 患者预后价值，其AUC 为0.726，敏感度为83.33%，特异度为61.90%，联合检测AUC及敏感度均高于各指标单独检测，见表3。

表3 血清高密度脂蛋白、LncRNA-MALAT1 水平预测AMI 患者近期发生MACE 价值

3 讨论

AMI 指的是由于冠状动脉内突然的血栓形成，导致了血液不能够通过冠状动脉给心肌细胞供血和供氧，此时心肌就会出现坏死，是一种可能危及生命的急性冠脉综合征，具有发病突然、死亡风险较高等特点，临床主要采用PCI 术治疗。但PCI 术后仍存在急性心力衰竭、严重心律失常等MACE 事件发生的风险，严重威胁患者生存[8]。因此，早期有效诊治对控制AMI 疾病发展以及降低死亡率具有不可忽视的意义。

Gensini 评分是冠脉狭窄程度的常见评分，可有效反映冠状动脉病变的发生及严重程度[9]。本研究发现，Gensini评分≥60 分组和Gensini评分＜60 分组患者在高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 方面差异均有统计学意义（均P＜0.05）。LncRNAs是一类长度超过200 nt的RNA，可以以RNA 的形式调控下游多种基因表达，参与癌症、神经系统、心血管系统等多种疾病的发生和进展[10-11]。lncRNAs 广泛参与心脏发育、动脉粥样硬化、心肌梗死、心脏衰竭、高血压和动脉瘤等发病过程中[12-13]。既往有研究显示，血清LncRNA-MALAT1在AMI 患者中呈高表达，可作为AMI 患者MACE风险评估的重要生物标志物[14]。本研究结果表明，血清高密度脂蛋白、cTnⅠ、hs-CRP、CK-MB、LncRNA-MALAT1 水平与AMI疾病严重程度有关。

本研究120 例AMI 患者经6 个月随访后有36例患者出现MACE，MACE 组患者血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高于非MACE 组。这提示AMI 患者预后可能与血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平高低存在一定关联。LncRNA-MALAT1 在心血管疾病中发挥重要作用。有研究显示，血清LncRNA-MALAT1 水平可用于预测AMI患者心室重构情况，推测血清LncRNA-MALAT1 水平可用于评估AMI 患者预后情况[15]。本研究结果显示，血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平均具有预测AMI 预后价值，AUC 分别为0.641，0.692，联合检测AUC及敏感度均高于各项指标单独检测，这提示血清高密度脂蛋白和LncRNAMALAT1 水平能较好预测AMI患者预后，联合检测可提高AMI 敏感性。

综上所述，血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1 水平可影响AMI 患者疾病严重程度，两个指标联合应用可有效预测患者短期预后情况，临床可通过检测血清高密度脂蛋白和LncRNA-MALAT1水平变化，评估患者预后，并及时采取对应预防干预措施减少患者病死风险。尽管本研究可为临床改善AMI患者提供科学依据，但仍存在一定的不足之处。本研究纳入样本量偏小，且患者均来自同一家医院，可能造成数据存在偏倚；且随访时间较短，对于上述指标能否预测AMI 患者治疗后远期预后需要扩大样本量延长随访时间行进一步分析研究。

利益冲突 所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明 邵灿：研究命题的提出、设计，撰写论文；周文：采集及清洗数据、筛选病例；陈芙蓉：实施研究、论文审定、实施研究