猪流行性腹泻病毒感染机制与防控措施

王博伟

（廊坊市安次区农业农村局 河北廊坊 065000）

猪流行性腹泻病毒（porine epidemic diarrhea virus，PEDV）可感染不同日龄、品种的猪只，其中以哺乳仔猪和育肥猪的易感性高。猪群感染后临床主要表现为持续性水样腹泻，消瘦，呕吐，采食量下降。种猪和育肥猪感染一周后大多能够耐过，逐渐恢复正常，病死率极低，愈后良好，但一周龄以内的新生仔猪感染后发病率可达100%，死亡率高达50%～100%[1]。该病自20 世纪七八十年代在欧洲猪场首次发现后，便迅速开始在世界范围内广泛流行。期间随着疫苗的大量使用发病率已经逐渐趋于平稳，直至2010 年，高毒力PEDV 毒株的发，导致猪流行性腹泻（porine epidemic diarrhea，PED）在全球范围内又一次广泛流行。为了有效降低猪流行性腹泻的发生率，掌握该病科学的防控策略，世界各国的科研人员和兽医工作者对该病的感染机制和防控措施进行了不懈的研究。本文结合近几年来猪流行性腹泻病毒的研究进展对该病的感染机制及综合防治措施进行综述。

1 猪流行性腹泻病毒病原学概述

PEDV 属冠状病毒科，α 冠状病毒属成员。PEDV 病毒外观多为球形，粒子直径范围为：50～140 nm。病毒内部由核衣壳和核芯构成，外部有囊膜包裹，囊膜表面分布着放射状排列的纤突，纤突长约10 nm。PEDV 基因组全长28 kb，病毒5'UTR 有复杂的二级结构，含病毒转录和复制元件；3'UTR 有特殊的RNA 结构和复制酶结合的位点，参与调控病毒RNA 的复制和合成[2]。主要编码4 个结构蛋白：纤突蛋白（S），小膜蛋白（E），囊膜蛋白（M）)和衣壳蛋白（N）和一个辅助蛋白ORF3。

PEDV 对低温有一定的抵抗力，在pH 值4～9 的环境中相对稳定，没有血凝活性。对消毒剂敏感，容易被2%氢氧化钠、甲醛、氯仿、酚类等多种消毒剂灭活。

2 猪流行性腹泻病毒的主要感染机制

猪流行性腹泻病毒的发病机制与感染猪只日龄、病毒毒力、疫苗接种途径和接种剂量存在相关性。通常人们认为粪-口传播是PEDV 传播的主要途径。但随着规模化猪场生物安全制度的不断完善和研究机制的不断深入，有学者认为PEDV 可能还存在其他的感染途径。李昱辰等[3]通过喷鼻感染试验证明PEDV 能够通过鼻腔感染，引起仔猪肠道发病，并对PEDV 在仔猪体内经鼻腔黏膜扩散至肠道的具体机制进行了研究。国外也有关于PEDV 称能够通过气溶胶传播的相关报道。

PEDV 主要感染猪肠上皮细胞，感染后造成肠上皮细胞变性，肠绒毛萎缩，脱落，肠道完整性降低，水分流失进入肠腔出现高渗透压，感染后的肠细胞功能紊乱，从而导致消化和吸收不良性腹泻的发生。S 蛋白作为PEDV 重要的功能蛋白之一，与其他冠状病毒的S 蛋白一样，具有能够与受体分子发生相互作用的结构区域，是病毒感染宿主细胞的第一步，病毒通过S 蛋白与宿主细胞表面的入侵受体结合后，通过网格蛋白介导的细胞内吞途径入侵宿主细胞。研究表明PEDV 与受体结合后会引起细胞的微丝骨架重排，改变细胞膜表面形态，为成功入侵宿主细胞提供了有利条件[4]。关于PEDV 的主要入侵受体，研究人员曾经一度认为是氨肽酶N（APN），但在随后的研究中发现APN 可能不是PEDV 的唯一功能受体，PEDV 是否还存在其他的入侵受体，对此尚无定论。

病毒入侵宿主细胞后释放基因组，以基因组RNA 为模板，利用宿主细胞的酶系统、细胞器和原材料进行自身的复制和组装。病毒在复制过程中会破坏宿主细胞的细胞器，影响宿主细胞的酶活性，改变宿主细胞的生命活动，诱导宿主细胞完全自噬，造成宿主细胞功能障碍。在PEDV 感染后期，宿主细胞的凋亡率明显升高，并呈现出明显的时间与剂量依赖性[5]。学者研究发现，PEDV 木瓜样蛋白酶（PLP）在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用，也有学者认为PEDV 诱导细胞凋亡是通过线粒体中细胞凋亡诱导因子（AIF）介导而产生[6,7]。病毒粒子组装完成后，以出芽的方式形成成熟的病毒粒子，然后通过胞吐作用释放出细胞外。研究表明在病毒释放过程中E 蛋白起着重要作用[8]。上述研究说明，PEDV 对宿主细胞的影响随着感染时间而不断变化的，感染初期主要通过诱导自噬抑制细胞凋亡，从而完成病毒自身复制，感染后期则通过诱导宿主细胞凋亡，而释放出更多的病毒粒子到细胞外。

3 猪流行性腹泻病毒的防治措施

3.1 免疫接种

疫苗接种是预防传染病发生流行的重要措施，因地制宜制定科学合理的免疫程序是重中之重。对于猪流行腹泻的防治可以选用猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗，或灭活苗进行免疫，通常使用活苗+活苗，或活苗+灭活苗。建议免疫程序为：后备母猪在配种前增加两次免疫，经产母猪每年进行两次普免，分娩前30 d 免疫1 次。2010 年，随着PEDV 变异株的出现，我国各地区养殖场出现大规模的PED 疫情，主要由于传统的CV777 毒株的疫苗对PEDV 变异株的感染没有保护作用[8]。但目前，市场上已经有针对PEDV 变异株的感染的疫苗，如：猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（SD/L 株+LW/L 株），猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗（WH-1R 株+AJ1102-R 株）等，广大生猪养殖户可以根据自身具体情况进行疫苗的选择。

3.2 生物安全综合防控

有效的生物安全措施是阻止传染病和病原微生物进入猪场的重要途径，严格的卫生和生物安全措施可以有效防止猪流行性腹泻病毒入侵。要防止猪流行性腹泻的发生，从根源上解决猪流行性腹泻问题困扰，就必须要优化猪场的生物安全方案。外防输入，内防扩散。严格把关靠近养殖场的所有社会车辆，对饲料车、售猪车等必须进入猪场的车辆必须严格按照车辆三级洗消程序进行消毒、烘干；加强对猪只销售环节的关注，售猪时采用三段赶猪模式：第一段为猪舍内赶猪；第二段为猪舍门口到售猪台；第三段为守住台到装猪车。场内人员禁止进入售猪车内，出场猪只不得赶回猪舍；所有进入养殖场的人员必须进行洗澡消毒，按照场区要求进行隔离，更换场内衣物和鞋子后才能够进入场区；生活物资及其其他进场物资，要在消毒间进行熏蒸、气雾或者臭氧消毒后才能后带入场内。

养殖场内部布局合理，生产区和生活区的衣物、用具、鞋靴等不可混用，各猪舍之间的物料、工具等也不得交叉使用。发病猪舍和其他健康单元之间设置隔离带，为防止病毒扩散，人员、物资尽量要实现单向流通。为避免冲水污染，可将发病猪舍的下水道出口堵住，不使用水冲粪，同时尽量减少用水量。发病猪只产生的粪尿等统一进行打包，就地处理，病死猪只或胎衣等就地深埋，不得堆积到公共粪池[9]。加强对猪舍的消毒工作，对发病猪舍的墙面、地面、栏舍、器具及物料等进行彻底消毒后，使用高锰酸钾等进行熏蒸，之后开窗通风，再次进猪前，使用白石灰乳会产床进行白化，切断传播途径，降低连续发病概率。

3.3 病情控制

猪场一旦发生猪流行性腹泻感染后首先要将病情上报上级兽医主管部门，及时隔离患病猪群，防止病毒扩散。排查致病源，选择合理的治疗方案进行综合治疗，治疗期间不得随意使用抗生素类药物。其次，对于发病猪群进行静默饲养，尽量减少人员和猪群流动，为避免猪只脱水，应该供给充足的饮水供猪只自由饮用。对病死猪只按要求进行无害化处理，及时淘汰没有饲养价值的僵猪。最后，加强对猪群的饲养管理工作，对隔离猪舍和病猪接触的物品、器具、车辆等进行的严格消毒处理。隔离猪舍饲养员禁止串舍，尽量减少和其他猪舍饲养员的接触机会，防止交叉感染。

另外，要做好母猪和仔猪的日常护理：猪场发生猪流行性腹泻后对14 日龄以上的仔猪进行紧急断奶，对于小日龄无法断奶的仔猪，灌服IgA 抗体含量较高的初乳，10 mL/次，2 次/d。加强对紧急断奶仔猪的护理，适当补充水分，口服补液盐，饲料中添加抗菌肽、电解质、多维等提高仔猪抵抗力，大群用药防治继发感染。务必注意断奶仔猪的保温工作，必要时需增加保温灯、保温箱等供暖措施，同时加强夜间防护，减少经济损失。■