基于气相色谱法的帕瑞昔布钠中残留溶剂测定分析

卢桂清,吴姗娜

(厦门大学附属第一医院,福建 厦门 361000)

帕瑞昔布钠是属于特异性的环氧合酶-2 (COX-2)抑制剂属于特异性抑制剂的一种,该药物应用于慢性、急性疼痛镇痛治疗中,通过抑制COX-2使得患者的前列腺素生成被抑制,起到明显镇痛效果。帕瑞昔布钠作为非甾体抗炎药的一种,主要给药方式为静脉滴注、肌肉注射,临床应用率较高[1-2]。帕瑞昔布钠制作需要使用白色粉末,可溶于水,268℃熔点。该药物合成中需要使用有机溶液二氯甲烷、甲醇、乙醇、环己烷等,根据《中华人民共和国药典》相关要求,需要对该药物有机溶液残留量进行控制,以有效确保药物品质。在帕瑞昔布钠质控过程中,顶空进样毛细管气相色谱法测定准确性较高,建立该种检验方法实用意义较高[3-4]。本文研究对残留溶剂测定(帕瑞昔布钠)进行分析,探究气相色谱法应用可行性,报告如下。

1 仪器及材料

1.1 实验仪器

Agilent DB-624毛细管柱(30 m×0.32 mm,1.8μm)、电子分析天平(BS124S;德国Sartorius股份有限公司)、顶空进样器(7697A)、氢空一体机(HA-300;北京中惠普分析技术研究所)等。

1.2 材料

帕瑞昔布钠(成都克莱蒙医药科技有限公司)、N,N-二甲基甲酰胺(HPLC级;上海星可高纯溶剂有限公司)、正己烷(HPLC级;上海星可高纯溶剂有限公司)、无水乙醇(HPLC级;上海星可高纯溶剂有限公司)、二氯甲烷(HPLC级;成都科龙化工试剂厂)、乙酸乙酯(HPLC级;天津科密欧化学试剂有限公司)、三乙胺(HPLC级;天津科密欧化学试剂有限公司);4-二甲氨基吡啶(HPLC级;上海易势化工有限公司)。

1.3 测试样品配置

混合对照溶液:选取适量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺,制成要求(0.55 mg乙醇+0.06 mg二氯甲烷+0.029 mg正己烷+0.032 mg三乙胺+0.5 mg乙酸乙酯+0.5mg 4-二甲氨基吡啶)/mL,20mL顶空瓶中放置,密封。

对照溶液:二甲基亚砜+实验溶剂(包括二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺),分别进行配置,100mL量瓶中放置,稀释定容至刻度。

供试溶液:帕瑞昔布钠原料药约100mg,顶空瓶中防治,精密量取1.0mL二甲基亚砜溶解,密封。

2 结果

2.1 色谱条件分析

经过试验测定发现,条件B进行二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺测定条件,上述残留溶剂测定分离度更为理想,详见表1。

表1 色谱条件

2.2 检测限情况

使用精密测量仪器,选取适量二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺增加到对照溶液中,放置于不同量瓶中,采用逐级稀释法,获得一系列不同浓度溶液,将获得不同浓度的溶液放置于顶空瓶中密封待测。使用选择条件B对不同浓度溶液进行测定,记录色谱图,以信噪比10:1为检测限,以信噪比3:1为定量限度,结果见表2。

表2 检测限情况(μg)

2.3 标准曲线分析

使用精密测量仪器,选取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺0.1mL、0.2mL、0.5mL、0.8mL、1.2mL、1.5mL放置于对照溶液中,分置于10mL量瓶中,按照要求稀释至要求刻度。使用精密测量仪器,取上述配制溶液1.0mL,放置于20mL顶空瓶中密封,摇匀后获得标准曲线溶液。对标准缺陷溶液按照“2.1”中条件B进行气相色谱法测定,各残留溶剂的质量浓度ρ(单位:mg/L)为横坐标,峰面积A为纵坐标,进行线性回归分析,结果显示二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷、三乙胺在各自的质量浓度内线性关系良好,详见表3。

表3 线性回归方程、相关系数

2.4 精密度、稳定性情况

使用精密测量仪器,选取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合对照溶液1.2mL放置于顶空瓶内,共计选取8份,密封处理。按照“2.1”条件B进行气相色谱法测定,记录色谱图上二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷色谱峰面积,进行RSD计算,结果显示二氯甲烷RSD 1.14%、乙醇RSD 1.12%、乙酸乙酯RSD 1.03%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.18%、正己烷RSD 2.18%、三乙胺RSD 2.16%,结果表明色谱系统精密度较为理想。选取同一批次帕瑞昔布钠供试溶液,按照“2.1”条件B进行气相色谱法测定,结果显示测定微量乙醇,RSD 1.27%。

使用精密测量仪器,选取二氯甲烷、乙醇、乙酸乙酯、4-二甲氨基吡啶、正己烷混合对照溶液,1.2mL放置于顶空瓶内,共计选取8份,密封处理。放置于室温环境,每间隔1h取溶液,按照“2.1”条件B进行气相色谱法测定,记录各个残留溶剂的峰面积。计算结果显示二氯甲烷RSD 1.34%、乙醇RSD 1.82%、乙酸乙酯RSD 2.04%、4-二甲氨基吡啶RSD 2.57%、正己烷RSD 2.36%、三乙胺RSD 2.49%,结果表明混合对照溶液在室温条件下24 h内稳定。

3 讨论

帕瑞昔布钠作为临床上有效镇痛的非甾体药物,可快速镇痛,改善患者躯体不适感,确保药物品质可使得药物效用充分发挥。受药物制作工艺限制,目前该药物在制作期间,需要使用乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物质,可能存在有机溶液残留情况,建立一种科学、准确测定方法,对于控制帕瑞昔布钠质量具有积极意义[5-6]。

气相色谱法可以进行药物相关残留成分、杂质等测定,是目前药品质量控制中较为常用的技术之一[7]。采用气相色谱法测定时,根据帕瑞昔布钠可能存在的乙醇、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、三乙胺、4-二甲氨基吡啶等物质特点,选择相应色谱条件,确保测定结果稳定、准确。因本品需要检测的有机溶剂的极性应与色谱柱的极性相似,所以采用中极性的6%氰丙基苯基、94%二甲基聚硅氧烷、交联聚乙二醇为固定相的毛细管柱为色谱柱进行测定。同时测定中,选择采取顶空进样的方式,减少色谱系统出现污染情况,进一步提高测定结果的准确性、稳定性。气相色谱法分析中,尤其考虑到三乙胺、4-二甲氨基吡啶物质的特殊性,在选择色谱条件时,单独进行设计,确保测定结果准确可靠[8]。此次研究结果显示6种残留溶剂在各自的质量浓度内线性关系良好;气相色谱法测定帕瑞昔布钠中残留溶剂的精密度、稳定性情况理想。

综上所述,气相色谱法测定帕瑞昔布钠中残留溶剂的精密度、稳定性情况理想。