血清中Ⅲ型胶原蛋白水平对HIV 感染者肝纤维化及其肝功能障碍的预测价值

林兴明，王希会

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是人体免疫缺损病毒，俗称艾滋病病毒。人类在感染该病毒后会导致免疫功能部分或完全丧失［1］。HIV 的流行呈世界性分布，近年来，HIV 在亚洲也呈现出高速增长的流行趋势［2］。我国自1985 年首次发现HIV 感染者后，对HIV 感染的研究也在不断深入［3］。有研究表明，HIV 感染不仅会导致免疫缺陷，还会使患者的肝脏发生炎症或纤维化等病变或功能障碍［4］。因此，寻找有效的指标，实现对HIV 感染者肝纤维化及肝功能障碍的预测显得尤为重要。胶原蛋白是人体中最为丰富的一种蛋白质，Ⅲ型胶原蛋白（collagen typeⅢ，COLⅢ）作为其中之一，其水平的异常与肝脏病变密切相关［5］。因此，本研究分析HIV 感染者血清中COLⅢ水平，评估其对患者肝纤维化及肝功能障碍程度的预测价值，以期阐明HIV 感染者血清中COLⅢ预测肝纤维化及肝功能障碍程度的临床效果。

1 对象与方法

1.1 研究对象 以2017 年5 月至2022 年12 月收治于临沂市中心医院的121 例HIV 抗体筛查呈阳性且接受抗逆转录病毒治疗的HIV 感染者作为研究对象。入组患者年龄为（46.21 ± 5.14）岁，其中男性患者62 例，年龄为（41.67 ± 6.51）岁；女性患者59 例，年龄为（47.94 ± 4.76）岁。

所有入组患者均由专业人员进行B 超引导下肝脏穿刺活检，于患者初次就诊及6 个月随访时根据活检的组织学分期对患者的肝纤维化程度进行评估。S0 期表示无纤维化；S1 期为轻度纤维化，即汇管区扩大；S2 期为中度纤维化，即小叶结构仍保留，形成纤维间隔；S3 期为进展期肝纤维化，即小叶结构紊乱伴发纤维间隔，但未发生肝硬化；S4 期为肝硬化期，即发生早期肝硬化或肯定肝硬化。本研究已经过院内伦理委员会审批，所有患者均签署知情同意书，均无患者出现严重穿刺后并发症。

1.2 方法 于患者初次就诊及6 个月随访时收集并分离其外周血血清样本，采用COLⅢ放射免疫试剂盒（上海史瑞可生物科技有限公司）检测血清中COLⅢ水平；采用化学发光法（肝纤维化4 项试剂盒购自北京源德生物医学工程有限公司）检测肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原（procollagen Ⅲ，PCⅢ）、Ⅳ型胶原（collagen Ⅳ，ⅣC）、透明质酸酶（hyaluronic acid，HA）及层粘连蛋白（laminin，LN）水平；采用Olympus AU5421 全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase，AST）、胆红素（serum bilirubin，SB）及前白蛋白（prealbumin，PA）水平。

1.3 统计学处理 采用SPSS 22.0 统计软件进行实验数据分析。计量数据以表示，行配对t检验。同时采用受试者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价各检测指标对肝纤维化及肝功能障碍程度的预测效能，并用多元Logistic回归法分析相关性。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝纤维化分期的关系 根据121 例HIV 感染者初次就诊时组织学分期对其肝纤维化程度进行评估，并检测所有患者血清中COLⅢ水平。结果表明，与S0 期相比，S1～S4 期患者血清中COLⅢ水平逐渐升高，差异有统计学意义（P<0.05）。6 个月随访时再次对患者肝纤维化程度进行评估，并检测COLⅢ水平。结果发现，部分患者出现肝纤维化进展，其血清中COLⅢ水平也有所增加。见表1。由此可知，随着HIV 感染者肝纤维化程度的加剧，其血清中COLⅢ水平也呈现逐渐升高的趋势。

表1 121 例HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝纤维化分期的关系（ng/ml，）

表1 121 例HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝纤维化分期的关系（ng/ml，）

注：与S0 期比较aP<0.05，bP<0.01。HIV 为人类免疫缺陷病毒，COLⅢ为Ⅲ型胶原蛋白

时间节点初次就诊COLⅢ28.36 ± 11.23 57.62 ± 13.57a 63.59 ± 14.82a 78.34 ± 13.59b 86.57 ± 16.24b 32.17 ± 13.02 60.12 ± 14.58a 65.09 ± 13.93a 79.33 ± 12.89b 87.78 ± 16.82b 6 个月随访时肝纤维化分期S0 S1 S2 S3 S4 S0 S1 S2 S3 S4例数21 23 26 29 22 11 25 27 30 28

2.2 HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝纤维化标志物的预测效能分析 绘制ROC 曲线，以曲线斜率45°切点位置为最佳临界值，分析HIV 感染者血清COLⅢ水平与传统肝纤维化标志物PCⅢ、ⅣC、HA及LN 的独立预测效能及4 种肝纤维化标志物的联合预测效能。结果表明，COLⅢ对肝纤维化患者具有高水平的灵敏度、特异度，具备最高的预测效能。见表2。该结果提示HIV 感染者血清COLⅢ对肝纤维化的预测效能优于常规4 项肝纤维化标志物独立及联合预测效能。

表2 HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝纤维化标志物的预测效能分析

进一步以肝纤维化程度为因变量，其他检测指标为自变量，对HIV 感染者肝纤维化进行多元Logistic 回归分析，结果表明，COLⅢ是HIV 感染者肝纤维化的主要影响因素。见表3。

表3 HIV 感染者肝纤维化标志物的多元Logistic 回归分析

2.3 HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝功能障碍标志物的预测效能分析 为探究HIV 感染者血清

COLⅢ水平与肝功能障碍程度的关系，可检测能够反映肝细胞受损程度的ALT 及AST 水平，以及检测胆红素代谢指标SB 及反映肝脏合成能力的PA 水平。经过效能分析发现，HIV 感染者的血清COLⅢ水平以最高的灵敏度、特异度成为肝功能障碍程度最具效能的预测指标。见表4。

表4 HIV 感染者血清COLⅢ水平与肝功能障碍标志物的预测效能分析

2.4 HIV 感染者肝功能障碍标志物的多元回归分析 以HIV 感染者肝功能障碍为因变量，COLⅢ、

ALT、AST、SB 及PA 为自变量，进行多元Logistic 回归分析，结果表明，HIV 感染者肝功能障碍的主要影响因素为COLⅢ及AST。见表5。

表5 HIV 感染者肝功能障碍标志物的多元Logistic 回归分析

3 讨论

近10 年来，人类被HIV 感染导致艾滋病的发病率、死亡率和新增HIV 感染率都在逐年上升［6］，HIV 感染导致的肝损伤也成为不容忽视的问题［7］。肝脏不仅参与机体的多种代谢过程，还承担一定的免疫功能。在人体感染HIV 后，肝脏也会受到一定程度的损伤。除了HIV 本身对肝细胞直接作用外，HIV 合并感染和治疗用药也可引起肝脏损伤［8］。近年来，随着对HIV 感染者进行抗逆转录病毒治疗，HIV 感染者的生存质量和生存期显著改善，艾滋病相关疾病的死亡率也在逐步下降［9］。然而，在此过程中，肝脏疾病成为艾滋病致死的一种最常见并发症，占所有艾滋病死亡率的14%～18%［10］。HIV 感染者的肝损伤主要包括肝功能异常、肝衰竭、肝纤维化、肝硬化、原发性肝癌和终末期肝病表现［11］。为了准确预测HIV 感染者肝脏损伤程度，寻找有效的预测标志物成为至关重要的环节。

肝纤维化是肝内结缔组织异常增生的病理生理过程，其临床常表现为出现蜘蛛痣、鼻出血、牙龈出血、皮肤和黏膜有紫斑或出血点。肝纤维化的影像学检查包括B 超、CT 和肝脏超声波测定。目前常用的肝纤维化4 项检查则是检测PCⅢ、ⅣC、HA及LN 的表达水平。肝纤维化4 项指标水平很大程度上受到肝脏的炎症影响，因此特异度不高［12］。COLⅢ是PCⅢ的代谢产物，在肝纤维化患者中会有表达水平改变，但关于其对合并HIV 感染的肝纤维化患者是否具有预测价值尚缺乏相关报道。此外，由于肝脏主要参与物质代谢、生物转化、凝血物质的生成和消除、胆汁的生成和排泄以及特异和非特异性免疫，因此在人体发生肝功能障碍时，在临床上会表现为肝细胞损伤、消化功能障碍、白蛋白合成障碍、糖代谢障碍、脂肪代谢障碍、维生素类代谢障碍、激素代谢异常等症状，在检测中常用的指标则包括肝细胞损伤标志物、胆红素代谢标志物及肝脏合成功能标志物等［13］。肝纤维化患者大多伴随不同程度的肝功能障碍，因此COLⅢ是否与HIV 感染者肝功能障碍发生相关也是值得探索的临床问题。在本研究中，观察到与肝纤维化S0 期的HIV感染者相比，S1～S4 期HIV 感染者血清COLⅢ水平逐渐升高。进一步分析表明，HIV 感染者COLⅢ对肝纤维化的预测效能高于常规肝纤维化标志物独立及联合预测效能；回归分析也表明COLⅢ是HIV 感染者肝纤维化的影响因素。COLⅢ对HIV感染者肝功能障碍程度也具有良好的预测效能，且经回归分析表明，COLⅢ是HIV 感染者肝功能障碍的影响因素之一。提示COLⅢ在HIV 感染者肝纤维化及肝功能障碍程度预测中具有重要价值。分析原因，可能是PCⅢ与肝纤维化形成的病变程度存在相关性，但并没有很强的特异度，因为其他器官纤维化时，PCⅢ水平也会升高；此外，慢性肝炎患者的PCⅢ水平持续升高也提示病情向肝硬化发展。因此，PCⅢ水平不仅能够进行肝纤维化的早期诊断，也能够判断慢性肝病的预后。PCⅢ水平能够在一定程度上反映肝内COLⅢ合成情况。越来越多的研究表明，COLⅢ水平与肝纤维化密切相关，降低COLⅢ水平能够有效缓解肝纤维化进程［14］。

综上所述，血清中COLⅢ水平能够有效预测HIV 感染者肝纤维化及肝功能障碍程度，可作为此类患者发生肝纤维化及肝功能障碍的潜在生物学标志物，具有一定的临床应用价值。