肺腺癌组织及其癌旁组织TS、Src表达情况及与生存时间的相关性

许建强，印倩，宋正义，田秀文，谢东升，龚建化

1.长江大学附属荆州医院呼吸与危重症医学科，湖北荆州 434020；2.三峡大学第三临床医学院（国药葛洲坝中心医院）呼吸与危重症医学科，湖北宜昌 443002；3.三峡大学第三临床医学院（国药葛洲坝中心医院）病理科，湖北宜昌 443002；4.三峡大学第三临床医学院（国药葛洲坝中心医院）胸外科，湖北宜昌 443002；5.三峡大学第三临床医学院（国药葛洲坝中心医院）老年医学科，湖北宜昌 443002

从基因组学、蛋白质组学角度出发，进行探索分析，是一种快捷的研发路径，也是适应不同患者个性化治疗需求、解决耐药问题的重要思路[1-8]。长期以来，胸苷酸合成酶（thymidylate synthase, TS）、酪氨酸激酶（src tyrosine kinase, Src）均是肿瘤化疗及抑制微生物生长的重要靶点[9-10]，相关研究资料逐渐增多，但学界更关注相关机制、基因多态性研究，肺腺癌组织及其癌旁组织中TS、Src表达特点及临床意义的研究目前尚处于起步阶段。本研究回顾性分析2020年1—12月在国药葛洲坝中心医院行手术切除治疗的肺腺癌116例患者的临床资料，主要观察肺腺癌组织及其癌旁组织中TS、Src的表达情况，并探究TS、Src表达的临床意义，以期探索TS、Src作为肺腺癌治疗靶点的可行性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析在本院行手术切除治疗的肺腺癌116例患者的临床资料。其中男47例，女69例；年龄＜60岁76例，≥60岁40例；吸烟史42例；文化水平中学47例，中专/高中56例，大学及以上13例；基础疾病：高血压者15例，糖尿病17例，冠状动脉粥样硬化性心脏病（简称冠心病）8例，血脂异常11例。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：标本涉及肺腺癌组织、癌旁组织（距离肺腺癌组织5 cm的阴性组织标本）、均经胸外科手术切除病灶，基因检测证实为驱动基因阴性或未进行基因检测患者；入组时未接受任何治疗（放疗、靶向治疗等）；病历资料齐全，且有超过5年的完整随访资料。

排除标准：复发性肺癌患者；术前接受过其他治疗患者；确诊其他部位恶性肿瘤患者；合并其他肺部疾病患者；临床资料残缺患者；精神疾病患者。

1.3 方法

对TS、Src蛋白均采用微量凯氏（Kjeldahl）定氮法进行检测，同时分析其在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达，及其与患者生存时间的相关系。

1.4 观察指标

统计TS及Src在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达情况，分析肺腺癌组织TS及Src表达与患者总生存期（overall survival, OS）与无病生存期（disease free survival, DFS）的关系。其中TS及Src蛋白在肺腺癌组织、癌旁组织中均有表达，相关表达均位于细胞胞浆中，TS及Src蛋白表达通过免疫组织化学染色（IHC）以染色剂作用后的颜色变化为标准，如观察到TS及Src蛋白呈现棕黄色或棕褐色颗粒，可认为是TS及Src蛋白高表达，提示为阳性，则纳入本研究阳性例数统计。

1.5 统计方法

使用SPSS 20.0统计学软件处理数据，符合正态分布的计量资料以（）表示，两组间差异比较用t检验。计数资料以例数（n）和率（%）表示，组间差异比较采用χ2检验。采用Pearson 相关性系数进行相关性分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肺腺癌组织及癌旁组织中TS及Src表达情况比较

免疫组化染色发现，肺腺癌组织中TS表达阳性率为41.38%，高于癌旁组织的10.34%，差异有统计学意义（P＜0.05）。肺腺癌组织中Src表达阳性率为59.48%，高于癌旁组织的15.52%，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 肺腺癌组织及癌旁组织中TS及Src表达情况比较[n(%)]

2.2 不同TS表达组OS及DFS比较

TS低表达组OS及DFS均显著长于TS高表达组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同TS表达组OS及DFS比较[()，年]

表2 不同TS表达组OS及DFS比较[()，年]

组别低表达组（n=27）高表达组（n=33）t值P值DFS 1.46±0.23 1.05±0.21 7.208＜0.001 OS 2.47±0.41 1.92±0.40 5.240＜0.001

2.3 不同Src表达组OS及DFS比较

Src低表达组OS及DFS均显著长于Src高表达组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同Src表达组OS及DFS比较[()，年]

表3 不同Src表达组OS及DFS比较[()，年]

组别低表达组（n=31）高表达组（n=56）t值P值DFS 1.49±0.24 1.01±0.25 7.532＜0.001 OS 2.42±0.48 1.75±0.43 5.698＜0.001

2.4 TS及Src表达情况与DFS、OS相关性分析

TS及Src蛋白表达情况与DFS、OS均呈负相关性，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 TS及Src表达情况与DFS、OS相关性分析

3 讨论

近年针对恶性肿瘤靶向治疗的兴起，并体现出良好应用前景，在此背景下，开发肺腺癌组织靶点，用于治疗新型靶向分子治疗药物，对于提升肺腺癌临床治疗效果，进一步延长患者的生命具有重要意义[11-12]。目前，已有大量研究证实TS、Src可以作为恶性肿瘤治疗靶点[13]，有望进一步推动恶性肿瘤分子治疗发展。现今阶段，国内外针对肺腺癌患者TS、Src表达的相关研究资料较少，对于TS、Src具体表达特点及临床意义尚未明确，无法有效指导临床为肺腺癌患者制订个性化治疗方案。本研究以116例肺腺癌患者手术切除病理组织为例，进行免疫组化实验，观察TS、Src表达情况，并分析TS、Src表达与患者生存情况之间的关系。

本研究以免疫组化实验方法，分别检测116例肺腺癌患者肺腺癌组织、癌旁组织TS、Src表达情况。观察肺腺癌组织、癌旁组织中Src表达情况，发现均有阳性表达情况，表达于细胞胞浆和/或细胞核中，以细胞胞浆为主，呈现棕黄色或棕褐色颗粒。其中肺腺癌组织中Src表达阳性率为59.48%，高于癌旁组织的15.52%（P＜0.05）。由此判断，Src在肺腺癌组织中呈现高表达特点。肺腺癌组织中Src阳性表达率升高，多种生长因子受体信号通路可以通过激活Src表达，促进恶性肿瘤的发生与发展，参与肺腺癌进展过程。由此判断，Src可以作为肺腺癌治疗靶点，抑制Src表达能够控制肺腺癌细胞生长与增殖，促进肿瘤细胞凋亡。本研究认为肺腺癌组织Src表达情况与患者的症状体征密切相关，提示Src可能能够用于评估肺腺癌患者病情严重程度，进而指导临床合理制订治疗方案。最后本研究发现116例肺腺癌组织中，TS阳性表达48例，其中93.75%（45例）同时Src阳性；TS阴性表达68例，其中64.71%（44例）同时Src阴性。该结果与郭秀华[14]研究认为的肺腺癌组织中TS蛋白阳性表达率为91.73%，同时Src阳性相一致。由此可知，TS和Src表达密切相关，两者可能共同参与恶性肿瘤的发生及发展过程，相互调节，协调作用，共同影响患者预后生存率。

同时本研究发现TS和Src低表达组的OS及DFS均显著长于TS和Src高表达组（P＜0.05）。TS蛋白影响肺腺癌患者预后生存的具体机制尚不明确，可能与TS的基因多态性有关。目前已有大量研究证实，TS基因多态性会影响恶性肿瘤治疗（尤其是化疗）的敏感性，进而影响预后生存情况。同时Src参与肿瘤细胞浸润、侵袭、转移过程，使肿瘤细胞进展速度加快、恶性程度升高，增加死亡风险，影响临床预后[15]。

综上所述，肺腺癌组织中TS、Src阳性表达率均升高，且TS、Src表达水平越高，其DFS和OS均越短。