江苏草莓二斑叶螨对5种杀螨剂的抗药性监测

江改青 黄孟丽 李雪银 邢梦珂 张博文

（南京市食品药品监督检验院，江苏南京 211198）

二斑叶螨（TetranychusurticaeKoch） 隶属蛛形纲（Arachnida）、蜱螨亚纲（Acari）、真螨目（Acariformes），广泛分布于世界各温带、亚热带地区，是当前设施草莓生产上的首要害虫（Bi et al.，2016；何秉青 等，2023）。成螨和若螨在草莓叶片背面吸食汁液，导致叶片沿叶脉两侧出现白色斑点，危害严重时大量二斑叶螨聚集吐丝结网，叶片逐渐焦枯脱落，植株生长受到抑制，影响草莓产量和品质，甚至造成绝收（Walsh et al.，2002；Wang et al.，2018；陈鹏和刘奇志，2022）。近年来，随着江苏省草莓种植面积的扩大，连作年份的增加，以及普遍采用的匍匐茎苗分株育苗方法，草莓二斑叶螨发生逐年加重。

化学防治仍是防治二斑叶螨的主要手段（韩旸 等，2023）。然而，由于二斑叶螨体型小，繁殖速度快，发育周期较短，世代重叠十分严重，而且既能两性生殖也可孤雌生殖，加上化学药剂的长期、大量及不合理使用等原因，导致二斑叶螨对多种化学药剂产生了抗药性（刘庆娟 等，2011；Xu et al.，2018；Chen et al.，2019；李鉴鉴 等，2020；韩旸 等，2023）。鉴于用药种类和施药频率等方面的差异，不同地区二斑叶螨种群抗药性不同，同一种群不同药剂之间抗药性也不同（Xu et al.，2018；Chen et al.，2019）。本研究采用叶片浸渍法测定了南京溧水、栖霞、高淳、江宁，镇江白兔，泰州泰兴，常州嘉泽，徐州碾庄等江苏8 个地区草莓二斑叶螨田间种群对5 种常用杀螨剂的抗药性水平，比较了杀螨剂在不同地区间的敏感性差异，旨在明确江苏省草莓二斑叶螨田间种群的抗药性现状，为二斑叶螨的可持续防控提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 供试虫源

二斑叶螨敏感种群：由江苏省农业科学院提供，于室内不接触任何药剂情况下继代饲养。

二斑叶螨抗性种群：分别于2022—2023 年，采自江苏南京市溧水区白马镇、栖霞区八卦洲、高淳区漆桥镇、江宁区江宁镇，镇江市白兔镇，泰州市泰兴镇，常州市嘉泽镇，徐州市碾庄镇等8 个地区的草莓种植大棚（表1）。将采集到的二斑叶螨种群分别接种到盆栽草莓（品种为红颜）叶片上饲养，饲养1 代，随机取雌雄成螨进行生物测定。室内饲养条件：温度（25 ± 1）℃，相对湿度60% ± 5%，光周期（昼∶夜） = 16 h∶8 h。

表1 草莓二斑叶螨田间种群采集点信息

1.2 供试药剂

30%乙唑螨腈悬浮剂（沈阳科创化学品有限公司），43%联苯肼酯悬浮剂（爱利思达生物化学品有限公司），30%腈吡螨酯悬浮剂（日产化学株式会社），20%丁氟螨酯悬浮剂（江苏省苏州富美实植物保护剂有限公司），3%阿维菌素微乳剂（陕西上格之路生物科学有限公司）。

1.3 药剂毒力测定方法

所有药剂均采用改进的叶片浸渍法进行测定（李鉴鉴 等，2020）。在预备试验的基础上，首先将每个药剂稀释成5 个系列浓度药液，并设置清水处理作为空白对照，每个浓度重复3 次。选取生理状态一致的成螨，接种到新采集草莓叶片背面，每片复叶接30 头成螨，待二斑叶螨在叶片上稳定取食后（约12 h，以将有螨叶片放入水中，螨掉落数＜ 20%为标准），将有成螨的叶片浸入各浓度药液中，轻轻摇动，5 s 后取出，用滤纸吸去多余药液。然后将草莓叶片叶柄放入一次性水杯（150 mL）中，加入50 mL 自来水。待药液晾干后，统计叶片上的二斑叶螨数量，作为供试基数。将处理的叶螨置于温度（25 ± 1）℃、相对湿度60% ± 5%、光周期（昼∶夜） = 16 h∶8 h 培养箱中饲养，并于48 h 后记录死亡的螨数。用毛笔轻触螨体，螨足不动者视为死亡。统计各处理的总螨虫数、死亡数及存活数。

1.4 数据分析

采用DPS v7.05 数据处理软件处理数据，根据剂量对数和校正死亡率几率值的直线回归法，求出毒力回归方程、LC50值95%置信区间和相关系数r。抗性倍数（RR） = 田间种群的LC50值/室内敏感种群的LC50值。二斑叶螨抗药性水平的分级标准（Xu et al.，2018）：敏感水平（RR ＜ 3）、敏感度下降（3≤ RR ＜ 5）、低水平抗性（5 ≤ RR ＜ 10）、中水平抗性（10 ≤ RR ＜ 40）、高水平抗性（40 ≤ RR ＜160）、极高水平抗性（RR ≥ 160）。

2 结果与分析

2.1 草莓二斑叶螨对乙唑螨腈的抗药性

不同地区草莓二斑叶螨对30%乙唑螨腈悬浮剂的抗药性水平有明显差异（表2）。8 个田间种群对30%乙唑螨腈悬浮剂处于敏感至中水平抗性（RR = 1.524～36.267）。其中，南京溧水、镇江白兔、泰州泰兴、徐州碾庄4 个地区种群均处于敏感水平；南京栖霞和常州嘉泽种群处于敏感度下降阶段；南京高淳种群已有低水平抗性；南京江宁种群达到中水平抗性。

表2 草莓二斑叶螨田间种群对30%乙唑螨腈悬浮剂的抗性水平

2.2 草莓二斑叶螨对联苯肼酯的抗药性

不同地区草莓二斑叶螨对43%联苯肼酯悬浮剂的抗药性水平有明显差异（表3）。8 个田间种群对43%联苯肼酯悬浮剂处于敏感至高水平抗性（RR = 2.801～62.605）。 其中， 南京溧水、 镇江白兔、徐州碾庄3 个地区种群均处于敏感水平；泰州泰兴种群处于敏感度下降阶段；常州嘉泽和南京栖霞种群已有低水平抗性；南京高淳种群达到中水平抗性；南京江宁种群达到高水平抗性。

表3 草莓二斑叶螨田间种群对43%联苯肼酯悬浮剂的抗性水平

2.3 草莓二斑叶螨对腈吡螨酯的抗药性

不同地区草莓二斑叶螨对30%腈吡螨酯悬浮剂的抗药性水平有明显差异（表4）。8 个田间种群对30%腈吡螨酯悬浮剂处于敏感至中水平抗性（RR = 1.331～17.285）。其中，南京溧水、镇江白兔、泰州泰兴、徐州碾庄等4 个地区种群均处于敏感水平；南京栖霞和常州嘉泽种群处于敏感度下降阶段；南京高淳种群已有低水平抗性；南京江宁种群达到中水平抗性。

表4 草莓二斑叶螨田间种群对30%腈吡螨酯悬浮剂的抗性水平

2.4 草莓二斑叶螨对丁氟螨酯的抗药性

不同地区草莓二斑叶螨对20%丁氟螨酯悬浮剂的抗药性水平有明显差异（表5）。8 个田间种群对20%丁氟螨酯悬浮剂处于敏感至中水平抗性（RR = 2.233～20.518）。其中，南京溧水、镇江白兔、泰州泰兴3 个地区种群均处于敏感水平；南京栖霞、常州嘉泽、徐州碾庄3 个地区种群处于敏感度下降阶段；南京高淳和南京江宁种群已有中水平抗性。

表5 草莓二斑叶螨田间种群对20%丁氟螨酯悬浮剂的抗性水平

2.5 草莓二斑叶螨对阿维菌素的抗药性

不同地区草莓二斑叶螨对3%阿维菌素微乳剂的抗药性水平也有明显差异（表6）。8 个田间种群对3%阿维菌素微乳剂处于低水平抗性至极高水平抗性（RR = 6.599～340.995）。其中，南京溧水种群处于低水平抗性；镇江白兔种群已有中水平抗性；南京栖霞、南京高淳、泰州泰兴3 个地区种群处于高水平抗性；南京江宁、常州嘉泽、徐州碾庄3 个地区种群已有极高水平抗性。

表6 草莓二斑叶螨田间种群对3%阿维菌素微乳剂的抗性水平

3 结论与讨论

随着人们生活水平的提高，农产品质量安全越来越受重视，绿色生态草莓园也成为市民休闲娱乐好去处（许佳君和王盼盼，2022）。近年来，江苏地区草莓市场需求量在不断增加，种植面积越来越大（常向阳和葛悦，2021)，而草莓二斑叶螨发生也日益严重，给果农带来了较大的经济损失。目前，二斑叶螨已对多种杀螨剂产生了抗药性（van Leeuwen et al.，2010；韩旸 等，2023）。宫亚军等（2014）报道了北京地区的二斑叶螨对阿维菌素的敏感性在逐渐减低。Xu 等（2018）报道了二斑叶螨对乙唑螨腈、腈吡螨酯、联苯肼酯等也产生了抗性。不同地区的二斑叶螨，由于用药背景的不同，对杀螨剂的敏感性有差异（宫亚军 等，2014）。本研究中，江苏8 个地区的草莓二斑叶螨田间种群对5 种常用杀螨剂（30%乙唑螨腈悬浮剂、43%联苯肼酯悬浮剂、30%腈吡螨酯悬浮剂、20%丁氟螨酯悬浮剂、3%阿维菌素微乳剂）的抗性水平亦存在地区间差异。

地区间用药背景会影响二斑叶螨对杀螨剂敏感性水平（宫亚军 等，2014）。南京溧水和镇江白兔草莓二斑叶螨均采自有机草莓种植大棚，生产上平时很少使用化学杀螨剂，更多的依靠捕食螨防治。因此，该地的二斑叶螨对测试的5 种杀螨剂均具有较高的敏感性。南京栖霞草莓二斑叶螨采自种植大户，平时注重科学用药和轮换用药。该地的二斑叶螨对乙唑螨腈、腈吡螨酯、联苯肼酯和丁氟螨酯具有较高的敏感性，但对阿维菌素敏感性较低。南京高淳草莓二斑叶螨采自当地的农户，管理水平一般，该地二斑叶螨对乙唑螨腈、腈吡螨酯、联苯肼酯和丁氟螨酯敏感性水平一般，但对阿维菌素敏感性较低。南京江宁草莓二斑叶螨采自种植户的草莓秧苗田，为了保护草莓幼苗不受叶螨为害，用药种类和用药频率均较高，该地二斑叶螨对测试的5 种杀螨剂敏感性均较低。泰州泰兴、常州嘉泽、徐州碾庄的草莓二斑叶螨均采自草莓种植基地，种植管理水平高，也注重轮换用药和生物防治，但因多年的重复种植，也存在一定的抗性。

本研究监测结果显示，江苏8 个地区草莓二斑叶螨对乙唑螨腈、联苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等4 种杀螨剂，大部分处于敏感水平，部分处于低至中等水平抗性，仅江宁种群对联苯肼酯属于高水平抗性。但各田间种群对阿维菌素均具有抗性，抗性倍数在6.599～340.995 之间，处于低至极高水平抗性。在生产上，对于存在高水平抗性的药剂，应暂停或减少使用，并注重药剂的轮换使用（Bi et al.，2016）。鉴于乙唑螨腈、联苯肼酯、腈吡螨酯、丁氟螨酯等对二斑叶螨的作用机制不同（Zhu et al.，2010；Hayashi et al.，2013；杨国璋，2014；Chen et al.，2019），可根据当地的用药背景，作为防治草莓二斑叶螨的轮换药剂。因此，在二斑叶螨的防治中，应密切注意抗性发展动态，尽量与作用机制不同的有效药剂交替使用，以延缓抗性的产生（Chen et al.，2019）。另外，结合当地的用药背景和药剂特点，合理选择药剂和药剂用量；根据作物生长期调整喷雾用水量，充分结合农业管理、生物防治（Vacacela et al.，2010；郝建强 等，2015）、施肥（Abdelwines & Ahmed，2020）等综合措施，实现对二斑叶螨的可持续防控，确保草莓产品安全。