灵芝降糖方对2型糖尿病患者炎症及免疫作用机制研究

2023-11-28周海姗张曾袁莎莎姚卫国杨宏杰

广州中医药大学学报 2023年12期

周海姗，张曾，袁莎莎，姚卫国，杨宏杰

（1.上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院内分泌科，上海 200437；2.上海市第六人民医院金山分院肾内科，上海 201599）

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由环境、遗传等多方面因素引发的慢性代谢性疾病，主要特征为高血糖以及不同程度的胰岛素分泌不足而引起的不良症状，其中大约有90%为2 型糖尿病（T2DM）[1]。随着社会经济的不断发展以及人们生活水平的不断提高，我国居民的肥胖率越来越高，糖尿病的发生率也因此出现持续增长趋势[2]。T2DM 的主要病机为“本虚标实、虚实夹杂”。疾病初期，以燥热为标，阴虚为本；消渴日久，燥热伤津耗气，可出现气阴两虚等证[3]。糖尿病并发症多发，可涉及机体内多个脏器，导致肝脏、肾脏、心脑血管等疾病的发生，从而严重影响了患者的身体健康和生活质量，严重者可导致残疾或者死亡，给患者家庭和社会带来沉重的负担[4]。灵芝降糖方有益气养阴、滋肾健脾功效，研究[5-6]证明，其在降血糖方面作用显著，同时对倦怠乏力、口燥咽干等症状也有确切的改善作用，可有效促进T2DM 患者病情的恢复。基于此，为进一步探讨灵芝降糖方对T2DM 患者的疗效机制，本研究采用随机对照方法，观察了灵芝降糖方对T2DM 肝肾阴虚证患者的炎症及免疫作用机制。现将研究结果报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象及分组选取2021 年1 月～2022 年2 月上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院内分泌科收治的80 例T2DM 肝肾阴虚证患者为研究对象。根据就诊先后顺序，采用随机数字表法将患者随机分为对照组和观察组，每组各40 例。本研究符合医学伦理学要求并通过上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院伦理委员会的审核批准（批准号：2021-126）。

1.2 诊断标准西医诊断标准：参照中华医学会糖尿病学分会制定的《中国2 型糖尿病防治指南（2020 年版）》[7]中T2DM 的诊断标准。中医辨证标准：参照中国医师协会中西医结合医师分会内分泌与代谢病专业委员会制定的《2 型糖尿病病证结合诊疗指南》[8]及《中药新药临床研究指导原则（试行）》[9]中消渴病肝肾阴虚证的辨证标准。主症：五心烦热，口干夜甚，胁痛，腰膝酸软；次症：低热颧红，眩晕耳鸣，手足抽搐，皮肤干燥，雀目，小便频数，浑浊如膏；舌脉：舌红、少苔，脉细数。具备一项以上主症和不少于两项次症，结合舌脉象，即可辨证为肝肾阴虚证。

1.3 纳入标准①符合上述T2DM诊断标准；②中医证型为肝肾阴虚证；③年龄30～75 岁，性别不限；④使用胰岛素（＞0.6 U/kg）并以二甲双胍为基础，联合其他一到两种降糖药物治疗，且剂量稳定，连续用药不少于2 周，但血糖控制欠佳[7.5 mmol/L ≤ 空腹血糖（FPG）≤ 10.0 mmol/L，7% ≤糖化血红蛋白（HbA1c）≤100%]；⑤自愿参加本研究并签署知情同意书的患者。

1.4 排除标准①不符合纳入标准的患者；②患有精神性疾病，不能配合研究的患者；③妊娠期或哺乳期妇女；④伴有心、肺、肝、肾等重要器官严重疾病的患者；⑤依从性差，未按规定方案进行治疗，或自行加用其他治疗措施，从而影响疗效判定的患者。

1.5 治疗方法

1. 5. 1 基础与常规治疗 2组患者均给予基础与常规治疗。（1）基础治疗：包括给予医学营养质量控制和生活指导，进行糖尿病饮食（膳食中热量来源：脂肪低于30%，碳水化合物50%～60%，蛋白质15%～20%，食盐摄入量限制在每天6 g 以内），降低糖分、脂肪的摄入量，同时进行适当的运动和保持良好的作息规律。（2）常规治疗：所有患者入组前的常规治疗（包括降压、降糖、调脂等）用药保持不变。

1.5.2 观察组在常规治疗的基础上给予灵芝降糖方颗粒剂治疗。灵芝降糖方的药物成分：灵芝18 g，黄芪15 g，女贞子15 g，肉苁蓉15 g，太子参15 g，山药15 g，茯苓15 g，乌梅9 g，玄参9 g，桑叶9 g，玉竹9 g，天冬9 g，麦冬9 g。上述中药采用江阴天江药业有限公司生产的颗粒剂（每剂中药制成2袋颗粒剂）。每次1袋，每天2次，用温开水冲服。30 d为1个疗程。

1.5.3 对照组在常规治疗的基础上给予灵芝降糖方安慰剂颗粒治疗。用法：灵芝降糖方安慰剂颗粒（外观与灵芝降糖方颗粒一致，但只相当于1/10灵芝降糖方的剂量），每次1袋，每天2次，用温开水冲服。30 d为1个疗程。

1.6 观察指标

1.6.1 中医证候评分根据《中药新药临床研究指导原则（试行）》[9]制定中医证候分级评分量表，将主症为五心烦热、口干夜甚、胁痛、腰膝酸软和次症为低热颧红、眩晕耳鸣、手足抽搐、皮肤干燥等按严重程度分为6 级评分，分别赋值0～5 分，其中，无症状计为0 分，轻度计为1 分，轻中度计为2 分，中度计为3 分，中重度计为4 分，重度计为5分；分值越高，表明该症状越严重。观察2 组患者治疗前后各项中医证候积分的变化情况。

1.6.2 腰围身高比值、腰臀比值测量患者的身高、腰围、臀围，计算患者的腰围身高比值、腰臀比值。观察2组患者治疗前后腰围身高比值、腰臀比值的变化情况。

1.6.3 收缩压、舒张压测量于每天早上7∶00采用水银血压计（上海寰熙医疗器械有限公司生产，型号：LXJ-21 型）测量患者的收缩压、舒张压水平，连续测量2 次后取平均值；若2 次测量的数值差异较大，则再测1 次，取3 次的平均值。观察2 组患者治疗前后收缩压、舒张压的变化情况。

1. 6. 4 炎性因子及糖尿病相关影响因子水平检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测患者血清白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、同型半胱氨酸（Hcy）、褪黑素（MT）、脂联素（APN）、抵抗素（RET）、瘦素（LEP）的表达水平。检测方法：将100 μL 样品倒入后，轻摇，加入100 μL酶标试剂，封板，将其放于37 ℃中孵育1 h，弃孔中液体；使用清洗液清洗3 次，排干；加入50 μL 显色剂摇晃，在37 ℃下处理20 min；倒入50 μL 终止液。在450 nm 波长下检测OD 值，检测出IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 的表达水平。IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 试剂盒分别由迪信泰检测科技（北京）有限公司、武汉华美生物工程有限公司CUSABIO®、博辉生物科技（广州）有限公司、北京博沃尔斯生物科技有限公司、北京伊塔生物科技有限公司、上海晅科生物科技有限公司、上海高创化学科技有限公司生产，货号分别为EKHU2020、CSB-E06897Rb、EKH12446、EK- H11683、YK- 04240、XK- E10872、CSB-E04649h。观察2 组患者治疗前后血清IL-4、IL-10、Hcy、MT、APN、RET、LEP 水平的变化情况。

1.6.5 T 淋巴细胞亚群水平检测采用流式细胞仪（美国贝克曼公司生产，型号：FC500）测定血清T 淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。观察2 组患者治疗前后各项血清T 淋巴细胞亚群指标的变化情况。

1.7 统计方法应用SPSS 19.0统计软件进行数据的统计分析。计量资料用均数± 标准差（x±s）描述，组内治疗前后比较采用配对，t检验，组间比较采用两独立样本，t检验；计数资料用率或构成比描述，组间比较采用，χ2检验。均采用双侧检验，以，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者基线资料比较对照组40例患者中，男19 例，女21 例；年龄35～72 岁，平均（53.21 ±8.23）岁；病程1.5～12 年，平均（7.79 ± 2.49）年。观察组40例患者中，男18例，女22例；年龄36～73 岁，平均（53.62±8.25）岁；病程1.5～12 年，平均（7.80 ± 2.50）年。2 组患者的性别、年龄、病程等基线资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），表明2 组患者的基线特征基本一致，具有可比性。

2.2 2组患者治疗前后中医证候积分比较表1结果显示：治疗前，2 组患者的五心烦热、口干夜甚、胁痛、腰膝酸软、低热颧红、眩晕耳鸣、手足抽搐、皮肤干燥等中医证候积分比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。治疗后，2 组患者的各项中医证候积分均较治疗前降低（P＜0.05），且观察组的降低作用均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。

表1 2组2型糖尿病（T2DM）患者治疗前后中医证候积分比较Table 1 Comparison of TCM syndrome scores between the two groups of patients with type 2 diabetes mellitus（T2DM）before and after treatment （±s，分）