奇楠沉香超临界提取物的化学成分研究△

陈德力，马国需，2，刘会梅，王灿红，刘洋洋，杨云*，魏建和，2*

1.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所 海南分所/海南省南药资源保护与开发重点实验室，海南 海口 570311；

2.中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所，北京 100193

沉香为 瑞香科（Thymelaeaceae）沉 香属（Aquilariaspp.）和拟沉香属（Gyrinopsspp.）植物含树脂的木材，作为名贵中药材和传统天然香料，在医药、日化、工艺品、宗教文化等领域广泛应用[1-3]。沉香作为药材，始载于汉魏时期陶弘景的《名医别录》，列为上品[4]。《中华人民共和国药典》2020 年版中规定的沉香基原植物为白木香Aquilaria sinensis（Lour.）Gilg，主产于海南、广东、广西、云南和台湾等地，其味辛、苦，性微温，具有行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效，用于治疗胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急等病证[5]。近年来，广东和海南等地大量种植的奇楠种质是采用嫁接普通白木香的方式繁育、通过钻孔法生产的沉香，因其独特的气味和性状可与普通沉香相区分，且与记载的奇楠沉香相似，现已开始批量上市销售，其物种仍为白木香，是一种新的化学型[6-7]。

对普通沉香化学成分和药理作用已有大量研究，其主要化学成分为倍半萜和色酮类化合物，具有抗菌、抗炎、抗肿瘤和抗焦虑等药理活性[8-12]。奇楠沉香化学成分的研究报道较少，仅见从其乙醚提取物中分离鉴定出少量的2-(2-苯乙基)色酮类和倍半萜类化合物[13-19]。超临界CO2提取工艺环保高效，已被广泛应用于奇楠沉香挥发性成分的提取，但其提取物的化学成分研究尚未见报道。为了解奇楠沉香超临界提取物的化学成分，本研究利用硅胶柱色谱、薄层色谱及半制备高效液相色谱对其超临界提取物的化学成分进行了分离纯化，采用谱学技术手段鉴定17 了个化合物（图1），包括倍半萜12 个、色酮类4个及其他类化合物1 个，分别为12,15-二酮基-α-芹子烯（12,15-dioxo-α-selinen，1）、15-酮基-桉叶烷-4,11(13)-二烯-12-甲酯[methyl-15-oxo-eudesmane-4,11(13)-dien-12-oate，2]、petafolia A（3）、12-羟基-4(5),11(13)-桉叶二烯-15-醛[12-hydroxy-4(5),11(13)-eudesmadien-15-al，4]、12,15-二酮基-芹子-4,11-二烯（12,15-dioxo-selina-4,11-dine，5）、(7S,8R,10S)-(+)-8,12-二羟基-芹子-4,11-二烯-14-醛[(7S,8R,10S)-(+)-8,12-dihydroxy-selina-4,11-dien-14-al，6]、白 木香酸（7）、1α-羟基-7βH-荒漠木-9,11-二烯-8-酮（1αhydroxy-7βH-eremophil-9,11-dien-8-one，8）、7α-H-9(10)-烯-11,12-环氧-8-氧代荒漠木烷 [7α-H-9(10)-ene-11,12-epoxy-8-oxoeremophilane，9]、petafolia B（10）、11-羟基-瓦伦-1(10)-烯-2-酮[11-hydroxy-valenc-1(10)-en-2-one，11]、白木香醇（baimuxinol，12）、2-(2-苯乙基)色酮（13）、奇楠沉香酮A（qinanone A，14）、4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮（15）、6-甲氧基-2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮（16）和丁香醛（17），其中化合物1～7 为桉烷型倍半萜、化合物8～11 为艾里莫芬烷型倍半萜、化合物12 为沉香螺烷型倍半萜、化合物13～16 为色酮类化合物。同时，体外评价化合物对皮质酮（CORT）诱导的PC12 细胞损伤的保护作用，发现化合物2、4 和5 具有显著保护皮质酮诱导的PC12细胞损伤的活性。

图1 奇楠沉香超临界提取物中分离鉴定的化合物1～17的化学结构

1 材料

1.1 试药

奇楠沉香CO2超临界提取物（100.0 g）由瑜丰沉香汇（广东）科技有限公司提供（批号：QN2021042205）；水（杭州娃哈哈集团有限公司）；常规分析纯（AR）试剂石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇等均购于广州化学试剂厂。

1.2 仪器与耗材

Avance Ⅲ 600 型核磁共振波谱仪（德国布鲁克公司）；Xevo G2-XS Qtof 型高分辨质谱仪（美国沃特世公司）；Nicolet iS5 FT-IR 型傅里叶红外光谱仪（美国赛默飞公司）；Photophysics Chirascan 型圆二色谱仪（英国应用光物理公司）；MCP200 型自动旋光仪（德国安东帕公司）；BS110S 型分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；P230 型高效液相色谱仪、DAD230+二极管阵列检测器（大连依利特分析仪器有限公司）；SB-Phenyl 色谱柱（250 mm×9.4 mm，5 μm，安捷伦公司）；柱色谱用硅胶（100～200 目），薄层色谱用硅胶G、H、GF254均购于青岛海洋化工有限公司。

2 提取与分离

奇楠沉香CO2超临界提取物100.0 g 经硅胶柱色谱分离，使用石油醚-乙酸乙酯溶剂系统进行梯度系统洗脱（40∶1、30∶1、20∶1、15∶1、10∶1、8∶1、6∶1、3∶1、1∶1、0∶1），得Fr.A～Fr.J。Fr.A 经硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯（100∶1、80∶1、60∶1、40∶1、20∶1、1∶1）梯度洗脱得Fr.A1～Fr.A6，其中Fr.A5 经半制备液相色谱分离，以65%甲醇等度洗脱得化合物7（1.5 mg，tR=21.3 min）。Fr.B经半制备液相色谱分离纯化，乙腈-水（55∶45）等度洗脱，得到化合物1（20.3 mg，tR=25.3 min）和混合物Fr.B2；Fr.B2以乙腈-水（60∶40）等度洗脱，得到化合物2（2.6 mg，tR=38.5 min）。Fr.C 经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱得到混合物Fr.C-1，进一步使用45%甲醇等度洗脱得到化合物9（1.6 mg，tR=45.0 min）。

Fr.D 部位经硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯（100∶1、50∶1、10∶1、8∶1、4∶1、2∶1、1∶1、0∶1）梯度洗脱，得Fr.D1～Fr.D8。Fr.D1经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱得到化合物13（5.8 mg，tR=55.9 min）。Fr.D2 经半制备液相色谱，以60%甲醇等度洗脱得到化合物5（22.9 mg，tR=45.3 min）和13（449.0 mg，tR=55.0 min）。Fr.D4经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱得到化合物15（95.7 mg，tR=57.3 min）。Fr.D5 经半制备液相色谱分离，以70%甲醇等度洗脱得到混合物Fr.D5-1、化合物15（930.6 mg，tR=27.3 min）和化合物16（6.9 mg，tR=34.8 min）。Fr.D5-1 经55%甲醇等度洗脱得到化合物3（17.8 mg，tR=48.4 min）和8（3.3 mg，tR=32.1 min）。Fr.D7 经半制备液相色谱分离，以55%甲醇等度洗脱得到化合物12（13.3 mg，tR=38.5 min）。Fr.E经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱得到化合物4（1.9 mg，tR=11.5 min）。Fr.F经重结晶，得到Fr.FA 和Fr.FB。Fr.FA 经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱，得化合物17（1.5 mg，tR=9.0 min）和混合物Fr.F-1。混合物Fr.F-1 经45%甲醇等度洗脱，得到化合物11（6.4 mg，tR=38.6 min）。Fr.FB 经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱得到化合物10（2.9 mg，tR=30.0 min）和11（3.9 mg，tR=33.2 min）。Fr.G 经半制备液相色谱分离，以70%甲醇等度洗脱，得化合物14（8.06 mg，tR=17.3 min）。Fr.I 经半制备液相色谱分离，以60%甲醇等度洗脱，得到混合物Fr.I-1，进一步使用50%甲醇等度洗脱，得到化合物6（8.1 mg，tR=28.4 min）。

3 结构鉴定

化合物1：无色油状物，分子式为C15H20O2，电喷雾离子源-质谱法（ESI-MS）m/z: 233.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.51 (1H,s,12-CHO),6.27 (1H,s,H-13),5.97 (1H,s,H-13),0.84 (3H,s,H-14),9.40 (1H,s,15-CHO)；13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.7 (C-1),16.0 (C-2),142.2 (C-3),153.8(C-4),32.3 (C-5),27.2 (C-6),37.1 (C-7),27.2 (C-8),43.6 (C-9),36.6 (C-10),154.9 (C-11),133.8 (C-12),195.3 (C-13),26.6 (C-14),195.0 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物1 为12,15-二酮基-α-芹子烯。

化合物2：淡黄色油状物，分子式为C16H22O3，ESI-MSm/z: 263.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.25 (1H,s,H-13α),5.63 (1H,s,H-13β),1.21 (3H,s,H-14),10.17 (1H,s,15-CHO),3.77 (3H,s,12-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.5 (C-1),18.0 (C-2),24.0 (C-3),133.2 (C-4),163.5 (C-5),30.0 (C-6),41.6 (C-7),27.4 (C-8),41.5 (C-9),36.8(C-10),144.4 (C-11),167.5 (C-12),123.8 (C-13),25.4 (C-14),191.1 (C-15),52.1 (12-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[21-22]，故鉴定化合物2 为15-酮基-桉叶烷-4,11(13)-二烯-12-甲酯。

化合物3：无色油状物，分子式为C15H24O2，ESI-MSm/z: 237.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.31 (1H,t,J=1.8 Hz,H-3),2.00 (1H,m,H-5),2.05 (1H,m,H-7),3.90 (1H,m,H-8),4.10 (2H,m,H-12),5.22 (1H,s,H-13),5.08 (1H,s,H-13),1.59(3H,s,CH3-14),0.85 (3H,s,CH3-15);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 37.8 (C-1),22.9 (C-2),121.5(C-3),134.1 (C-4),46.6 (C-5),30.1 (C-6),51.6 (C-7),70.7 (C-8),48.5 (C-9),34.1 (C-10),151.1 (C-11),112.9 (C-12),66.1 (C-13),21.5 (C-14),16.9 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[23-24]，故鉴定化合物3为petafolia A。

化合物4：无色油状物，分子式为C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.39 (1H,m,H-1α),1.60 (1H,m,H-1β),1.65 (2H,m,H-2),2.35 (1H,m,H-3α),2.15 (1H,m,H-3β),1.50 (1H,m,H-6α),3.43 (1H,dd,J=10.8,1.8 Hz,H-6β),2.18 (1H,m,H-7),1.70 (1H,m,H-8α),1.15 (1H,m,H-8β),2.08 (2H,m,H-9),5.12 (1H,s,H-12α),5.00 (1H,s,H-12β),4.17 (2H,br s,H-13),1.21 (3H,s,CH3-14),10.17 (1H,s,H-15);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 41.7 (C-1),17.9 (C-2),24.0 (C-3),133.0 (C-4),164.1 (C-5),29.8 (C-6),43.3 (C-7),27.8 (C-8),39.5 (C-9),36.9 (C-10),152.6 (C-11),65.4 (C-12),109.2 (C-13),25.3 (C-14),191.0 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[20,25]，故鉴定化合物4为12-羟基-4(5),11(13)-桉叶二烯-15-醛。

化合物5：无色油状物，分子式为C15H20O2，ESI-MSm/z: 233.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.54 (1H,s,12-CHO),6.33 (1H,s,H-13),6.06 (1H,s,H-13),1.21 (3H,s,H-14),10.14 (1H,s,15-CHO);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.5 (C-1),17.9 (C-2),23.9 (C-3),133.3 (C-4),163.1 (C-5),29.1 (C-6),38.5 (C-7),26.9 (C-8),41.4 (C-9),36.6(C-10),153.6 (C-11),194.5 (C-12),133.8 (C-13),25.3 (C-14),191.1 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物5 为12,15-二酮基-芹子-4,11-二烯。

化合物6：无色油状物，分子式为C15H22O3，ESI-MSm/z: 251.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.42 (1H,m,H-1α),1.60 (1H,m,H-1β),1.65 (2H,m,H-2),2.34 (1H,m,H-3α),2.05 (1H,m,H-3β),1.49 (1H,m,H-6α),3.37 (1H,dd,J=14.4,3.6 Hz,H-6β),2.15 (1H,t,J=3.0 Hz,H-7),4.02 (1H,td,J=10.8,3.0 Hz,H-8),2.02 (1H,dd,J=10.2,4.2 Hz,H-9α),1.42 (1H,d,J=10.2 Hz,H-9β),5.29 (1H,s,H-12α),5.15(1H,s,H-12β),4.15 (1H,br s,H-13α),4.20 (1H,br s,H-13β),1.25 (3H,s,CH3-14),10.14(1H,s,H-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 39.2 (C-1),17.6 (C-2),23.8 (C-3),133.5 (C-4),161.3 (C-5),29.1 (C-6),51.6 (C-7),69.5 (C-8),49.1 (C-9),38.1(C-10),149.3 (C-11),65.9 (C-12),114.5 (C-13),26.2(C-14),191.3 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[26]，故鉴定化合物6 为 (7S,8R,10S)-(+)-8,12-二羟基-芹子-4,11-二烯-14-醛。

化合物7：无色油状物，分子式为C15H24O3，ESI-MSm/z: 275.2 [M+Na]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 2.81 (1H,dd,J=13.2,4.2 Hz,H-4),1.25(3H,s,H-12),1.48 (3H,s,H-13),1.02 (3H,s,H-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 37.0 (C-l),20.4 (C-2),28.3 (C-3),47.8 (C-4),86.5 (C-5),36.5 (C-6),43.8(C-7),24.4 (C-8),35.6 (C-9),38.2 (C-10),84.8 (C-11),23.4 (C-12),30.8 (C-13),175.3 (C-14),23.5 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[27]，故鉴定化合物7为白木香酸。

化合物8：无色油状物，分子式为C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 4.44 (1H,t,J=3.0 Hz,H-1),1.60 (1H,m,H-4),3.02 (1H,dd,J=5.4,10.2 Hz,H-7),5.88 (1H,s,H-9),1.79 (3H,s,H-12),4.94 (1H,m,H-13),4.81(1H,m,H-13),1.30 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 74.8(C-1),32.5 (C-2),25.5 (C-3),40.7 (C-4),38.6 (C-5),42.6 (C-6),51.0 (C-7),200.8 (C-8),125.0 (C-9),168.1 (C-10),143.9 (C-11),21.4 (C-12),113.8 (C-13),21.3 (C-14),16.0 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[28]，故鉴定化合物8 为1α-羟基-7βH-荒漠木-9,11-二烯-8-酮。

化合物9：无色油状物，分子式为C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 1.85 (1H,m,H-4),2.00 (1H,m,H-7),5.74(1H,s,H-9),1.28 (3H,s,CH3-12),2.70 (1H,d,J=1.2 Hz,H-13),2.82 (1H,d,J=3.6 Hz,H-13),1.10(3H,s,CH3-14),0.95 (3H,d,J=4.8 Hz,CH3-15);13CNMR (150 MHz,CDCl3)δ: 33.3 (C-1),29.9 (C-2),30.4 (C-3),38.0 (C-4),40.4 (C-5),34.2 (C-6),49.7(C-7),197.0 (C-8),122.5 (C-9),173.6 (C-10),56.4(C-11),17.5 (C-12),56.2 (C-13),21.3 (C-14),16.4(C-15)。以上数据与文献报道基本一致[29]，故鉴定化合物9为7α-H-9(10)-烯-11,12-环氧-8-氧代荒漠木烷。

化合物10：无色油状物，分子式为C15H22O2，ESI-MSm/z: 235.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 3.67 (1H,m,H-2),1.85 (1H,m,H-4),3.01 (1H,m,H-7),5.83 (1H,s,H-9),1.77 (3H,s,CH3-12),4.73(1H,t,J=1.8 Hz,H-13),4.95 (1H,t,J=1.8 Hz,H-13),1.00 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=7.2 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 42.4 (C-1),71.8 (C-2),37.1 (C-3),35.9 (C-4),39.4 (C-5),39.6 (C-6),50.7(C-7),199.6 (C-8),125.1 (C-9),166.5 (C-10),143.7(C-11),20.9 (C-12),114.1 (C-13),20.1 (C-14),15.9(C-15)。以上数据与文献报道基本一致[23-24]，故鉴定化合物10为petafolia B。

化合物11：无色油状物，分子式为C15H24O2，ESI-MSm/z: 237.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.76 (1H,s,H-1),2.20～2.30 (2H,m,H-3),1.98(1H,m,H-4),2.03 (1H,m,H-6α),0.99 (1H,m,H-6β),1.72 (1H,m,H-7),1.18 (2H,m,H-8),2.47 (2H,m,H-9),1.19 (3H,s,CH3-12),1.21 (3H,s,CH3-13),1.08 (3H,s,CH3-14),0.97 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 124.7 (C-1),200.1 (C-2),42.3 (C-3),40.8 (C-4),39.4 (C-5),39.8 (C-6),44.1 (C-7),27.9 (C-8),33.2 (C-9),171.1 (C-10),72.7 (C-11),27.1 (C-12),27.6 (C-13),17.2 (C-14),15.2 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[30]，故鉴定化合物11为11-羟基-瓦伦-1(10)-烯-2-酮。

化合物12：无色油状物，分子式为C15H26O2，ESI-MSm/z: 239.2 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 5.63 (1H,t,J=3.0 Hz,H-7),4.12 (2H,s,H-14),2.08 (1H,m,H-8a),2.05 (1H,m,H-3),1.95(1H,m,H-8b),1.75 (1H,m,H-4a),1.72 (1H,m,H-1a),1.70 (1H,m,H-9a),1.68 (1H,m,H-4b),1.67(1H,m,H-2a),1.61 (1H,m,H-10),1.43 (1H,m,H-9b),1.42 (1H,m,H-1b),1.38 (1H,m,H-2b),1.20(6H,s,CH3-12/13),0.90 (3H,d,J=6.6 Hz,CH3-15);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 35.9 (C-1),27.6 (C-2),53.1 (C-3),39.6 (C-4),47.6 (C-5),144.2 (C-6),122.7 (C-7),22.4 (C-8),27.1 (C-9),39.3 (C-10),72.1 (C-11),28.4 (C-12),28.4 (C-13),64.9 (C-14),15.5 (C-15)。以上数据与文献报道基本一致[24]，故鉴定化合物12为白木香醇。

化合物13：淡黄色粉末，分子式为C17H14O2，ESI-MSm/z: 251.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 8.18 (1H,m,H-5),7.34 (8H,m,H-6～8,2'～6'),6.16 (1H,s,H-3),3.00 (4H,m,H-11/12);13CNMR (150 MHz,CDCl3)δ: 168.7 (C-2),110.5 (C-3),178.6 (C-4),125.2 (C-5),125.9 (C-6),133.8 (C-7),118.1 (C-8),123.9 (C-9),156.7 (C-10),36.4 (C-11),33.2 (C-12),139.9 (C-1'),128.9 (C-2'/6'),128.5 (C-3'/5'),126.8 (C-4')。以上数据与文献报道基本一致[31]，故鉴定化合物13为2-(2-苯乙基)色酮。

化合物14：白色粉末，分子式为C18H16O4，ESIMSm/z: 297.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.14 (1H,s,H-3),8.17 (1H,dd,J=1.8,7.8 Hz,H-5),7.38 (1H,t,J=6.6 Hz,H-6),7.65 (1H,m,H-7),7.44 (1H,d,J=8.4 Hz,H-8),2.89 (2H,m,H-11),2.95 (2H,m,H-12),6.65 (1H,dd,J=1.8,7.8 Hz,H-2'),6.75 (1H,d,J=7.8 Hz,H-3'),6.79 (1H,d,J=1.8 Hz,H-6'),3.85 (3H,s,4'-OCH3);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 168.8 (C-2),110.4 (C-3),178.6(C-4),125.8 (C-5),125.2 (C-6),133.8 (C-7),118.1(C-8),156.6 (C-9),123.8 (C-10),36.5 (C-11),32.5(C-12),133.1 (C-1'),119.8 (C-2'),110.9 (C-3'),145.5 (C-4'),145.9 (C-5'),114.7 (C-6'),56.1 (4'-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[13]，故鉴定化合物14为奇楠沉香酮A。

化合物15：淡黄色粉末，分子式为C18H16O3，ESI-MSm/z: 281.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.13 (1H,s,H-3),8.17 (1H,d,J=6.6 Hz,H-5),7.63 (1H,t,J=8.4 Hz,H-6),7.35 (1H,t,J=15.0 Hz,H-7),7.43 (1H,d,J=8.4 Hz,H-8),3.00(2H,t,J=6.0 Hz,H-11),2.91 (2H,t,J=6.0 Hz,H-12),6.82 (2H,d,J=7.8 Hz,H-2'/6'),7.11 (2H,d,J=7.8 Hz,H-3'/5'),3.80 (3H,s,4'-OCH3);13C-NMR(150 MHz,CDCl3)δ: 168.6 (C-2),110.2 (C-3),178.3(C-4),125.0 (C-5),125.6 (C-6),133.6 (C-7),117.9(C-8),123.7 (C-9),156.4 (C-10),36.4 (C-11),32.1(C-12),131.7 (C-1'),129.3 (C-2'/6'),114.0 (C-3'/5'),158.2 (C-4'),55.2 (4'-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[31]，故鉴定化合物15 为4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮。

化合物16：淡黄色粉末，分子式为C19H18O4，ESI-MSm/z: 311.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 6.13 (1H,s,H-3),7.54 (1H,s,H-5),7.25(1H,dd,J=3.6,9.0 Hz,H-7),7.37 (1H,d,J=9.0 Hz,H-8),2.89 (2H,m,H-11),3.00 (2H,m,H-12),7.11(2H,d,J=8.4 Hz,H-2'/6'),6.82 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3'/5'),3.80 (3H,s,4'-OCH3),3.89 (3H,s,6-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 168.6 (C-2),109.7 (C-3),178.5 (C-4),104.9 (C-5),151.5 (C-6),123.8 (C-7),119.5 (C-8),157.0 (C-9),124.5 (C-10),36.6 (C-11),32.4 (C-12),132.0 (C-1'),129.5 (C-2'/6'),114.2 (C-3'/5'),158.4 (C-4'),55.5 (4'-OCH3),56.2(6-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[32]，故鉴定化合物16 为6-甲氧基-2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮。

化合物17：白色粉末，分子式为C9H10O4，ESIMSm/z: 183.1 [M+H]+。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ: 9.82 (1H,s,-CHO),7.16 (2H,s,H-2/6),3.98 (6H,s,3/5-OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ: 191.1(-CHO),128.3 (C-1),106.9 (C-2/6),147.5 (C-3/5),142.3 (C-4),56.7 (3/5-OCH3)。以上数据与文献报道基本一致[33-34]，故鉴定化合物17为丁香醛。

4 神经保护活性筛选

采用体外法测定化合物对CORT 诱导的PC12 细胞损伤的保护作用[35]。PC12 细胞按常规方法培养，在96孔板中接种对数生长期细胞，使细胞浓度为5×104个/mL，每孔加入100 μL，置于37 ℃含5% CO2的培养箱中培养24 h。设置空白组、模型组、阳性对照地西泮组、实验组。空白组中加入不完全培养基200 μL，不做任何处理；模型组用CORT 200 μL（终浓度为200 μmol·L-1）处理；地西泮组加入3.125 μg·mL-1地西泮100 μL（地西泮产生毒性的血药质量浓度为30 μg·mL-1，故给药剂量设其1/10剂量）处理细胞；实验组以CORT 100 μL（终浓度为200 μmol·L-1）和相应药物（预实验检测化合物对PC12 细胞存活率影响，化合物以质量浓度50.000 0、25.000 0、12.500 0、6.250 0、3.125 0、1.562 5 μg·mL-1给药）。各组细胞置于37 ℃含5%CO2的培养箱中培养24 h，精密吸取含药培养基100 μL，加入CCK-8 10 μL，置于37 ℃含5% CO2的培养箱中孵育1～2 h 后，将96 孔板置于酶标仪450 nm 波长处测定吸光度（A），按照公式（1）计算细胞存活率。结果见表1。

表1 化合物对CORT诱导PC12细胞存活率的影响（±s,n=3）

表1 化合物对CORT诱导PC12细胞存活率的影响（±s,n=3）

注：与对照组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。

结果发现，CORT 诱导细胞损伤后的细胞存活率为48.78%，给予受试药物后不同化合物不同质量浓度下细胞存活率出现不同程度升高，存活率为50.35%～91.36%，表明化合物对CORT 诱导的PC12细胞有明显的保护作用，其中化合物2和4活性较强。

5 讨论

本研究对奇楠种质产奇楠沉香的超临界提取物化学成分进行分离与纯化研究，共得到17 个化合物，其中12个倍半萜类化合物和4个色酮类化合物。从结构类型上分析，桉烷型和艾里莫芬烷型是奇楠沉香超临界提取物中芳香倍半萜的主要成分，2-(2-苯乙基)色酮母核及其4'-甲氧基-2-(2-苯乙基)色酮是奇楠沉香中色酮类的大量成分。从结构特点上分析，桉烷型倍半萜普遍在C-12 位或C-15 位有醛基存在，艾里莫芬烷型倍半萜普遍存在α,β-不饱和酮片段。通过奇楠沉香超临界提取物与水蒸气蒸馏挥发油成分的研究比较[36-37]，发现2 种提取物均富含2-(2-苯乙基)色酮类化合物，其中2-(2-苯乙基)色酮与2-[2-(4'-甲氧基苯乙基)色酮的含量较高；但其倍半萜类成分存在差异，水蒸气蒸馏的挥发油中倍半萜类成分有莫芬烷型、愈创木烷型及桉烷型等，而奇楠沉香超临界提取物中倍半萜主要是按烷型、艾里莫芬烷型及沉香螺烷型，未见愈创木烷型倍半萜类成分。本研究丰富了奇楠沉香的化学成分数据，发现了化合物1、2、4 和5 具有较强的保护CORT 诱导的PC12细胞损伤活性，为奇楠沉香的进一步开发和利用提供了参考。