老年哮喘及CVA患者痰液中MP及eotaxin与气道高反应性的相关性

梁晔 李青 郭东方 张积友 庄洁

(青岛市第五人民医院 1呼吸与危重症二科,山东 青岛 266000;2内科;3门诊部;4呼吸与危重症科;5青岛市第三人民医院康复医学科)

咳嗽变异性哮喘(CVA)被认为是一种以咳嗽作为主要或唯一症状的特殊性哮喘形式,也是导致慢性咳嗽的最常见病因,在疾病进展以嗜酸性粒细胞浸润为主的气道慢性炎症反应,在疾病期间非常容易导致气道高反应出现,进而诱发气道结构也发生相应改变,最终诱发并加重咳嗽症状及表现〔1,2〕。目前关于哮喘及CVA的发病机制尚未明确,多认为是不同细胞因子共同作用的结果,这些因子可起到重要调控作用。因此,在临床工作中多认为二者的临床症状及气道高反应性存在一定相似之处,在疾病诊断鉴别上容易出现误诊。诱导痰细胞学测定在判断哮喘疾病及严重程度上有一定监测治疗效果,但诱导痰细胞学指标是否与支气管激发试验(BPT)相关仍缺少相关研究,且诱导痰细胞学指标在不同类型哮喘中的诊断价值仍需深入〔3〕。本研究拟分析老年哮喘及CVA患者痰液中肺炎支原体(MP)及嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)与气道高反应性的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取青岛市第五人民医院自2020年2月至2022年3月收治的老年哮喘45例为哮喘组、CVA 48例为CVA组。哮喘组男25例,女20例;年龄60～73岁,平均(66.69±2.41)岁;病程1～5个月,平均(3.78±0.28)个月。CVA组男28例,女20例;年龄61～75岁,平均(66.72±2.54)岁;病程2～7个月,平均(3.81±0.32)个月。两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。纳入标准：年龄≥60岁;性别不限;行临床体征、实验室检查评估后确诊,符合《支气管哮喘中西医结合诊疗中国专家共识》〔4〕中标准;CVA符合《咳嗽的诊断与治疗指南》〔5〕中标准;具有良好的依从性,能够主动配合进行诱导痰及肺部功能测定。排除标准：进入研究前至少8 w时间存在明显呼吸系统感染病史;进入研究前至少8 w内全身范围使用或吸入糖皮质激素;合并存在严重的心、脑、肝、肾、肺疾病;有长期吸烟史者;无法配合肺部功能测定及诱导痰检查者;因各种原因导致的临床资料缺失者。

1.2方法 全部患者采用诱导痰的定量检测,并在两组急性发病期及缓解期分别采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验对痰eotaxin含量进行测定,并采用支原体培养基对其进行痰液培养;两组均采用BPT测量,在对患者第1秒用力呼气量(FEV1)下降20%时组胺累计剂量(PD20),采用PD20评估哮喘及CVA患者的气道高反应。

1.2.1诱导痰细胞学检查 指导全部患者清洁漱口,擤鼻子后,首先为患者预防性吸入200 μg沙丁胺醇,随后为患者实施超声雾化吸入7 min 3%的高渗盐水,以此诱导痰液排出。将患者咳出的痰液放置在培养皿中,若患者无痰液或存在痰液量不足的情况,则可适当雾化时间进行调整,雾化时间通常控制在30 min以内,雾化浓度选择4%、5%。从诱导痰液中选择合格的标本后采用支原体培养基,保证标本在2 h内送去检查〔6〕。同时,保存另外一本合格标本,向其中加入3倍体积0.1%的二硫酸糖醇,进行旋涡振荡后10 min,2 000 r/min离心10 min,采用双夹心抗体酶联免疫吸附试验测量痰上层清液eotaxin水平〔7〕。具体操作方法参考放射免疫试剂盒说明书。

1.2.2BPT 采用AS-407肺功能仪对肺功能评估,采用定量雾化吸入装置为患者进行BPT,以磷酸组胺作为激发药物完成连续潮气呼吸检查〔8〕：按照顺序依次吸入生理盐水及不同浓度组胺试剂(从0.01 mg开始至1.27 mg),每吸入1次剂量2 min后对患者的FEV1测量,随后再次进入到下一剂量,直到最高吸入剂量累计达到2.4 mg或FEV1下降20%后则停止试验〔9〕。若患者吸入P20最大量时的FEV1<15%认为是激发试验为阴性〔10〕。

1.2.3AHR严重程度评价分级标准 按照BPT结果对ANR的分级标准进行评估可分为重度、中度、轻度及极轻度4个等级〔11〕。

1.3统计学处理 采用SPSS23.0统计软件进行t检验、F检验、χ2检验。

2 结 果

2.1两组痰液中MP及eotaxin水平对比 与哮喘组比较,CVA组MP检出率显著高(P<0.05);与CVA组比较,哮喘组急性期与缓解期eotaxin水平均显著低(P<0.05)。见表1。

表1 两组痰液中MP及eotaxin水平对比

2.2两组BPT结果对比 哮喘组急性期、缓解期与CVA组比较FEV1值较高、PD20较高,差异有统计学意义(P<0.05)。且两组内缓解期与急性期比较FEV1值较高、PD20较高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组支气管激发试验结果对比

2.3不同程度痰液中MP及eotaxin水平对比 哮喘组轻度及极轻度、中重度分别与CVA组中重度组相比MP检出率较低,eotaxin水平较高差异有统计学意义(P<0.05)。哮喘组及CVA组中重度分别与轻度及极轻度患者相比MP检出率和eotaxin水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 ANR不同程度痰液中MP及eotaxin水平对比

3 讨 论

哮喘作为一类较为常见的变态反应性疾病,以炎性细胞嗜酸性粒细胞及CD4+T淋巴细胞作为主要病理改变基础,对患者呼吸系统健康及生活质量均造成了较大影响。eotaxin本身作为一种在近年研究中发现的嗜酸粒细胞强力趋化因子,本身具有较高的选择性,可诱发嗜酸性粒细胞大量快速聚集在患者肺部,并黏附微血管的内皮细胞上,随后黏附在微血管内皮细胞上,由此发挥较强的嗜酸粒细胞刺激激活作用及效果〔12,13〕。本研究结果提示痰液中的eotaxin在哮喘及CVA的急性期中均会表现出较高水平,在进入缓解期后,eotaxin水平较低,在中重度患者中eotaxin水平较高,且CVA与哮喘相比无论是在急性期或缓解期eotaxin水平均较高。原因是eotaxin参与了哮喘的气道高反应性,与病情进展具有密切相关性,考虑其作用机制为eotaxin可通过可特异性的与嗜酸性细胞上的eotaxin特异性受体蛋白相互结合而对细胞外的载脂蛋白E拟肽(EPK)2-P38信号通路相互结合,从而活化并释放出大量炎性介质,进而诱发出较高的气道反应性〔14〕。

MP能够通过直接作用到气道的上皮细胞上而对其造成损伤,MP尾端杆状结构的 P-1 蛋白被认为是导致疾病所在〔15〕。一旦MP进入患者呼吸道后,P-1 蛋白与呼吸道上皮细胞表面的神经氨酸受体结合,则会导致 MP 对气道黏膜的完整性造成直接破坏,甚至导致上皮细胞坏死,此时气道壁传入神经被暴露,对外界刺激敏感性也会明显增强,最终导致气道反应性增强。本研究结果提示,MP可能被认为是诱发哮喘发生发展的重要机制,因MP所引起的气道高反应性在CVA的影响也相对较大。另外,MP在发生感染后也会诱发并形成大量具有较强特异性的IgE,在此期间,嗜酸粒细胞也会不断聚集与增多,并随着疾病的进展而沿着气道黏膜下浸润,其间释放出大量细胞毒性物质,激发细胞免疫反应产生诸多细胞,最终导致哮喘的发生及发展。

综上,痰液中MP及eotaxin可作为评估及鉴别老年哮喘及CVA患者的重要辅助手段。