老年子宫内膜癌患者血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平变化及意义

马煜磊 李诗函

(南阳医学高等专科学校第一附属医院,河南 南阳 473000)

子宫内膜癌多发于围绝经期和绝经后女性,在老年人群中发病率较高〔1〕。早期诊治是改善子宫内膜癌患者的主要途径;研究报道,国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅰ～Ⅱ期的子宫内膜癌患者5年生存率为75%～90%,Ⅲ期、Ⅳ期患者5年生存率降低至56%～68%、15%～24%〔2〕。老年子宫内膜癌患者因身体功能下降,对治疗耐受程度较差,术后复发率更高,因此早期诊治更为关键〔3〕。甲壳质酶蛋白(YKL)-40作为一种抗细胞凋亡蛋白,在卵巢癌细胞、非小细胞肺癌细胞的增殖、分化、凋亡中发挥促进作用〔4,5〕。人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)是近年来研究发现的一种抑癌基因,在直肠癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中表达缺失〔6,7〕。半乳激素(Gal)-9可通过抑制人体免疫功能来诱发肿瘤细胞的免疫逃逸〔8〕。骨桥蛋白是一种非胶原蛋白,表达于多种恶性肿瘤组织中,能够介导肿瘤细胞黏附、转移和侵袭过程〔9〕。目前关于YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白在老年子宫内膜癌患者中表达特点的研究仍十分少见。本研究旨在探讨老年子宫内膜癌患者血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平变化及意义。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取2018年2月至2019年5月南阳医学高等子科学第一附属医院收治的老年子宫内膜癌患者70例为子宫内膜癌组。入选标准：①符合2010年《临床疾病诊断与疗效判断标准》中对子宫内膜癌的诊断标准;②年龄≥60岁,符合手术指征并接受手术治疗,术后病理检查确诊为子宫内膜癌;③沟通交流能力正常,配合完成3年随访研究。排除标准：①术前接受放化疗或激素治疗者;②存在自身免疫性疾病、血液疾病、严重感染性疾病者;③已出现远处转移者。平均年龄(71.64±6.90)岁;另收集同期健康体检者40例为对照组,均为女性,无严重慢性病,平均年龄(70.28±4.21)岁。子宫内膜癌组与对照组年龄差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究符合本院伦理委员会相关要求,并通过伦理审批,患者均签署知情同意书。

1.2标本采集 老年子宫内膜癌患者分别于手术前1～2 d、手术后7 d,对照组健康体检时,采集肘静脉血5 ml,置于无抗凝剂的真空采血管中,观察并去除发生溶血的标本,4 ℃冷藏保存,24 h内2 500 r/min 4 ℃恒温离心10 min,收集上层血清,室温下分装到聚丙烯EP管中,-80 ℃保存待测。

1.3血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平检测 采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验。检测原理：捕获抗体已预包被于酶标板上,加入标本和参考品,白细胞介素与捕获抗体特异性结合后洗涤;使未结合部分去除后加入抗人白细胞介素抗体,形成免疫复合物;将未结合部分洗涤去除,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,生物素与亲和素结合形成复合物,再次洗涤;将未结合部分去除后加入显色剂,与样品中的白细胞介素形成免疫复合物,加入终止液,蓝色物质变成黄色,使用酶标仪测定450 nm处的吸光度值。

1.4随访 通过电话随访、委托代随访、门诊复诊、住院复诊等方法,术后对老年子宫内膜癌患者进行3年随访,记录生存情况,分为预后良好组(生存)、预后不良组(死亡)。

1.5统计学分析 使用SPSS23.0软件进行t检验、单因素方差分析、Cox回归分析受试者工作特征(ROC)曲线分析。

2 结 果

2.1两组血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较 子宫内膜癌组血清YKL-40、Gal-9、骨桥蛋白水平明显高于对照组,PTEN水平明显低于对照组(P<0.01);术后老年子宫内膜癌患者血清YKL-40、Gal-9、骨桥蛋白水平明显低于术前,PTEN水平明显高于术前(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较

2.2不同临床病理特征老年子宫内膜癌患者术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较 术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平在不同组织分化程度、FIGO分期、肌层浸润、病灶范围、淋巴结转移情况的老年子宫内膜癌患者之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同临床病理特征老年子宫内膜癌患者术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较

2.3不同预后老年子宫内膜癌患者术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较 预后不良组术前血清YKL-40、Gal-9、骨桥蛋白水平明显高于预后良好组,PTEN水平明显低于预后良好组(P<0.01)。见表3。

表3 不同预后老年子宫内膜癌患者术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平比较

2.4老年子宫内膜癌患者预后的影响因素 以老年子宫内膜癌患者预后为因变量,以血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白、组织分化程度、FIGO分期、肌层浸润、病灶范围、淋巴结转移情况为自变量,进行Cox比例风险回归分析,结果显示,YKL-40、PTEN、Gal-9、FIGO分期、肌层浸润、淋巴结转移情况是老年子宫内膜癌患者预后的独立影响因素(P<0.01)。见表4。

表4 老年子宫内膜癌患者预后影响因素的Cox回归分析

2.5术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白对老年子宫内膜癌患者预后的预测价值 ROC曲线分析显示,术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白对老年子宫内膜癌患者预后均具有较高的预测价值(P<0.05);其中术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白联合检测的预测价值最高,灵敏度和阳性预测值明显高于各指标单独检测。见表5,图1。

图1 术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白对老年子宫内膜癌患者预后预测价值的ROC曲线

表5 术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白对老年子宫内膜癌患者预后的预测价值

3 讨 论

子宫内膜癌发病早期症状不明显,多数患者确诊时已处于中晚期,在增加治疗难度的同时也对预后产生不良影响。手术是当前治疗子宫内膜癌最有效的手段,早期确诊后根据美国肿瘤综合协作网指南中推荐的全面分期手术,能够将患者5年生存率提升到80%以上〔10〕。超声造影、磁共振成像、宫腔镜检测、子宫内膜活检是目前主要的诊断手段,但超声造影对医生技术要求高,操作负责且时间长〔11〕;磁共振成像检查费用高;宫腔镜无法判断肿瘤浸润深度;子宫内膜活检属于有创操作;上述检查方法均存在一定局限性。血清学检查具有操作简便、费用低廉、可重复性强等优点,适用于肿瘤的早期筛查和病情评估。

YKL-40属于糖类水解酶18家族成员,参与人体细胞生长、分化、转移和凋亡过程。研究报道,YKL-40作为一种抗细胞凋亡蛋白,可激活白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、核因子-κB来促进细胞增殖,分子机制可能通过PI3Ks和PKB磷酸化来实现〔12〕。PTEN可通过调控肿瘤细胞的上皮间质转化来参与细胞增殖、迁移等过程;近年来研究者从细胞水平上证实了PTEN与肿瘤细胞凋亡的关系,与调控凋亡相关基因B淋巴细胞瘤-2、促凋亡基因Bax、半胱天冬酶-3基因表达有关,具有抑癌基因活性〔13〕。Gal-9属于半乳凝素,能够特异性识别并结合人类β-半乳糖苷,发挥调控细胞增殖、分化、黏附的作用。研究显示,Gal-9能够抑制人体的免疫反应,降低对肿瘤细胞的免疫监视水平,促进肿瘤的发生与发展〔14〕。骨桥蛋白是存在于人体组织和细胞中的分泌型磷酸化糖蛋白,参与肿瘤浸润、免疫调节等多种生理过程〔15〕。

本研究结果说明血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平变化可作为评估老年子宫内膜癌患者的临床病理特征和预后的参考指标,有助于改善临床预后。ROC曲线分析显示,术前血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白对老年子宫内膜癌患者预后均具有较高的预测价值,联合检测的预测价值最高。

综上,老年患者身体功能均存在不同程度衰退,手术创伤对术后康复和预后水平均造成不良影响,参考术前患者血清YKL-40、PTEN、Gal-9、骨桥蛋白水平来评估病情严重程度和治疗预后,对手术方案选择和术后综合治疗制定具有重要指导意义,在保证疗效的同时将治疗相关副作用降至最低,最大程度改善老年子宫内膜癌患者预后和生存质量。