感染性疾病早产儿血清25-(OH)D3、IL-12、HNL水平变化及其临床意义

程巧林，王丹虹，卢田甜，刘敏

海口市人民医院(中南大学湘雅医学院附属海口医院)儿科，海南 海口 570208

早产是新生儿感染和生长障碍的主要危险因素之一[1]。出生后感染是新生儿最常见的严重并发症，由于其组织器官发育尚不成熟，免疫功能不完善，防御功能差，极易受到病原体的侵袭，从而发生感染性疾病，具有较高的发病率和死亡率。临床上通过血液样本查找早产儿感染的原因一般需要培养24～48 h，时间较长，给临床诊断和治疗造成困难，易增加其死亡的风险[2]。因此需要寻找可以预测感染性疾病早产儿的生物标志物，以便尽早干预。25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]是维生素D 的活性成分，参与机体的免疫调节，通过分泌抗病毒肽增加先天免疫，从而改善黏膜防御。研究发现低水平血清25-(OH)D3与急性呼吸道感染等疾病有关[3]。白介素(IL)-12 是一种固有的免疫炎症细胞因子，在控制细胞内细菌感染中起着重要作用[4]；中性粒细胞载脂蛋白(HNL)是一种储存在中性粒细胞次级颗粒中并由其释放的蛋白质，当机体受到细菌感染时，水平明显上升[5]。目前关于三者与感染性疾病早产儿的研究尚少。本研究通过探讨血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平对感染性疾病早产儿的预测价值，以期为临床诊治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015 年1 月至2020 年12月海口市人民医院诊治的226例感染性疾病早产儿作为感染组。纳入标准：患儿出生胎龄＜37周，且符合中华医学会妇产科学分会产科学组制定的《早产临床诊断与治疗指南(2014)》[6]中的诊断标准；出生3 d 内发生感染性疾病，且符合《实用新生儿学》[7]中诊断标准；单胎妊娠；CRP＞8 mg/L；白细胞异常升高；血培养阳性；患儿和产妇的临床资料均完整无误。排除标准：伴有严重先天性畸形的患儿；伴有先天性或代谢性疾病的患儿；伴有严重疾病，出生72 h内死亡者；产妇所患疾病或孕期服用药物影响早产儿维生素D 水平者；产妇服用药物影响炎性因子水平者。根据新生儿感染情况将早产儿分为重度感染组(败血症、感染性休克)117例和轻度感染组(其他感染)109例。选取同期80 例未发生感染的早产儿作为对照组。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 资料收集 收集所有早产儿和产妇的基本资料，包括性别、胎龄、出生体质量、身长、产妇年龄、分娩方式、妊娠次数、妊娠期糖尿病、妊娠期高血压等情况。

1.2.2 实验室检测 采集早产儿出生24 h内空腹静脉血2 mL，以3 500 r/min 速度离心10 min，吸取血清，应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清25-(OH)D3、IL-12和HNL水平。

1.3 统计学方法 应用SPSS23.0 统计学软件分析数据。正态分布计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用独立样本t检验；非正态分布计量资料采用四分位间距[M(P25，P75)]表示，组间比较采用Mann-WhitneyU检验；计数资料组间比较采用χ2表示；应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平对感染性疾病早产儿的预测价值。检验水准a=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组早产儿和产妇的基本资料比较 两组早产儿的性别、胎龄、出生体质量、出生体长和产妇年龄、妊娠糖尿病、妊娠高血压、妊娠次数、分娩方式等资料比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

表1 两组早产儿和产妇的基本资料比较(±s，例)Table 1 Comparison of basic data of preterm infants and delivery woman(±s,n)

表1 两组早产儿和产妇的基本资料比较(±s，例)Table 1 Comparison of basic data of preterm infants and delivery woman(±s,n)

指标感染组(n=226)对照组(n=80)t/χ2值P值男/女(例)胎龄(周)出生体质量(g)出生体长(cm)产妇年龄(岁)妊娠糖尿病妊娠高血压妊娠次数分娩方式自然分娩剖宫产107/119 33.58±2.08 1 730.51±333.97 41.84±4.18 30.39±6.01 13(5.75)10(4.42)2.00±0.84 35/45 33.49±2.13 1 743.34±340.75 42.39±4.34 30.60±6.28 5(6.25)3(3.75)1.98±0.81 0.307 0.322 0.294 1.015 0.266 0.026 0.066 0.272 0.084 0.579 0.748 0.769 0.311 0.790 0.871 0.797 0.786 0.772 160(70.80)66(29.20)58(72.50)22(27.50)

2.2 感染组和对照组早产儿的血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平比较 感染组早产儿的血清25-(OH)D3水平明显低于对照组，而血清IL-12 和HNL 水平明显高于对照组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

表2 感染组和对照组早产儿的血清25-(OH)-D3、IL-12和HNL水平比较[±s，M(P25，P75)]Table 2 Comparison on serum 25-(OH)-D3，IL-12,and HNLlevels between infection group and control group[±s,M(P25，P75)]

表2 感染组和对照组早产儿的血清25-(OH)-D3、IL-12和HNL水平比较[±s，M(P25，P75)]Table 2 Comparison on serum 25-(OH)-D3，IL-12,and HNLlevels between infection group and control group[±s,M(P25，P75)]

组别感染组对照组t/Z值P值例数226 80 25-(OH)D3(nmol/L)11.74±2.56 17.78±5.65 9.240 0.001 IL-12(ng/L)197.95(123.18，254.83)66.18(40.76，93.34)10.029 0.001 HNL(ng/mL)160.17(111.06，194.35)54.75(38.39，72.17)9.666 0.001

2.3 不同病情程度患者的血清25-(OH)D3、IL-12和HNL 水平比较 轻度感染组血清25-(OH)D3水平明显高于重度感染组，而血清IL-12 和HNL水平明显低于重度感染组，差异均有统计学意义(P＜0.01)，见表3。

表3 不同病情程度患者的血清25-(OH)D3、IL-12和HNL水平比较[±s，M(P25，P75)]Table 3 Comparison of serum 25-(OH)D3,IL-12,and HNL levels among patients with different disease degrees[±s,M(P25，P75)]

组别轻度感染组重度感染组t/Z值P值例数109 117 25-(OH)D3(nmol/L)10.53±2.38 13.04±2.08 8.387 0.001 IL-12(ng/L)230.15(167.45，283.29)172.83(104.59，230.17)5.156 0.001 HNL(ng/mL)175.85(135.83，225.73)130.43(84.37，174.66)5.969 0.001

2.4 血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 对感染性疾病早产儿的预测价值 经ROC 分析结果显示，血清25-(OH)-D3、IL-12 和HNL 水平预测感染性疾病早产儿曲线下面积分别为0.839、0.877、0.864，当截断值为14.76 nmol/L、112.81 ng/L、89.56 ng/mL 时，具有较高的灵敏度和特异度；三者联合应用价值优于单独应用(P＜0.01)，见表4和图1。

图1 血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 对感染性疾病早产儿的预测价值ROC曲线Figure 1 Predictive value of serum 25-(OH)D3, IL-12, and HNL for premature infants with infections diseases

表4 血清25-(OH)D3、IL-12和HNL对感染性疾病早产儿的预测价值Table 4 Predictive value of serum 25-(OH)D3,IL-12,HNL in premature infants with infectious diseases

3 讨论

早产儿由于其独特的免疫功能，易发生感染风险，是死亡的重要原因。早产儿发生感染性疾病后，通常会伴有终身神经发育功能障碍，易给患儿造成严重的身体伤害，同时增加医疗经济负担[8]。虽然医疗技术不断发展，但感染性疾病早产儿的发病率仍呈逐年上升的趋势，而且目前尚无有效的手段降低感染性疾病早产儿的发生率。因此需尽早发现感染性疾病早产儿，以便及时干预，改善不良后果。

25-(OH)D3是人体必须的维生素，参与机体免疫应答和炎症反应，能够与单核-巨噬细胞中的维生素D受体结合，具有破坏病原体、预防感染的作用；另外25-(OH)D3还能通过下调单核细胞表面TOLL 样受体(TLR)的表达，抑制细胞因子的产生，减缓感染后的炎症反应[9-10]。研究表明，血清25-(OHD3水平与感染性疾病发生风险密切相关，25-(OH)D3水平越低，感染的风险越高[11]。Hong 等[12]研究发现，新生儿通过补充维生素D，呼吸道感染的发生率呈下降趋势，提示25-(OH)D3具有预防呼吸道感染的作用。李淑妮等[13]选取120例新生儿医院感染研究，结果发现新生儿医院感染血清25-(OH)D3水平低于健康新生儿，而且其水平与病情严重程度呈负相关，表明25-(OH)D3水平越低，病情越严重。本研究发现感染组早产儿的血清25-(OH)D3水平较对照组明显降低，轻度感染早产儿的血清25-(OH)D3水平明显高于重度感染者，差异均有统计学意义(P＜0.05)，表明早产儿维生素D 水平与感染性疾病发生和病情密切相关。究其原因，可能是由于机体25-(OH)D3水平降低，T 淋巴细胞水平和巨噬细胞吞噬能力降低，致使机体防御病原体感染的能力减弱，增加感染风险，而且随着水平降低炎性因子合成释放增加，从而加重病情[14]。

IL-12 作为促炎细胞因子，可促进T 辅助细胞1(Th1)和T滤泡辅助细胞分化，在机体抗感染和免疫细胞增殖分化中发挥重要作用[15]。IL-12 能够产生干扰素γ，刺激Th1 反应并激活巨噬细胞，活化的巨噬细胞能够杀死细胞内的细菌从而消除感染[16]。徐露璐[17]等回顾性分析82 例新生儿感染性疾病，发现患儿血清IL-12 水平较健康新生儿明显上升，提示机体感染后IL-12 水平可能升高。本研究发现，感染组早产儿的血清IL-12 水平较对照组明显上升，轻度感染早产儿血清IL-12 水平明显低于重度感染者，差异均有统计学意义(P＜0.05)，提示血清IL-12 水平与早产儿感染性疾病发生及病情密切相关。究其原因，可能是由于机体受到感染后，通过激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子(NF)-κB 信号通路刺激树突状细胞发挥免疫反应，促使IL-12 水平高表达；同时IL-12 诱导巨噬细胞，激活氧化应激反应，加重炎症反应，加重病情进展[18]。

HNL属于载脂蛋白超家族成员，主要由上皮细胞和中性粒细胞分泌[19]。研究发现，健康新生儿出生时HNL水平与其出生后3～5 d和健康成年人水平基本一致，且不易受其他因素影响波动，可作为新生儿细菌感染的标志物[20]。本研究发现，感染组早产儿血清HNL水平较对照组明显上升，轻度感染早产儿的血清HNL水平明显低于重度感染者，差异均具有统计学意义(P＜0.05)，提示血清HNL 水平与早产儿感染性疾病发生和病情密切相关。究其原因，可能是由于当机体受到感染后，机体免疫反应被激活，释放大量中性粒细胞包裹、吞噬病原体，进而释放HNL，使其水平显著升高，增加病情[21]。经ROC 曲线分析结果显示，血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL 水平分别为14.76 nmol/L、112.81 ng/L、89.56 ng/mL 时，其预测感染性疾病早产儿具有较高的灵敏度和特异度，但三者联合应用的价值高于单独应用。

综上所述，感染性疾病早产儿血清25-(OH)D3水平下降、IL-12 和HNL水平升高，与病情密切相关，可作为预测感染性疾病早产儿的生物标志物。但是本研究由于样本量小，尚未对感染性疾病早产儿感染类型进一步分析，存在一定的不足，需要日后加大样本量，深入分析血清25-(OH)D3、IL-12 和HNL水平对感染性疾病早产儿的应用价值。