CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及临床病理特征的相关性

张柯媛 陈基强 黄艳 卢庭婷

(广西卫生职业技术学院,广西 南宁 530021)

乳腺癌是常见的女性恶性肿瘤,一项流行病学调查发现,2009～2018年女性乳腺癌患病率逐年升高,患病年龄以45～49岁为高发〔1〕。目前乳腺癌常见治疗方法包括手术治疗、内分泌治疗及化疗等,虽然具有一定疗效,但仍有部分患者治疗后发生肿瘤进展,预后不佳。研究证实,乳腺癌的发病与遗传因素密切相关〔2〕。细胞色素氧化代谢酶系19A1亚族(CYP19A1)蛋白质可催化雌激素生物合成,且有研究表明,女性乳腺癌患者外周血CYP19A1基因表达在疾病复发中起到重要作用〔3〕。初步推测CYP19A1基因多态性与乳腺癌发生、进展有关。本研究就CYP19A1基因上rs4646基因多态性与乳腺癌患者遗传易感性、临床病理特征的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年3月至2022年3月广西医科大学附属肿瘤医院收治的112例老年乳腺癌患者作为观察组。纳入标准:①乳腺癌符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015版)》〔4〕内相关诊断标准;②接受手术治疗,并经病理性检查明确诊断;③乳腺癌肿瘤淋巴结转移(TNM)分期〔5〕Ⅰ～Ⅲ期。排除标准:①合并其他乳腺疾病;②合并其他恶性肿瘤;③接受过乳腺癌相关放化疗治疗;④合并内分泌系统疾病或代谢性疾病;⑤合并高血压、糖尿病等慢性疾病;⑥合并严重心脑、肝肾功能异常;⑦近期内接受过激素类药物治疗。另选取112例老年乳腺良性病变患者作为对照组,其中包括乳房纤维腺瘤57例,乳腺内乳头状瘤21例,乳腺脂肪瘤34例,均符合相关诊断〔6〕。全部患者签署知情同意书。

1.2基线资料、临床病理特征收集 于两组入院当日收集其年龄、体质量指数(BMI)、绝经情况、大量饮酒(每日饮酒量超过20 g或2 w内每日饮酒超过80 g)。经手术及术后病理检查评估乳腺癌患者临床病理特征,包括病理类型(浸润性导管癌、非浸润性导管癌)、TNM分期(Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期)、淋巴结转移(阳性、阴性);行免疫组化检验,包括雌激素受体(ER)、孕激素(PR)、人表皮生长因子受体(HER)-2、增殖细胞相关抗原(Ki67),各项指标阳性判定依据参照2013年St Galllen共识〔7〕。

1.3CYP19A1基因多态性检测 于患者入院当日或次日清晨,使用乙二胺四乙酸二钾抗凝管采集空腹静脉血5 ml,使用自动化核酸提取剂与仪器配套提取基因组DNA,采用Taqman探针实时荧光聚合酶链式反应等位基因技术测定rs4646位点基因型,并用聚合酶链式反应直接测序法测定CYP19A1 rs4646多态性,引物序列:正向:5′-CATGAAGTGTAGGGTCTATGTAAT-3′,反向:5′-GATCTTTACACACCTCTACACAGT-3′,扩增条件:94 ℃ 10 min初变性,95 ℃ 30 s、54.5 ℃ 30 s、72 ℃30 s、72 ℃延伸1 min,共36个循环,随后进行琼脂糖凝胶电泳,并进行基因测序。

1.4统计学方法 采用SPSS25.0软件进行t、χ2、秩和检验,Logistic回归分析、χ2Phi系数检验。

2 结 果

2.1两组一般资料、CYP19A1基因多态性比较 观察组BMI、大量饮酒占比、CYP19A1 r4646位点基因C/C突变占比明显高于对照组(P<0.01,P<0.001);组间年龄、绝经情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组一般资料、CYP19A1基因多态性比较

2.2CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性的关系分析 将疾病类型作为因变量(1=乳腺癌,0=乳腺良性病变),将BMI、大量饮酒(有=1,无=0)、CYP19A1基因多态性(A/A=1,A/C=2,C/C=3)作为自变量,经Logistic回归分析结果显示,BMI偏高、大量饮酒、CYP19A1 r4646位点基因多态性与老年乳腺癌患者的遗传易感性有关(OR>1,P<0.05)。见表2。

表2 CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性的关系

2.3不同病理特征乳腺癌患者CYP19A1基因多态性比较 不同TNM分期、ER、PR、HER-2、Ki67表达的乳腺癌患者CYP19A1基因多态性比较,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同病理特征患者CYP19A1基因多态性比较〔n(%)〕

2.4乳腺癌患者CYP19A1基因多态性与病理特征的相关性 CYP19A1基因多态性与乳腺癌患者TNM分期、ER阳性、PR阳性、HER-2阳性、Ki67阳性具有相关性(Phi=0.293、0.295、0.423、0.294、0.381,均P<0.05)。

3 讨 论

乳腺癌发生于乳腺上皮细胞,发病与环境、生理、心理及基因等因素有关,早期乳腺癌的临床症状并不明显,大部分患者确诊时已进展至中晚期,治疗效果及预后并不理想。弋振营等〔8〕研究中,200例乳腺癌患者随访3年,总生存率为90.50%,无病生存率为71.00%,乳腺癌患者的预后与不同临床分期、浸润性导管癌、绝经情况及术后放化疗等密切相关。

大量饮酒患者由于酒精在体内代谢为乙醛,具有一定的致癌性,且酒精可引起机体叶酸缺乏,并导致脂质过氧化,促进氧自由基产生,进而增加乳腺癌的患病风险〔9〕。BMI偏高的患者体内脂质会参与细胞膜的构成及细胞膜信号传导,引起肿瘤相关的代谢反应,导致乳腺癌的发生风险增加〔10〕。因此,应加强戒酒、控制体质量管理等措施,降低乳腺癌的患病风险。但除了常见的增加乳腺癌患病风险的因素外,仍需要积极寻找乳腺癌的发病机制有关的遗传因素,以进一步明确乳腺癌的发生、进展,有利于早期诊断、治疗。

乳腺癌的发生机制与ER、PR密切相关,由于受到ER、PR的DNA二倍体调控,可导致乳腺癌的发生,并促进肿瘤的侵袭转移,影响乳腺癌患者预后〔11〕。位于染色体15q21.1上的CYP19A1基因是CYP450超家族成员之一,为激素代谢相关酶,其编码的CYP450芳香化酶对雌激素合成具有重要作用,可将雌激素A环芳香化,将睾酮、雄烯二酮分别转变为雌二醇、雌酮,且CYP450数量活性直接影响雌激素水平〔12〕。因此,推测CYP19A1基因多态性可能与乳腺癌患者遗传易感性有关。本研究经Logistic回归分析结果分析原因在于,CYP19A1基因可对CYP450芳香化酶进行编码,基因的突变会直接影响该酶的活性与蛋白结构,导致CYP450芳香化酶失活,进而影响雌二醇分泌,进一步增加乳腺癌的患病风险〔13〕。一项文献指出,CYP19A1基因表达或CYP450芳香化酶活性增强是增加乳腺癌肿瘤内雌激素产生的重要途径,可促进乳腺癌的患病风险及肿瘤的侵袭性〔14〕。

HER-2可调节细胞的增殖、凋亡,对肿瘤细胞转化具有活性;Ki67是与细胞周期相关的增生细胞核抗原,是肿瘤细胞增殖的标志之一〔15〕。本研究结果说明,CYP19A1基因多态性与乳腺癌患者临床病理特征有关。CYP19A1基因的C等位基因可增强芳香化酶活性,通过影响患者体内雌激素水平及激素的动态平衡,引起正常乳腺上皮细胞转化为癌细胞,并且可促进ER、PR阳性的乳腺癌细胞增殖、侵袭,导致肿瘤进展〔16,17〕。此外,有研究表明,CYP19A1基因rs4646位点的单核苷酸突变会影响基于芳香酶抑制剂治疗的乳腺癌患者治疗效果及不良反应的易感性〔18〕。进一步说明CYP19A1基因多态性不仅与乳腺癌患者遗传易感性、临床病理特征有关,也可作为预测乳腺癌患者治疗效果、预后的重要标志物。因此,针对乳腺癌患病高风险人群,可早期检测其CYP19A1基因,通过CYP19A1基因多态性,评估其乳腺癌的遗传易感性,或将CYP19A1基因作为早期诊断乳腺癌、评估疾病进展及预后的重要标志物。

综上,CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及肿瘤分期、HER-2表达、Ki67表达有关,临床可根据CYP19A1基因多态性的分布作为女性乳腺癌的易感基因检测位点,为早期诊断乳腺癌提供依据。本研究也存在不足,首先纳入患者排除了晚期乳腺癌,且研究对象均来自同一医院,结果可能存在偏倚;其次仅针对CYP19A1基因rs4646位点进行研究,未观察其他基因位点与乳腺癌的关系;最后未对CYP19A1基因多态性与乳腺癌患者治疗效果及预后的关系进行阐述,未来仍需要深入研究。