老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2及炎症因子水平变化和意义

霍静 吴忠隐 李伟 王璐 冯玉梅

(承德医学院附属医院 1老年病科,河北 承德 067000;2血管外科;3体检科)

下肢动脉闭塞症是高血压患者的常见并发症〔1〕。超过70%的老年患者发病早期无典型临床症状,表现为下肢酸痛、活动乏力等,常认为高龄、疲劳等原因所致而被忽视,当患者出现静息痛、间歇性跛行等症状时已错过最佳的治疗时机,对患者的生存质量造成严重不良影响〔2〕。血红素氧合酶(HO)-1在炎症过程中表达上调〔3〕。动脉硬化过程中淋巴细胞、巨噬细胞能够分泌脂蛋白相关磷脂酶(Lp-PL)A2,同时释放内皮素1和免疫激活物,损伤内皮细胞,减少一氧化氮的合成与释放〔4〕。本研究观察老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2及炎症因子水平变化并分析其意义。

1 对象与方法

1.1研究对象 选取2019年7月至2020年9月承德医学院附属医院收治的老年原发性高血压患者60例为单纯高血压组,高血压合并下肢动脉闭塞症患者60例为合并下肢动脉闭塞症组。纳入标准:①年龄≥60岁,原发性高血压诊断符合2018年修订的中国高血压防治指南;②符合下肢动脉硬化闭塞症的外科治疗策略中对下肢动脉闭塞症的诊断标准;③理解和沟通能力正常,自愿完成本研究中的检查项目。排除标准:①存在免疫系统功能异常,甲状腺功能异常;②继发性高血压;③近3个月服用叶酸、B族维生素;④存在全身感染性疾病,精神疾病。另收集医院体检的老年健康志愿者40例为健康对照组,年龄≥60岁,均无高血压、糖尿病等慢性病及重要脏器功能异常。本研究经医院伦理委员会审批通过,受试者均自愿参与本研究。

1.2资料收集和糖脂代谢指标检测 记录3组性别、年龄、体质量指数、饮酒史、吸烟史。入院后次日或健康体检时采集空腹肘静脉血,检测糖化血红蛋白水平,2 h内4 ℃ 2 500 r/min离心10 min,收集血清,全自动生化分析仪检测血脂指标。

1.3血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2水平检测 采集3组空腹肘静脉血5 ml,2 h内4 ℃ 2 500 r/min离心10 min,收集血清,酶联免疫吸附试验检测血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2水平。具体操作步骤如下:将预配制的标准品100 μl分别加入空白对照孔、标准孔,37 ℃恒温静置30 min,反复冲洗。弃去酶标板中的液体,加入酶标试剂,37 ℃恒温静置30 min,反复冲洗后加入显色剂,混匀后显色,加入终止液,上酶标仪读取450 nm处的吸光值。

1.4单核细胞及血清白细胞介素(IL)-8、IL-17水平检测 采集3组空腹肘静脉血5 ml,取其中2 ml使用全自动血液分析仪检测单核细胞水平;计算单核细胞与高密度脂蛋白比值(MHR)。取另外3 ml空腹肘静脉血,4 ℃ 2 500 r/min条件下离心10 min,收集血清,放射免疫分析法测定血清IL-8、IL-17水平。

1.5下肢动脉闭塞症严重程度评估 老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者使用便携式彩超彩色多普勒超声诊断系统测定踝臂指数,根据测定结果判断下肢动脉闭塞症严重程度:踝臂指数正常参考值范围是1.00～1.30,0.70～0.99为轻度狭窄,0.40～0.69为中度狭窄,<0.40为重度狭窄。

1.6统计学分析 采用SPSS25.0软件行χ2检验、方差分析,两两比较采用LSD-t检验,评估诊断价值采用受试者工作特征(ROC)曲线分析。

2 结 果

2.1各组一般资料及糖脂代谢指标比较 合并下肢动脉闭塞症组糖化血红蛋白、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白明显高于其他两组(P<0.05);单纯高血压组糖化血红蛋白、低密度脂蛋白水平明显高于健康对照组(P<0.05)。性别、年龄、体质量指数、饮酒史、吸烟史在各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组一般资料及糖脂代谢指标比较

2.2各组血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、单核细胞及MHR水平比较 合并下肢动脉闭塞症组血清HO-1、Lp-PLA2、单核细胞、MHR水平明显高于其他两组,血清一氧化氮水平明显低于其他两组;单纯高血压组上述指标与健康对照组比较差异显著(P<0.05)。见表2。

表2 各组血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、单核细胞、MHR及血清炎症因子水平比较

2.3各组血清炎症因子水平比较 合并下肢动脉闭塞症组血清IL-8、IL-17水平明显高于其他两组,单纯高血压组血清IL-8、IL-17水平明显高于健康对照组(P<0.05)。见表2。

2.4不同程度下肢动脉闭塞症血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、单核细胞及MHR水平比较 随着下肢动脉闭塞症严重程度的增加血清HO-1、Lp-PLA2、单核细胞、MHR水平明显提升,一氧化氮水平明显降低(P<0.05)。见表3。

表3 不同程度下肢动脉闭塞症血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、单核细胞及血清炎症因子水平比较

2.5不同程度下肢动脉闭塞症血清炎症因子水平比较 随着下肢动脉闭塞症严重程度的增加,血清IL-8、IL-17水平明显增加(P<0.05)。见表3。

2.6血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17检测对老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者的诊断价值 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17单独和联合检测对老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者均具有较高的诊断价值(P<0.05);其中各项指标联合检测的预测价值最高〔曲线下面积(AUC)=0.952〕,敏感度和阳性预测值明显高于各指标单独检测。见表4、图1。

图1 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17对老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者诊断价值的ROC曲线

表4 血清HO-1、一氧化氮、Lp-PLA2、MHR、IL-8、IL-17对老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者的诊断价值

3 讨 论

老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症为动脉内膜血栓形成、钙化、增厚,出现下肢动脉供血不足、淤血等临床症状,严重影响患者的生存质量〔5〕。早期诊断和评估病情,对改善老年原发性高血压合并下肢动脉闭塞症患者的预后具有重要意义。HO-1是在胞内发现的具有诱导活性的抗氧化酶,在多种疾病中依次表达〔6〕。冠心病患者外周血中HO-1高表达,且与冠脉病变严重程度呈正相关〔7〕。HO-1参与动脉粥样硬化的发生与发展,但在下肢动脉闭塞症中作用的研究仍未完全明确。一氧化氮参与高血压的发展过程,高血压患者体内炎症反应会激活巨噬细胞、内皮细胞,释放内皮素1及相关免疫样激活物,损伤内皮细胞,内皮细胞释放的一氧化氮减少,减弱了抑制血栓形成、舒张血管等作用〔8〕。动脉粥样硬化斑块中的淋巴细胞和巨噬细胞能够合成并分泌Lp-PLA2,与低密度脂蛋白相互结合后存在于外周血中,水解氧化磷脂后大量分泌游离脂肪酸、溶血磷脂等促炎因子,破坏血管内皮完整性,诱发局部反应,增加斑块不稳定性〔9〕。

炎症因子参与动脉粥样硬化的发生与进展,已有较多关于MHR在心血管方面的研究,但在下肢动脉闭塞症中作用的研究仍较为少见〔10〕。单核细胞是人体免疫系统的重要成分,外界刺激因素作用于血管后单核细胞在损伤部位聚集,分化为巨噬细胞,将血管损伤部位的脂质吞噬后形成泡沫细胞,生成斑块附着于血管内膜中,导致管腔狭窄或闭塞〔11〕。高密度脂蛋白可逆向转运胆固醇,下调单核细胞趋化蛋白1表达,进而抑制单核细胞活性,降低单核细胞的转移、黏附及聚集〔12〕。IL-8在炎症因子刺激下成纤维细胞、内皮细胞等均能够产生〔13〕。IL-8与特异性受体结合后能够激活中性粒细胞的生物学功能,将大量中性粒细胞聚集与炎症部位发挥生物学作用,最终加剧局部炎症反应〔14〕。IL-17促炎作用明显,在IL-6、转化生长因子-β诱导下,分泌IL-17A、肿瘤坏死因子-α等细胞因子,增强人体的炎症反应〔15〕。