白花蛇舌草和半枝莲及两者混合液的解热作用

侯小露，辛桂瑜，何东贤，庞春秀，薛敏芳，李燕红，徐兰程★

（1. 广西农业职业技术大学，广西 南宁 530007；2. 玉林师范学院生物与制药学院，广西 玉林 537000）

清热解毒类中草药主要用于清热解毒、清热泻火、清热凉血等方面。白花蛇舌草（Hedyotis diffusa Willd），别名蛇舌草、蛇利草、蛇总管、二叶，为茜草科植物白花蛇舌草的全草；在我国主要分布在广西、广东、云南、湖南、福建、江苏、浙江等地。现代研究发现白花蛇舌草主要化学成分有萜类、黄酮类、蒽醌类、甾醇类等；其味苦、性寒，归心、肺、脾、肝、经，主要功能为清热解毒，利尿消肿，抗癌止痛等。半枝莲（Scutellaria barbata D.Don）为唇形科植物半枝莲的全草；现代中药药理研究证实半枝莲主要化学成分包括黄酮类、二萜类、多糖类等，具有抗癌、护肝、抗氧化、抑菌、抗病毒、解热等多种作用。目前学者对两者的配伍使用研究，多集中在两者的抗肿瘤作用上，研究发现白花蛇舌草- 半枝莲可抑制人胰腺肿瘤的生长、“半枝莲- 白花蛇舌草”药的有效活性成分可抑制胃癌等；本文拟对白花蛇舌草、半枝莲以及两者按不同浓度配比的混合液对干酵母致热小鼠的解热作用进行比较分析，探讨三者的最佳解热浓度及剂量，为两者的配伍作用和在临床上更好的使用这两种中药提供一定的参考数据。

1 材 料

1.1 试验动物 SPF 级昆明小鼠，210 只，雌雄各半，体质量19～21 g，实验用昆明小鼠购于广西医科大学实验动物中心，生产许可证号：SCXK 桂2018-0003。

1.2 药 品 白花蛇舌草和半枝莲：购自于广西玉林市中药港，经鉴定白花蛇舌草为Rubiaceae Juss.(1789)科，Hedyotis L.属；半枝莲为Labiatae 科，Scutellaria Linn.属。安琪高活性干酵母（GB/T20886），购于安琪酵母股份有限公司；阿司匹林肠溶片（H20065051），购于沈阳奥吉娜药业有限公司；白凡士林（GB1790-2003），购于南昌华鑫医药化工有限公司。

1.3 试验仪器 电子体温计，购自广东天际电器股份有限公司；台式低速离心机TDZ4-WS（4000 r/min），购自上海五相仪器仪表有限公司；电子天平，购自上海佑科仪器仪表有限公司；电子万用炉，购自天津市泰斯特仪器有限公司；旋转蒸发器，购自上海亚荣生化仪器厂。

2 方 法

2.1 阿司匹林药液的制备 取300 mg 阿司匹林药片粉碎并溶解于15 mL 无菌水中，制得阿司匹林药液浓度为20 mg/mL。

2.2 干酵母混悬液的制备 取50.0 g 粉碎后的干酵母粉与适量的无菌生理盐水配制成20%干酵母混悬液。

2.3 药液的制备

2.3.1 白花蛇舌草水煎液和半枝莲水煎液的制备

取白花蛇舌草和半枝莲各30 g，分别与适量水煎煮、过滤、浓缩，使最后得到供试液分别含生药1 g/mL（低浓度组）、2 g/mL（中浓度组）、3 g/mL（高浓度组），药液置于冰箱4 ℃中备用。

2.3.2 白花蛇舌草和半枝莲不同配比混合水煎液的制备 取白花蛇舌草和半枝莲各30 g 混合，粉碎后与适量水煎煮、过滤、浓缩，使最后得到供试液分别含生药1 g/mL（低浓度组）、2 g/mL（中浓度组）、3 g/mL（高浓度组），药液置于冰箱4 ℃中备用。

2.4 试验动物分组

试验1将小鼠于实验室环境适应性喂养1周，测量小鼠肛温早晚各1 次（插入小鼠肛门2 cm），将体温超过38 ℃的小鼠剔除，符合条件的小鼠随机分为9 组，每组10 只，分别为白花蛇舌草高浓度组（3 g/mL）、白花蛇舌草中浓度组（2 g/mL）、白花蛇舌草低浓度组（1 g/mL）、半枝莲高浓度组（3 g/mL）、半枝莲中浓度组（2 g/mL）、半枝莲低浓度组（1 g/mL）；药物对照组（20 mg/mL）；空白组；模型组。

试验2 如试验1 方法所示。将符合条件的小鼠随机分为12 组，每组10 只，分别为白花蛇舌草和半枝莲混合液（1:2）高浓度组（3 g/mL）、中浓度组（2 g/mL）、低浓度组（1 g/mL）；白花蛇舌草和半枝莲混合液（2:1） 高浓度组（3 g/mL）、中浓度组（2 g/mL）、低浓度组（1 g/mL）；白花蛇舌草和半枝莲混合液（1:1）高浓度组（3 g/mL）、中浓度组（2 g/mL）、低浓度组（1 g/mL）；药物对照组（20 mg/mL）；空白组；模型组。

2.5 建立干酵母混悬液致小鼠发热模型 实验前24 h 小鼠禁食不禁水，取早中晚各测的温度均值作为基础温度。除空白组外，每只小鼠皮下注射20%干酵母混悬液25 mL/kg，每隔2 h 测肛温1 次。8 h后小鼠体温上升1 ℃以上，达到最高，空白对照组的小鼠体温没有明显变化，说明造模成功。

2.6 试验动物给药 将造模成功后的小鼠以灌胃的方式分次给药。各药物组的小鼠分别给药为0.1 mL，阿司匹林组给药0.1 mL，模型组给相同浓度体积的生理盐水0.1 mL。在给药后2 h、4 h、6 h 分别测量1 次肛温。在第一次给药后6 h 小鼠的体温若仍未恢复到基础体温，则继续第二次给药，给药后每隔2 h 对小鼠测量一次肛温，观察并记录小鼠体温的变化情况。

2.7 统计学分析 实验数据都采用SPSS 22.0 统计学软件，数据均采用均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用LSD 法分析，P＞0.05 为差异性不显著，0.01＜P＜0.05 差异性显著，P＜0.01 差异性极显著。

3 结果与分析

3.1 结果1

根据图1 可知，试验一造模成功后对各组小鼠给药，在第一次给药2 h 后，白花蛇舌草的高剂量组和低剂量组出现先上升后下降的现象，其余各药物剂量组体温都逐渐下降；第二次给药后，各药物剂量组小鼠的体温持续下降，但模型组小鼠的体温没有明显下降，说明白花蛇舌草水煎液和半枝莲水煎液对致热小鼠都具有解热降温作用。结合表1 和图1 发现，白花蛇舌草的中浓度组小鼠体温与模型组小鼠体温在给药4 h 后具有显著性差异（P＞0.05），而与药物组小鼠体温没有显著性差异（P＜0.05），说明了白花蛇舌草的中浓度组在白花蛇舌草和半枝莲的各试验组中能使小鼠更快地恢复到基础体温。

表1 试验1 造模成功后给药不同时间的小鼠体温变化

图1 白花蛇舌草和半枝莲水煎液给药小鼠后体温变化曲线

3.2 结果2

从表2 和图2 可知，试验2 在第一次给药后2 h、4 h、6 h，白花蛇舌草和半枝莲不同配比的混合液组和药物对照组，小鼠体温均下降，而模型组小鼠的体温持续上升，说明白花蛇舌草和半枝莲混合液在不同配比情况下均的对致热小鼠具有解热降温作用。在第二次给药后2 h，除空白组外，各组小鼠都与模型组的体温存在显著性差异（P＜0.05），而与药物对照组差异不显著（P＞0.05），说明白花蛇舌草和半枝莲不同配比的混合液各浓度组对干酵母致热小鼠都具有显著的解热降温作用；且在白花蛇舌草和半枝莲不同浓度配比混合液中，白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液中浓度组（2 g/mL）的小鼠能最快恢复到基础体温，表明其解热降温作用与其所有组别比较效果最好。

表2 试验2 造模成功后给药不同时间的小鼠体温变化

图2 白花蛇舌草和半枝莲混合水煎液给药小鼠后体温变化曲线

在试验1 对白花蛇舌草与半枝莲的单独解热效果中，可知白花蛇舌草的中浓度组（2 g/mL）解热效果最佳；在试验2 对两种药物的混合液解热效果比较中，发现白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液中浓度组（2 g/mL）效果较好。因此对白花蛇舌草的中浓度组（2 g/mL）与白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液的中浓度组（2 g/mL）进行比较分析，由图3 可发现白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液的中浓度组（2 g/mL）小鼠的体温能够更快速地恢复到基础体温且在之后数小时内体温没有出现反弹现象，表明白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液的中浓度组（2 g/mL）的解热降温作用效果最佳。

图3 白花蛇舌草和半枝莲（1:2）混合液中浓度组和白花蛇舌草中浓度组给药小鼠后体温变化曲线比较

4 讨 论

对小鼠皮下注射干酵母混悬液后0～2 h，模型组小鼠的体温开始出现下降，但在9 h 时小鼠体温又出现峰值，而后逐渐趋于平稳状态，这一现象可能是与小鼠对热的应激和机理有关，这需进一步研究证实。

由结果可见在第一次给药2 h 后，小鼠的体温出现下降趋势，在第二次给药后2 h，各组小鼠体温均值的下降篇幅和速度增大，其原因有可能是由于药物起效需要一定的时间，药物中的有效成分尚未对机体起到解热的作用，且解热的药效需在2 h 后才逐渐出现作用；而同时由于造模的基础因素，导致机体的体温会不断的出现上升现象。另外，在实验的过程中，发现个别低剂量组的小鼠在第一次给药4 h 左右出现体温均值上升的情况，其原因有可能是小鼠的体温出现反弹，或给药的剂量偏小，药效比高剂量组偏弱，因此出现体温反弹的现象。

在第二次给药后发现灌喂的各高浓度组（3 g/mL）的小鼠半数以上出现腹泻症状，而中药半枝莲，味苦、辛、性寒；白花蛇舌草，味甘、微苦、性寒，因而这种现象可能是由于白花蛇舌草和半枝莲这两味中药本身药物性寒，在灌喂时影响了小鼠的肠胃功能，但这需要后续实验进一步探究。

本实验中，白花蛇舌草、半枝莲以及两者不同配比的混合液均有较好的解热作用，对比发现白花蛇舌草和半枝莲以1:2 混合，其中浓度组（2 g/mL）能使发热小鼠最快恢复到基础体温，其解热降温效果最好；这一实验结果可为在临床上这两种中药的配伍及更好地使用提供参考。