杂色杜父鱼规模化全人工繁殖及稚鱼培育技术

肖志国 王秀兰 闫春梅 刘慧吉 陈伟强 金香琴 韩晴

(吉林省水产科学研究院,吉林长春 130033)

杂色杜父鱼(CottuspoecilopusHeckel)又名花足杜父鱼、山胖头等,隶属于鲉形目(Scorpaeniformes)、杜父鱼科(Cottidae)、杜父鱼属(Cottus),在我国仅分布于黑龙江、松花江、乌苏里江、绥芬河、图们江、鸭绿江、辽河支流浑河、太子河、辽东半岛碧流河等,国外见于朝鲜北部、俄罗斯远东地区及北欧诸国[1]。杂色杜父鱼(见图1)为喜低温的底层鱼类,以水生昆虫及其幼虫、河虾、东北螯虾、小鱼为食[1]。该鱼生活在无污染、水质清澈的溪流中,具有营养和经济价值高、品质优等特点,因而颇受消费者青睐,市场供不应求。2019年,本项目组以冰冻卤虫为饵料,采用等渗液采精、等渗液载精授精和降氧孵化的方法,以卤虫无节幼体、冰冻海溞为饵料,突破了野生杂色杜父鱼驯化和繁育技术难关,并在长白山地区进行了较为广泛的推广养殖。目前杂色杜父鱼养殖产量可达12 kg/m2,养殖效益在800元/m2以上。为进一步实现杂色杜父鱼的规模化全人工繁育,本研究采用人工繁殖的2龄杂色杜父鱼作亲本进行了繁育试验。现将繁育技术总结如下,旨在为实现吉林省杂色杜父鱼的产业化发展提供参考。

图1 杂色杜父鱼

1 材料和方法

1.1 试验地点

试验于2022年1—12月在长白山保护开发区福顺祥冷水鱼有限公司、和龙市青龙渔业有限公司进行。水源为山泉水,水质清澈无污染,溶解氧为8.0～10.5 mg/L,pH为7.0～7.8。

1.2 亲鱼培育

1.2.1 亲鱼来源与雌雄鉴别

亲鱼来源于2019年野生亲本经人工繁殖的子代,饲养至2022年1月9日,平均体长84 mm,平均体质量9 g,共21万尾。杂色杜父鱼亲鱼雌雄易辨,雌鱼背鳍均为棕褐色,而雄性第一背鳍上缘呈黄色。

1.2.2 亲鱼培育

2022年1月10日—4月19日,选择近水源的水泥池作为亲鱼培育池,每口水泥池面积为20 m2,池深0.8～1.0 m,养殖水深0.3～0.5 m。将雌、雄亲鱼分开饲养,同时按其平均体质量5、7、9、11、13 g分档进行饲养,放养密度为300～500尾/m2。以冰冻卤虫作为饵料,将冰冻卤虫装入网眼大小5 cm×5 cm的网袋,每天于7:00—8:00、15:00—16:00挂袋投喂2次,投饵量为鱼体质量的3%～5%。培育水温3～9 ℃,溶解氧不低于6 mg/L,养殖水体每2 h交换1次。培育过程中注意及时清洗进出水口的拦鱼网栅,每3 d刷池1次。发生水霉病时,将培育池水深降至15 cm,用0.1%的双氧水(H2O2)消毒15～20 min。如发生肠炎病,则将肠炎药和保肝药(“百毒威2号”和“生命1号”,常州市武进动物药品厂生产)均匀掺拌在饵料中速冻,挂袋投喂,连续3 d。

1.3 人工繁殖

1.3.1 室内暂养

4月20日,将食欲显著减退的亲鱼从培育池移入孵化车间,暂养于长2.80 m、宽0.52 m的玻璃钢养殖槽内,按雌雄、规格大小进行分养(同亲鱼培育)。在玻璃钢槽上、进水管下方设置饵料筐,将冰冻卤虫放入筐内,使卤虫随着水流冲下进行投喂。于上午7:00—8:00、下午16:00—17:00各投喂1次,投喂量以第2天略有剩饵为宜。

1.3.2 性成熟度检查和分养

性成熟的雌性杂色杜父鱼腹部柔软,轻压其腹部会有橙色或橘红色的卵粒流出;而成熟的雄性杂色杜父鱼,轻压其泄殖腔会有乳白色精液流出。按腹部的柔软程度(软、较软和不软),将不同的雌亲鱼分槽暂养。每周用0.1%的双氧水消毒15～20 min。

1.3.3 人工授精

采卵、采精前先配制等渗液。将2.4 g氯化钾(沈阳市新化试剂厂,分析纯)、2.6 g氯化钙(辽宁泉瑞试剂有限公司,分析纯)和90.4 g氯化钠(沈阳市东兴试剂厂,分析纯)充分溶解于10 L蒸馏水中,即配成等渗液。在避光、防水条件下分别采卵和采精。采卵时,先用毛巾轻轻擦干雌亲鱼体表的水,然后用挤腹采卵法连续将2～3尾杂色杜父鱼的卵采入适当大小(一般上口直径13 cm,深6 cm)的干燥的采卵盆中。采精时,轻压雄鱼的泄殖腔至精液流出,用烧杯中的等渗液将精液冲入干燥的采精盆中。授精:将载有精液的等渗液倒入采卵盆中,立即充分搅拌5～10 s,再静置3～5 min。

人工繁殖试验杂色杜父鱼亲鱼的雌雄数量比为(2～3)∶1。为了便于精、卵的充分搅拌,载精等渗液体积以卵体积的5～7倍为宜。本次试验共用雌鱼9.5万尾,采卵9.31万尾,采卵率为98.0%,共采得鱼卵1 178万粒。

1.3.4 受精卵孵化

将受精卵放在规格2.80 m×0.52 m×0.22 m(长×宽×深)的玻璃钢平列槽中孵化(见图2)。每口玻璃钢平列槽内设有0.4 m×0.5 m×0.2 m(长×宽×深)的5个串联小槽。为使孵化用水顺次流经每个小槽,小槽的阻水板及侧边用长80 cm、宽5 cm、厚2 cm的海绵带密封,出水口设于离底部高11～12 cm处。从位于出水口处的小槽开始布卵,将盛有受精卵的盆贴着水面均匀倾洒,密度为35 000～40 000粒/m2,即每个小槽布放受精卵7 000～8 000粒。受精卵在避光、防震条件下进行孵化,孵化水流1.5～2.0 L/min,水温7～11 ℃,水体溶解氧在6 mg/L以上。

图2 杂色杜父鱼平列槽孵化

1.3.5 孵化管理

受精卵消毒:采用滴定式流水消毒的方法,每天1次对受精卵消毒,消毒液(18%的溴硝丙二醇溶液)质量浓度为0.35～0.40 g/L,消毒时长40～60 min。洗槽:观察发现发眼卵出苗量在0.3%时,每3 d清洗1次孵化槽。清洗时,先封闭出水管,将孵化槽的水位提高至20 cm,然后关闭进水管,去除孵化槽中的密封海绵,用清水轻轻冲洗孵化槽,将仔鱼连同死卵一起倒入盆中。移槽:将清洗后的孵化槽移入事先准备好的平列槽主槽中,继续进行受精卵孵化。仔鱼暂养:将盆中的死卵择出,漂洗干净,把仔鱼倒入设置了防逃网的规格2.80 m×0.52 m×0.22 m(长×宽×深)玻璃钢槽中暂养,防逃网孔径为600 μm(30目),槽内水深0.10～0.12 m,水流量为2.5～3.0 L/min。随着暂养仔鱼数量的增多,水流量调整为3～4 L/min。降氧孵化:当出苗量在1%时,封闭出水管,将孵化槽水位提升至20 cm,然后关闭进水管,当溶解氧降至6.5～7.0 mg/L时,清洗孵化槽,将仔鱼移出暂养;如此重复操作,直至出苗结束。

1.3.6 稚鱼培育

利用1.5 m2(规格2.80 m×0.52 m×0.22 m)的玻璃钢水槽作为饲育槽进行分级培育。仔鱼刚孵出时呈侧卧状态,偶尔游动,1周后能正常游动,可开食驯化。体质量仅为0.01 g的仔鱼,放养密度约为40 000尾/m2,在培育槽进水处投喂活体卤虫无节幼体,每天4次(8:00、11:00、14:00、17:00),投饵率在20%左右。当稚鱼体质量为0.1 g时,放养密度约为20 000尾/m2,以活体卤虫无节幼体和小型冰冻海溞作为饵料:上、下午各投喂1次卤虫无节幼体活体,投饵率为10%;另外在培育槽的进水管下方放置饵料筐,将冰冻海溞放入筐中,随水流冲下进行投喂,上、下午各投1次,投饵率为5%。当稚鱼体质量为0.3 g时,放养密度约为10 000尾/m2,于上、下午各投喂1次卤虫无节幼体活体和中型冰冻海溞,两种饵料的投饵率均为6%。当稚鱼体质量为0.5 g时,放养密度约为5 000尾/m2,于上、下午各投喂1次活体卤虫无节幼体和大型冰冻海溞,两种饵料的投饵率分别为3%、6%。每月1次将培育槽水位降至4～5 cm,将充分溶解的食盐水均匀泼入槽中,配制成浓度为2%的食盐水,对稚鱼消毒浸泡40～60 min,以预防细菌性疾病;如果是治疗则连续用3 d。

2 结果

亲鱼经99 d培育,培育成活率约为90%。试验共采卵1 178万粒,受精率为93.0%。受精卵发眼积温105～126 ℃·d,共获得发眼卵1 052万粒,发眼率为96.0%。降氧孵化出苗积温为250～310 ℃·d,孵化天数为33～35 d,共出苗971万尾,孵化率为92.3%。稚鱼培育成活率为96.7%,共培育平均体质量1.3 g的稚鱼939万尾。

3 讨论

3.1 雌雄分养和大小分养是提高亲鱼培育成活率的关键措施

杂色杜父鱼具有相残的习性[2]。进行大小分养,一方面是避免较大个体吞食较小个体,直接造成亲鱼培育成活率降低;另一方面是避免较大个体咬伤较小的个体,引发水霉病,导致较小个体死亡,进而影响亲鱼培育成活率。另外,相同规格的雌、雄个体,在亲鱼培育过程中,通常雄鱼的生长要显著快于雌鱼,为防止较大的雄鱼吞食或咬伤较小的雌鱼,亲鱼培育时一定要进行雌雄分养。

3.2 用冰冻卤虫培育杂色杜父鱼的优点及光线对其摄食的影响

卤虫蛋白质质量分数约为45.4%,营养丰富[3],能够满足杂色杜父鱼的营养需求。本试验采卵率达98.0%,说明饲喂效果良好。杂色杜父鱼摄食慢,采用挂袋投喂冰冻卤虫的方式,卤虫逐渐融解,动态下落,并随池水缓慢流经养殖池,有利于杂色杜父鱼的摄食驯化。杂色杜父鱼为底层鱼类,对光线敏感,投喂时间以7:00—8:00、15:00—16:00为宜。

3.3 等渗液采精和载精是人工授精成功的关键

杂色杜父鱼雄鱼精液量极少,采精时不能直接将精液采到卵上,而需用采精介质。其卵为黏性卵,遇水迅速黏结,无法授精,但能游离于等渗液中,因此必须采用等渗液采精和载精,才能获得较高的受精率。

3.4 雌鱼性成熟状态判断和及时采卵是提高杂色杜父鱼受精率的重要因素

杂色杜父鱼雌鱼在繁殖期腹部显著膨大,外观上看已成熟,实则不然,其卵的成熟程度一定要通过腹部的柔软度进行判别。雌亲鱼在最佳成熟状态时,卵粒游离于腹腔,腹部很柔软,在进行人工采卵时,一般轻揉其腹部即可顺利排出卵,且受精率高,一般在90%以上;但有些腹部也较软的雌鱼,由于卵尚未完全成熟,即使能采得卵,这些卵受精率也很低,甚至无法受精,常导致人工繁殖失败。因此,在雌鱼性成熟达到最佳状态时采卵是提高受精率的关键,同时要注意对达到最佳成熟状态的雌鱼及时进行采卵,防止过熟,导致受精率降低和流产。

3.5 洗槽和移槽是提高孵化率的必要手段

在鱼类人工繁殖过程中,对受精卵进行消毒能有效杀灭致病菌,提高孵化率[4-5]。通常由于在出苗后停用消毒药物,发眼卵在出苗量达0.3%以后容易滋生水霉菌,死卵会堵住孵化槽的进水孔,造成局部水流不畅,进而导致发眼卵缺氧死亡,继发水霉病。如此蔓延,会造成发眼卵成片死亡,且水霉菌在孵化水体中大量滋生。因此,要每3 d洗槽一次,并进行移槽孵化。

3.6 降氧孵化是提高孵化率的有效措施

降氧孵化为环境胁迫,在出苗量达1%时采用此方法,能加速杂色杜父鱼出苗,降低发眼卵感染水霉菌的风险。据笔者之前的研究[6],杂色杜父鱼正常孵化出苗积温为250～373 ℃·d,出苗需时38～40 d,孵化率为80.8%。本试验的出苗积温为250～310 ℃·d,孵化天数为33～35 d,比之前缩短了5～7 d,孵化率达92.3%,提高了11.5%,效果显著。

3.7 卤虫无节幼体活体是稚鱼培育的关键饵料

卤虫无节幼体被广泛应用在鱼类苗种培育中[7]。杂色杜父鱼初孵仔鱼在暂养槽中呈侧卧状态,一周后才能正常游动,并具捕食能力。因仔鱼很小,体质量仅0.01 g左右,“开口”困难,卤虫无节幼体活体不仅适口性强,且游泳速度慢,有利于杂色杜父鱼仔鱼捕食,一般当天即可驯食成功。本试验中将卤虫无节幼体作饵料,再结合投喂冰冻海溞,稚鱼培育成活率高达96.7%。可以说,卤虫无节幼体活体在稚鱼培育中起到了决定性的作用。