液相色谱法测定饼干、派、面包等食品中安赛蜜的含量

赵迪

摘 要：目的：建立一种高效液相色谱法检测保定市在售饼干、面包、派等食品中安赛蜜的方法，监测食品安全风险，保证消费品安全。方法：采用C18反相色谱柱，二极管阵列检测器，以0.02 mol·L-1乙酸铵溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）为流动相，检测波长225 nm，流速1.0 mL·min-1，温度28.1 ℃，检测环境湿度58%，以水为提取溶剂超声波多次提取安赛蜜，加入沉淀剂去除提取液中杂质，进样量5 μL，上机测定安赛蜜含量。结果：共检测了27份样品，最低检出限为0.001 μg·mL-1，相对标准偏差为0.45%，样品回收率在95%以上，超标数0，合格率100%。结论：本方法操作简单、快捷、准确率较高，适合饼干、面包、派等烘焙食品中安赛蜜含量的监测。

关键词：安赛蜜；高效液相色谱；食品添加剂

Abstract： Objective： To establish a high performance liquid chromatography method for the detection of acesulfame potassium in biscuits， bread， pie and other foods sold in Baoding city， so as to monitor food safety risks and ensure the safety of consumer products. Method：The analysis was performed on a C18 reversed-phase column with diode array detector. The mobile phase was 0.02 mol·L-1 ammonium acetate solution∶methanol =95∶5 （V∶V）. The detection wavelength was 225 nm， the flow rate was 1.0 mL·min-1， the temperature was 28.1 ℃， and the humidity was 58%. The acesulfame potassium was extracted by ultrasonic with water as the extraction solvent. The precipitant was added to remove the impurities in the extract. The injection volume was 5 μL， and the content of acesulfame potassium was determined by machine. Result： A total of 27 samples were tested， with a minimum detection limit of 0.001 μg·mL-1， a relative standard deviation of 0.45%， and sample recovery rate above 95%， exceed the standard 0， qualified rate 100%. Conclusion： This method is simple and fast to operate， and has high accuracy. It is suitable for monitoring acesulfame potassium content in biscuits， bread， pie and other baked goods.

Keywords： acesulfame potassium; high performance liquid chromatography; food additive

餅干、面包、派等食品的基本原料是面粉、酵母、食盐、饮用水和白砂糖，再添加适量牛奶、蛋产品、色素和甜味剂等烘焙而成。烘焙食品营养丰富，色香味俱佳，不仅可以作为主要食物，也可以作为甜品点心，还能够作为馈赠亲朋好友的礼品。烘焙类食品作为生活不可或缺的一部分，消费水平已经超过了传统米面制品。随着生活水平的提高，食品的消费将保持稳定的水平。相关数据统计，我国烘焙类食品行业在2006—2010年，资产总额、销售收入的年均增长速度均保持在21%以上，2010年全年烘焙类食品的销售收入超过1 100亿元。

安赛蜜（乙酰磺酸钾）是一种食品添加剂，和糖精（邻苯甲酰磺酰亚胺）相似，甜度较高，被认为是最有前途的甜味剂之一。安赛蜜作为非营养型甜味剂，不参加新陈代谢，不为机体提供能量，具有口感好、无热量、不代谢、不吸收、无致龋齿性、耐热和耐酸等优点[1]。因此，安赛蜜在1992年就被国家卫生部允许应用于餐饮领域。乙酰磺酸钾是目前世界上第4代人工合成的甜味剂，生产工艺简单、价格比较便宜，食品生产者遵守相关规定，严格按照标准添加安赛蜜，不会影响食用人群的身体健康，部分食品生产企业在达到预期效果的前提下可能会提高安赛蜜在食品中的含量，机体长期摄入安赛蜜类甜味剂，会严重损害肝脏的生理功能，对神经系统也有严重的影响，老、幼、孕等特殊人群受到的危害尤为严重。为了杜绝超标和超范围使用安赛蜜的食品进入市场，对消费者健康造成影响，我国对安赛蜜在食品中加入的含量作了严格规定[2]。安赛蜜最低检出限0.001 g·kg-1，面包糕点食品中最高允许添加量0.3 g·kg-1，不得超标使用[3]。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

LC-20A岛津液相色谱仪配置紫外检测器（济南捷岛分析仪器有限公司）；SK-1涡旋振荡器（常州国华电器有限公司）；TG16-WS高速离心机（湘仪离心机有限公司）；KQ-600E超声波清洗器（武汉华科达实验社贝有限公司）；PL202-S分析天平（深圳时代之峰有限公司）。C2H3N（色谱纯）；KH2PO4（分析纯）；冰乙酸（优级纯）；超纯水；乙酸锌；亚铁氰化钾；安赛蜜标准储备液；磷酸二氢钾溶液（20 mmoL·L-1）：2.72 g无水磷酸二氢钾，用水定容至1 L。

1.2 试验方法

1.2.1 色谱条件

色谱柱：YWG-C18（4.6 mm×250 mm，10 μm）；流动相：0.02 moL·L-1乙酸铵溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）；流速：1 mL·min-1；检测波长：225 nm。

1.2.2 方法优化

饼干、面包类食品的成分比较复杂，脂质、蛋白质等会影响安赛蜜的检测效果。因此，在样品前处理过程中需要除去干扰物质，选用乙酸锌和亚铁氰化钾作为沉淀剂，不仅能够完全除去干扰物质，还不干扰安赛蜜的检测，且容易通过过滤法除去杂质[4]。20 ℃安赛蜜在水中的溶解度为270 g·L-1，微溶于酒精等有机溶剂[2]。超声提取法能加快分子运动，加大固体和液体之间的接触面积，使待测组分脱附和溶解速度加快，提取的速度也更快，提取更完全[2]。已有试验证实使用纯水作为安赛蜜的提取溶剂，超声提取30 min以上，安赛蜜的加标回收率95.0%～98.9%，效果较理想[5]。

1.2.3 样品处理

准确称取样品10.0 g于50 mL比色管中，用蒸馏水定容，涡旋振荡器振荡1 min后置于超声波清洗器中超声提取15 min，然后高速离心机5 000 r·min-1离心10 min，最后取上清液于50 mL容量瓶，加水定容，0.45 μm滤膜过滤，等待测定[4]。根据安赛蜜的保留时间、特征光谱定性，采用外标法定量[6]。检测样品，做加标回收试验，取10%的样品进行平行样品检测[4]。

2 结果与分析

2.1 线性范围

用纯水对安赛蜜标准溶液进行稀释，配制浓度为0.500 μg·mL-1、2.500 μg·mL-1、5.000 μg·mL-1和12.500 μg·mL-1（現用现配）的标准系列溶液进行测定，以安赛蜜的保留时间定性分析，以测得的峰面积、安赛蜜质量浓度（μg·mL-1）绘制标准工作曲线[4]。按10%的比例取平行样进行检测，得y=33 072x+66.468 6，相关系数R2=0.999 9，结果见表1[3]。

2.2 精确度试验

取1份不含安赛蜜的空白样品做6次平行测定，相对标准偏差为0.45%，见表2。

2.3 加标回收试验

随机称取2份样品，质量均为5.00 g，编号1、2，加标安赛蜜标准溶液1 μg，按1.2.3方法计算回收率，具体测定结果见表3。

2.4 最低检出限

取安赛蜜5.0 g，定容至50 mL，进样5 μL，按S/N=3计算，最低检出限为0.001 μg·mL-1，符合实验要求。

2.5 样品检测结果

本次实验检测样品共27份，安赛蜜的检出值均低于0.001 g·kg-1，结果见表4。

3 结论

随着生活水平的提高，人们的食品安全意识不断提高。本文采用高效液相色谱法对保定市在售饼干、派、面包等食品中的安赛蜜含量进行了检测，使用C18反相色谱柱作为分离柱，以0.02 mol·L-1乙酸铵溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）为流动相，检测波长225 nm，流速1.0 mL·min-1。样品处理以水作为提取溶剂，超声波振荡，加入沉淀剂去除提取液中杂质，操作简便易行。此次共检测了27份样品，安赛蜜的最低检出限为0.001 μg·mL-1，样品回收率在95%以上，合格率100%。结果表明，本方法操作简便易行、准确率高，适合用于检测饼干、面包等烘焙食品中安赛蜜的含量，对于饼干类食品生产企业和各级食品监督单位开展糕点类食品中安赛蜜的检测有较好的适用性。

参考文献

[1]姜彬，冯志彪.甜味剂发展概况[J].食品科技，2006，31（1）：71-74.

[2]白静.高效液相色谱法测定食品中的安赛蜜[J].食品科学，2011，32（16）：245-248.

[3]王林裴，周迎春，郑亚哲，等.高效液相色谱法同时测定饮料中的5种添加剂[J].农产品加工，2019（11）：50-54.

[4]邓明娟，金曼丽，邱理，等.10%啶虫脒·唑虫酰胺乳油的高效液相色谱分析[J].化工技术与开发，2018，47（1）：50-52.

[5]汪元亮，熊马剑，左军凤，等.高效液相色谱法测定多种硫化体系药用橡胶制品中游离硫含量[J].药品评价，2021，18（9）：524-527.

[6]丁磊.坚果与炒货食品中抗氧化剂的测定方法研究：高效液相色谱法[D].合肥：安徽大学，2010.