FZD7 在肝癌组织中的表达及对预后的影响

林颖烽

福建医科大学肿瘤临床医学院·福建省肿瘤医院 （福建福州 350014）

肝癌是一种继发于肝炎病毒感染、肝硬化和遗传性代谢性疾病的多因素疾病，在我国属于高发性疾病，发病率和死亡率在恶性肿瘤中均排名第三，并呈逐年上升趋势[1-2]。在临床诊疗中，大多数肝癌患者就诊时已发展至晚期，治疗手段较单一且受局限[3-5]。因此，寻找肝癌早期诊断和预后生物标志物，对于提高患者预后水平具有重要意义。FZD（frizzled）家族是Wnt 信号通路的一类跨膜受体，与肿瘤的发生发展存在相关性，其中FZD7 是FZD 10 个亚型中的一种[6-7]。研究发现，FZD7 在肝癌中呈特异性表达，可能促进肝癌的恶性行为[8-9]。基于此，本研究探讨FZD7 在肝癌中的表达及对预后的影响，以期为临床诊疗活动提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 UALCAN 数据库分析

UALCAN[10]数据库是一个开放式、资源共享的公共数据库，内容涵盖TCGA 数据库，收录了超过31 种公开发表的肿瘤基因转录数据及预后信息。本研究基于UALCAN 数据库收集已经发表的肝癌组织和正常组织的样本信息，研究FZD7 在肝癌组织和正常组织中的表达水平及FZD7 在肝癌不同临床分期中的表达水平。

1.2 Kaplan-Meier Plotter 分析

Kaplan-Meier Plotter[11]是一个基于GEO、TCGA、EGA 数据库存在的生存随访信息，在线分析21 种肿瘤预后的工具。本研究利用Kaplan-Meier Plotter 在线工具及网站已收集的肝癌预后数据，绘制FZD7 高表达患者和低表达患者的预后曲线图，研究FZD7 在肝癌中的预后价值。

1.3 GO 分析和KEGG 富集分析

GO 分析是一种被广泛应用于注释特定基因和基因产物生物学功能的工具，可分为生物过程（bioprocess，BP）、分子功能（molecular function，MF）和细胞成分（cell component，CC）。KEGG 是一个高通量数据库，在基因组水平上解释细胞和其他生物的高级生物学功能。本研究基于DAVID[12]在线网站收集的高通量样本数据和算法程序，分析FZD7基因在肝癌组织中GO 分布和KEGG 富集情况。

2 结果

2.1 FZD7 在肝癌组织和正常组织中的表达

FZD7 在肝癌组织中呈高表达，且表达水平明显高于正常组织，差异有统计学意义（P＜0.05），见图1。

图1 FZD7 在肝癌组织和正常组织中的表达水平

2.2 FZD7 在肝癌不同临床分期中的表达

随着肝癌临床分期增加，FZD7 表达水平不断升高，由图2 可知，FZD7 在肝癌Ⅳ期的表达水平最高。

图2 FZD7 在肝癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期中的表达水平

2.3 FZD7 的预后分析

如图3 所示，FZD7 高表达患者的生存率明显低于FZD7 低表达患者，FZD7 表达与肝癌患者的预后成负相关（P＜0.05）。

图3 FZD7 在肝癌患者中的预后价值

2.4 FZD7 的GO 分析与KEGG 富集分析

FZD7 的GO 分 析 结 果 显 示，BP 主 要 富 集在extracellular matrix organization、extracellular structure organization、external encapsulating structure organization，CC 主 要 富 集 在collagen-containing extracellular matrix、fibrillar collagen trimer、banded collagen fibril，MF 主 要 富 集 在extracellular matrix structural constituent、extracellular matrix structural constituent conferring tensile strength、platelet-derived growth factor binding，KEGG 通路主要富集在Protein digestion and absorption、Wnt signaling pathway、AGE-RAGE signaling pathway，见图4。由此可知，FZD7 基因在BP、CC、MF 功能方面主要富集在细胞外基质、细胞外膜等结构上，FZD7 基因在KEGG 通路主要富集在蛋白消化、Wnt 等转移相关的信号通路上。

图4 FZD7 在肝癌组织中的BP、CC、MF、KEGG富集分析结果

3 讨论

肝癌是我国组织常见的一种恶性肿瘤，每年新发病例达38.8 万人。由此可见，我国肝癌的诊治形势较为严峻[13-15]。肝癌的早期症状较为隐匿，患者不易察觉，当患者出现症状时往往已经发展到中晚期，晚期患者手术治疗的存活率及疗效均欠佳，化疗药物的效果也较为有限。因此，早期诊断及治疗干预对于提高肝癌患者预后、降低疾病死亡率具有重要意义。

FZD7 是FZD 家族中唯一一个在进化过程中高度保守的成员，其在生物的生长发育过程中能够调节人胚胎干细胞分化与自我更新，同时在肿瘤发生发展过程中存在不同表达，可能与肿瘤的恶性行为相关[16]。贺子秋等[17]研究发现，前列腺癌患者FZD7 阳性率较高，提示FZD7 可能是前列腺癌的一类早期诊断标志物。于冰等[18]的研究显示，在三阴乳腺癌中FZD7 的表达明显升高，且高表达的患者预后不佳。本研究结果显示，FZD7 在肝癌组织中呈高表达，且表达水平明显高于正常组织，随着肝癌临床分期的增加，FZD7 表达水平不断升高，此结果与Merle 等[19]在乙型肝炎致癌模型中获得的结果相似。此外，本研究结果还显示，FZD7 高表达患者的生存率明显低于FZD7 低表达患者，提示FZD7 可能是肝癌的一个预后生存指标。

Wnt 信号通路在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用，可通过影响EMT 过程促进肿瘤细胞转移[19-21]，而FZD7 作为Wnt 信号通路的一类跨膜受体，可能通过此途径促进肿瘤恶性行为。于冰[18]等人研究发现乳腺癌患者中FZD7 差异表达最明显，并通过Wnt 通路调节三阴乳腺癌EMT。本研究结果显示，FZD7 基因在肝癌组织中的GO 主要富集在细胞外基质、细胞外膜等结构上，FZD7 基因在KEGG 通路主要富集在蛋白消化、Wnt 等转移相关的信号通路上。这些结果与Vincan 等[22]在结直肠癌中的研究结果及预测的通路相似。因此，本研究推测肝癌组织中FZD7 可能通过改变细胞外膜结构促进细胞外基质分解，调节Wnt 信号通路，促进肿瘤细胞EMT 过程，加快恶性转变及转移进程。

综上所述，FZD7 在肝癌组织中呈高表达，且与肝癌不良预后存在相关性，可作为肝癌预后诊断的有效指标，并可能进一步成为关键的治疗靶点，为靶向FZD7 药物对肝癌作用的研究提供一定的参考依据。