以黄精、益智仁为主的复方固体饮料健脾渗湿的作用研究

◎ 闫小娟，张海悦，张瑞博，许家豪，杨 雪

（1.吉林省富生食品有限公司，吉林 长春 130000；2.长春工业大学，吉林 长春 130000；3.吉林省产品质量监督检验院，吉林 长春 130000）

《黄帝内经》认为脾胃乃后天之本，养生当先健脾胃[1]。归脾汤出自南宋御医严用和的名著《济生方》，由9味药组成，即人参、黄芪、白术、甘草、大枣、龙眼肉、茯苓、酸枣仁、木香，这些药组合成方，心脾兼顾，气血双补。

根据传统黄帝内经中医理论和本方组方原则，与专业工程师反复试验，最终严选了益智仁、黄精、芡实、山药和茯苓等15味中药，组成黄精益智仁复方固体饮料，具有补气健脾、养血安神、益肝明目之效，且所有原材料均属于药食同源类品目，无任何毒副作用。本方以黄精为君药，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾功能，用于治疗体倦乏力、脾胃虚弱、肺虚燥咳、精血不足和内热消渴等。《神农本草经》记载“黄精主补中益气、除风湿、安五脏，久服轻身，延年不饥”。《本草逢源》称“黄精宽中益气，使五脏调和，肌肉充盛，骨髓强坚”。现代研究证明黄精具有抗缺氧、抗疲劳、抗衰老等作用，能提高和改善记忆力，增强免疫功能和新陈代谢，其主要成分为黄精多糖、甾体皂苷、强心苷、维生素和多种人体有用氨基酸类化合物[2-4]。《奇效良方》记载黄精与枸杞配伍能补精益气。

学生平时学习紧张，考试时抓紧最后的冲刺机会，用脑比平时更多，补脑尤为关键。益智仁是一味补脑的药食同源类物质，本方以益智仁为臣药。益智仁是我国南方四大名药之一，具有益智安神、暖肾固精、温脾开胃的功效。中医认为益智仁温而不热，暖而不燥，补而不峻，涩而不泻，有缓和滋补之性，很适合脑力消耗大、脑营养供应不足、学习时间长、学习压力大和精神紧张过度导致的头昏脑涨、记忆力减退、失眠健忘者服用。益智仁药用价值极高，主要成分为益智仁酮、维生素B、维生素C、维生素E、多种氨基酸和脂肪酸等。益智仁之所以能益智，是因为其含有大量的“聪明因子”，即牛磺酸，对处于生长发育期的青少年以及记忆减退的中老年人有重要作用。益智仁所含的胆碱、酪氨酸、二十二碳六烯酸等营养成分是增加神经细胞营养的物质，具有改善睡眠、调节人体内分泌、益智安神的功效[5-7]。

本方配以芡实、山药、茯苓、红枣、陈皮、枸杞子、桑葚、鸡内金、山楂、火麻仁、黑芝麻、乌梅和甘草共为佐使，共凑健脾益气、养心安神、养肝明目之效[8-13]。本方中西结合，吸收现代科研成果，添加了益生原（低聚果糖）和抗性糊精（膳食纤维）。现代研究证实低聚果糖能促进食欲、调节胃肠道功能；抗性糊精可以提高营养素的利用率，促进对钙、铁、锌等微量元素的吸收。本研究以小鼠为模型，探究以黄精、益智仁为主的复方固体饮料的健脾作用，为药食同源的健脾益气产品的开发提供研究基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物

SPF级雄性昆明小鼠80只，动物质量合格证号为110324210106489574，生产许可证号为SCXK（京）2019-0010，购于斯贝福（北京）生物技术有限公司。小鼠进入实验室后，自由饮水进食，随机分组后适应性饲养3 d，温度为20～26 ℃，相对湿度为40%～70%。动物维持饲料，生产许可证号为苏饲证（2019）01008，饲料合格证号为120211020048，购于江苏省协同医药生物工程有限责任公司。

1.2 材料与试剂

富生紫福临黄精益智仁固体饮料（吉林省富生特医食品公司）；0.9%氯化钠注射液（石家庄四药有限公司）；番泻叶（吉林大药房）；磷酸缓冲溶液（西陇科学股份有限公司）。番泻叶水提液：沸水浸提1 h，2次，浓度浓缩至1.0 g·mL-1，冷藏保存备用。

1.3 实验方法

1.3.1 建造小鼠模型

造模前、后均于每天早晨固定时间观察小鼠皮肤、毛发、行为、大便、脱肛状态，并进行记录。参考刘汶等[14]的方法造模，空白组正常饲养，其余各组每只小鼠灌胃1.5 mL番泻叶水提液（1.0 g·mL-1），每日2次，持续27 d。

参考《中医脾虚证动物模型的造型》[15]，本实验脾虚动物模型标准为出现泄泻严重，甚至脱肛，泄泻食少、体重减轻、消瘦、神志萎靡、四肢不收、毛色枯槁、蜷缩聚堆、易疲劳等症状，即可认为脾虚造模成功。选取造模成功的小鼠进行实验。造模期间所有动物均正常饲养，为防止动物模型因腹泻出现过度脱水、电解质紊乱的现象，在造模第3天喂口服补液盐稀释液，不喂水。

1.3.2 给药方法及给药量

设2 g·（kg bw）-1、4 g·（kg bw）-1、6 g·（kg bw）-1共3个剂量组，分别相当于人体推荐用量的10、20、30倍。设1个模型对照组（纯水），1个空白对照组，每组10只动物。分别称取4 g、8 g、12 g样品，加纯水至40 mL，混合均匀备用。灌胃体积每日按20 mL·（kg bw）-1，生理盐水作为阴性对照组，空白组采用常规饲养。各实验组每天9:00，19:00分别给予受试样品，每日2次，共10 d。

1.4 观察指标

1.4.1 称重

实验结束后，称量每组小鼠体重并记录。

1.4.2 小鼠脾脏指数和胸腺指数的测定

称重完成后，剖开小鼠胸腹取脾脏及胸腺，磷酸缓冲液冲洗并去除多余组织，用滤纸轻轻吸干脾脏及胸腺表面多余的液体，再分别称量脾脏和胸腺的重量。按照公式（1）计算小鼠脾脏和胸腺脏器指数，计算公式为

1.5 统计学方法

使用SPSS 22.0统计学软件对数据进行分析，并用（）表示，组间差异采用单因素方差分析，P＜0.05表示为差异具有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 小鼠一般行为观察

适应性饲养后，各组小鼠皮肤、毛发光滑，精神活跃，粪便呈黑色颗粒样成形便。空白组小鼠饮食正常，小鼠皮肤、毛发光滑，粪便呈黑色颗粒样成形便，体重增长，精神活跃。造模第7天，小鼠毛发顺整，未有异常行为；造模第11天，小鼠皮肤毛发枯槁，神志萎靡，活动减少，部分小鼠泄泻，大便不成形，未见脱肛；造模第17天，小鼠毛色枯槁，神志萎靡，扎堆，部分小鼠泄泻严重，出现脱肛现象；造模第26天，70%以上小鼠出现脱肛，体重减轻，饮食减少，蜷缩聚堆，精神萎靡不振。造模成功，随即开始给药治疗。阴性组不给予药物治疗，脾虚泄泻自然恢复，毛发逐渐恢复，体重逐渐上升，饮食少量增加，但很少动，神志不佳，仍有扎堆现象；低、中、高剂量组分别给予不同浓度的富生紫福临黄精益智仁固体饮料治疗。

2.2 各组小鼠体重变化比较

空白组与阴性对照组前后体重增长率差异有统计学意义（P＜0.05），表明脾虚泄泻型小鼠造模成功。与阴性对照组相比，富生紫福临黄精益智仁固体饮料低、中、高剂量组小鼠给药前后体重增长率分别增加了1.85%、5.68%、12.49%，均具有统计学差异（P＜0.05）。高剂量组小鼠的体重恢复最好，说明富生紫福临黄精益智仁固体饮料对治疗脾虚泄泻有效，详见表1。

表1 各组小鼠体重变化对比表（）

表1 各组小鼠体重变化对比表（）

组别数量/只体重/g给药前后体重增长率/%适应性饲养后造模后治疗后空白组1030.74±1.4339.07±2.6140.97±2.584.86±2.86阴性对照组1031.61±2.1135.70±2.8633.39±4.49-6.47±8.02低剂量组1031.39±2.0433.47±1.1434.09±2.431.85±7.38中剂量组1031.87±2.2335.90±2.6237.94±3.305.68±5.18高剂量组1032.22±2.2833.86±3.4138.09±3.5412.49±6.18

2.3 各组小鼠脾脏指数比较

空白组与阴性对照组脾脏指数相比，差异有统计学意义（P＜0.05），表明脾虚泄泻小鼠造模成功。与阴性对照组相比，富生紫福临黄精益智仁固体饮料低、中、高剂量组小鼠给药前后小鼠的脾脏指数增加，均具有统计学差异（P＜0.05）。高剂量富生紫福临黄精益智仁固体饮料灌胃脾虚泄泻型小鼠时，小鼠的脾脏恢复最好，与没有生病的小鼠脾脏重量最接近，说明富生紫福临黄精益智仁固体饮料对治疗脾虚泄泻有效，详见表2。

表2 各组小鼠给药后脾脏指数对比表（）

表2 各组小鼠给药后脾脏指数对比表（）

脾脏指数/（mg·g-1）空白组10128.83±16.253.14±0.36阴性对照组1061.02±15.321.82±0.24低剂量组1088.26±16.562.59±0.23中剂量组1091.84±19.652.42±0.31高剂量组10112.72±12.753.03±0.36组别数量/只脾脏重/mg

2.4 各组小鼠胸腺指数比较

空白组与阴性对照组胸腺指数相比，差异有统计学意义（P＜0.05），表明脾虚泄泻小鼠造模成功。与阴性对照组相比，富生紫福临黄精益智仁固体饮料低、中、高剂量组小鼠给药前后小鼠的胸腺指数增加，均具有统计学差异（P＜0.05）。高剂量富生紫福临黄精益智仁固体饮料灌胃脾虚泄泻型小鼠时，小鼠的胸腺恢复最好，与没有生病的小鼠胸腺重量最接近，说明富生紫福临黄精益智仁固体饮料对治疗脾虚泄泻有效，详见表3。

表3 各组小鼠给药后胸腺指数对比表（）

表3 各组小鼠给药后胸腺指数对比表（）

胸腺指数/（mg·g-1）空白组10122.15±21.022.98±0.52阴性对照组1059.98±15.871.74±0.38低剂量组1069.96±19.481.91±0.54中剂量组1075.09±17.911.78±0.29高剂量组10101.12±12.242.74±0.41组别数量/只胸腺重/mg

3 结论与讨论

小鼠体重增长率可以反映小鼠的体重增长情况。免疫器官分为中枢免疫器官和外周免疫器官，中枢免疫器官有骨髓、胸腺，是免疫细胞发生、分化、发育、和成熟的场所。外周免疫器官有淋巴结、脾、黏膜相关淋巴组织，是成熟T细胞和B细胞定居的场所及产生免疫应答的部位。脾脏指数可以反映小鼠的外周免疫器官在形态学上的改变；胸腺指数可以反映小鼠的中枢免疫器官在形态学上的改变。结果表明，与空白组小鼠相比，阴性对照组小鼠的体重增长率、脾脏指数、胸腺指数3项指标均低于空白组小鼠，说明脾虚泄泻型小鼠仅依靠自愈能力，不可能恢复到原状。与阴性对照组小鼠相比，富生紫福临黄精益智仁固体饮料低、中、高剂量组小鼠的体重增长率、脾脏指数、胸腺指数3项指标均增加，说明在一定的自愈能力的基础上，富生紫福临黄精益智仁固体饮料能够促进脾虚泄泻小鼠体重增长，有利于外周免疫器官和中枢免疫器官恢复正常。