AECOPD患者T淋巴细胞与肺功能及炎症指标的相关性研究

董素素，梅 牧，王天立，谭亚芬，肖 强，张 旋，李秋平

常德市第一人民医院呼吸与危重症医学科（湖南常德 415000）

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）是一种以持续性气流受限为特征的常见呼吸系统疾病，主要发生在老年人群中。慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD）患者的呼吸道症状恶化[1]。AECOPD 已成为导致老年患者住院的重要疾病之一，造成巨大的社会和经济负担。COPD 的发生发展与气道炎症和全身免疫紊乱有关[2]。免疫功能异常是导致COPD 患者病情加重及预后不良的主要因素之一，而T 淋巴细胞亚群是机体免疫功能发挥作用的主要载体。T 淋巴细胞亚群与COPD 之间的关系越来越受关注。研究表明，COPD 患者急性加重期外周血T淋巴细胞计数水平明显低于健康人群，T 淋巴细胞亚群失衡导致的机体免疫功能失调与COPD 进展密切相关[3-4]。目前有关T 淋巴细胞亚群与肺功能、炎症指标的关系研究较少。本研究旨在探讨AECOPD 患者T淋巴细胞亚群与肺功能、炎症指标的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象

回顾性分析湖南省常德市第一人民医院呼吸内科2021 年1 月至12 月AECOPD 患者的临床资料，电话随访一年内急性加重的次数。根据慢性阻塞性肺疾病全球倡议（Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease,GOLD）标准诊断为COPD，表现为症状急性加重，如呼吸困难、痰脓性增加、痰量增加；可耐受肺功能检查；可获取相关实验室检查结果。排除心、肝、肾、脑等重要器官疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤及过去3 个月内有就医史的患者。根据肺功能分类，将AECOPD 患者分为GOLD I—Ⅱ、Ⅲ—Ⅳ组。健康对照组为同期在我院体检中心接受体检者。本研究由常德市第一人民医院医学伦理委员会批准通过（2021-114-01）。

1.2 研究方法

1.2.1 肺功能检查

采用德国耶格公司生产的Master Screen Diffusion 肺功能测定仪测定第 1 秒用力呼气容积占预计值百分比（FEV1%pred）、吸入支气管扩张剂后的第1 秒用力呼气容积与用力肺活量比值（FEV1/FVC）。肺功能检测前24 h 内不使用支气管扩张剂，吸入400 μg 沙丁胺醇20 min 后行支气管舒张试验。要求质量控制达到美国胸科协会标准[5]。①呼气起始标准：呼气起始无犹豫有爆发力，F-V 曲线显示PEF 尖峰出现；外推容积应小于FVC 的5%或0.15 L（取较大值）。②呼气结束标准：受试者不能或不应继续呼气，呼气时间大于6 s 或呼气平台出现持续1 s 以上。③可接受的呼气标准：到达满意的试验开始标准；呼气第1 s 无咳嗽、曲线平滑；达到满意的试验结束标准；没有漏气、声门关闭；呼气期间没有再吸气。

1.2.2 T淋巴细胞检测

AECOPD 组患者于入院后第一天、对照组于体检时清晨空腹抽取5 mL 外周静脉血，加入K2EDTA 抗凝，采用细胞免疫芯片（上海汇中细胞生物科技有限公司）检测AECOPD 组及健康对照组患者外周血T 淋巴细胞亚群：CD3、CD4、CD8、CD4/CD8 细胞。操作严格按试剂盒方法进行，包括稀释血样、加样孵育40 min、洗染计数。

1.2.3 超敏C反应蛋白检测

AECOPD 组患者于入院后第一天、对照组于体检时清晨空腹抽取5 mL 外周静脉血，使用特定蛋白分析仪Aristo（深圳市国赛生物技术有限公司）经免疫比浊法测定超敏C 反应蛋白（C-reactive protein,CRP）。

1.3 统计分析

使用SPSS 26 软件分析数据。正态分布的计量资料用均数和标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。非正态分布的计量资料用中位数和四分位数表示，采用秩和检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。CD4、CD4/CD8、CD3、CD8 与FEV1%pred、FEV1/FVC、超敏CRP 的关系采用Pearson 相关分析。采用双侧检验，取检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 一般情况

研究共纳入66 例AECOPD 患者，其中男性50 例、女性16 例，平均年龄（68.82±8.12）岁；对照组63 例，其中男性49 例、女性14 例，平均年龄（68.41±5.12）岁。AECOPD 患者平均年龄（P=0.73）、吸烟指数（P=0.08）与对照组的差异无统计学意义，但平均体质量指数（BMI）、FEV1%pred、CD4、CD8、CD3、CD4/CD8 均低于健康对照组（P＜0.001），超敏CRP 高于健康对照组（P＜0.001），见表1。

表1 AECOPD组和健康对照组相关指标比较Table 1.Comparison of related indicators between AECOPD group and control group

2.2 不同肺功能分级间的比较

相较于肺功能I—Ⅱ级组患者，Ⅲ—Ⅳ级组患者CD4（P＜0.001）、CD4/CD8（P=0.02）、CD3（P=0.02）显著降低，而超敏CRP 则显著升高（P=0.03），CD8 差异无统计学意义（P=0.22），见表2。

表2 肺功能I一II组与Ⅲ一Ⅳ组的外周血T淋巴细胞及超敏CRP比较Table 2.Comparison of peripheral blood T lymphocyte and hypersensitive CRP between lung function I-II group and III-IV group

2.3 各指标间的相关分析

CD4、CD4/CD8、CD3 与FEV1%pred、FEV1/FVC 呈正相关，与超敏CRP、急性加重次数呈负相关（P＜0.05）。CD8 与FEV1%、FEV1/FVC、超敏CRP 无显著相关性（P＞0.05）。见表3。

表3 各指标间的相关性分析Table 3.Correlation analysis among various indexes

3 讨论

在COPD 发病过程中T 淋巴细胞亚群存在免疫缺陷及免疫失衡，T 淋巴细胞介导的免疫反应是COPD 发病的重要机制之一[6]。外周血T 淋巴细胞亚群可反映患者的细胞免疫状态。具体而言，CD4+辅助性T 细胞在活化状态下可分泌释放细胞因子以增强和扩大免疫反应[7]，而CD8+辅助性T 细胞抑制B 和T 淋巴细胞以维持免疫稳态。CD4+/CD8+T 淋巴细胞的比值可直接反映患者T 淋巴细胞亚群的异常情况，从而在一定程度上了解细胞免疫状态[8]。CD4+/CD8+T 淋巴细胞比值降低表明机体免疫功能下降。

与健康志愿者相比，慢性阻塞性肺病患者的CD4+T 淋巴细胞数量和CD4+/CD8+比率已被证实较少[9]。而随着慢性阻塞性肺疾病的进展，CD8+T 细胞和B 细胞的数量增加[10]。与之前报道的结果相似，本研究结果表明，与健康人群相比，COPD 患者的CD3+T 细胞、CD4+T 细胞数量及CD4+/CD8+比率显著减少。但是，与其他研究不同，本实验并未发现CD8+T 细胞数量增多。

T 淋巴细胞亚群改变与COPD 患者FEV1%预计值、FEV1/FVC 有关。早期有研究认为CD4/CD8 T 淋巴细胞比值与COPD 患者肺功能呈负相关[11]。而之后研究发现，COPD 各级患者的CD3+、CD4+细胞数量与FEV1/Pre、FEV1/FVC 有正相关性；COPD I、II、III 患者CD8+细胞数量与FEV1/Pre、FEV1/FVC 具有负相关性，与CD4+/CD8+比值具有正相关性[12]。本研究发现AECOPD 患者CD4、CD4/CD8、CD3 与FEV1%、FEV1/FVC 呈正相关。CD8 与FEV1%、FEV1/FVC 无显著相关性。

T 淋巴细胞异常可导致慢性感染和炎症。有研究显示，细胞毒性CD8 T 淋巴细胞与辅助CD4 T 淋巴细胞之间的不平衡可导致COPD 患者气道中的异常炎症过程，使该疾病成为淋巴细胞驱动的炎症性疾病[13]。低CD4/CD8 比值是COPD 肺部炎症反应的特征性指征。超敏CRP 是评估躯体感染的敏感指标，在炎症反应、组织损伤和免疫系统疾病中显著增加[14]。研究还发现，CD4/CD8与超敏CRP 呈负相关，CD4、CD3 与超敏CRP 也呈负相关。

COPD 的特征是高发病率和高死亡率，不仅给患者及其家人带来巨大痛苦，同时造成巨大的经济和社会负担。免疫失衡与COPD 密切相关，T 淋巴细胞亚群失衡在气道炎症及 COPD 发病机制中起着重要作用。通过监测评估COPD 患者的免疫功能，有助于临床医生及时采取有效的治疗措施。吴晓玲等提出，在常规治疗 COPD 急性加重期患者的同时加用胸腺肽等调节机体免疫，能达到减少患者急性发作次数、缩短住院时间及改善患者病情[15]。对于常规治疗效果不佳的患者，或可通过中药或免疫制剂调节T 淋巴细胞亚群平衡，增强机体免疫功能，改善患者预后。本研究为回顾性研究，且样本量较为单一，存在一定局限性，未来有待于开展设计严谨的高质量研究进一步探讨。