气相色谱法测定稻谷中有机磷农药残留的方法研究

◎ 陈垂凤

（海口市粮油产品质量监测站，海南 海口 570145）

粮食安全问题一直是公众关注的焦点，其中，农药残留问题越来越引起人们的关注。农药中以有机磷杀虫剂品种最多，用量最大，因有机磷农药具有广谱、高效、量小、使用方便、半衰期短等优点，在稻谷的种植和贮存过程中应用比较广泛[1]。但是，有机磷类大部分属于内吸性农药，部分品种不易降解，特别是在中后期施药，农药容易在种子内残留，农户为了防虫及提高稻谷的产量，在种植过程中必须施加农药，一旦施加过量，将会严重影响人们的身体健康。因此，为了保障人民的身体健康，检测稻谷中的农药残留十分必要。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

1.1.1 材料与试剂

1.00 mg/mL的敌敌畏标准储备液、1.00 mg/mL甲拌磷标准储备液、1.00 mg/mL马拉硫磷标准储备液和1.00 mg/mL毒死蜱标准储备液（中国计量科学研究院制）、中性氧化铝（分析纯）、二氯甲烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）。

1.1.2 仪器与设备

气相色谱仪（Agilent,8890B）、带火焰光度检测器FPD（Agilent）、Agilent毛细管色谱柱DB-1701（30 m×0.53 mm×0.5μm）、涡旋混合器（VORTEX MIXER）,马沸炉（灼烧中性氧化铝用）、离心机（UNIVERSAL 320）、超纯水系统等。

1.2 试验方法

1.2.1 标准溶液的配制

用二氯甲烷将1.00 mg/mL敌敌畏、1.00 mg/mL甲拌磷、1.00 mg/mL马拉硫磷和1.00 mg/mL毒死蜱标准储备液稀释配制成系列浓度的混标,即0.00 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、 0.25 μg/mL、0.50 μg/mL、0.75 μg/mL、1.00 μg/mL的系列混标。

1.2.2 色谱条件

色谱条件：毛细管色谱柱DB-1701（30 m×0.53 mm×0.5 um）；带火焰光度检测器FPD；柱流量3 mL/min；检测器温度250 ℃；气化室温度250 ℃；色谱柱升温程序：程序升温，即初始温度50 ℃（保持1 min），再以10 ℃/min 的速度升至200 ℃（保持3 min），再以10 ℃/min 的速度升至280 ℃（保持6 min）[2]；载气：高纯氮；流速：60 mL/min；氢气流速：75 mL/min；空气流速：100 mL/min；进样方式：不分流进样，进样体积：1.0 μL。

1.2.3 样品处理

稻谷经脱壳、锤式旋风磨粉碎过20目筛，混匀，准确称取10 g（精确至0.01 g）样品置于50 mL离心管中，加入0.5 g中性氧化铝及20 mL二氯甲烷，摇匀，放在涡旋混合器上，涡旋1 min，置于冷离心机中以5 000 r/min离心20 min，取出上清液用0.22 μm有机相滤膜过滤，滤液直接进样[3]。

1.2.4 4种农药保留时间测定

取浓度均为1.00 μg/mL的敌敌畏、甲拌磷、马拉硫磷和毒死蜱分别上机测定各自的保留时间，滴滴畏保留时间为10.740 min、甲拌磷保留时间为15.792 min、马拉硫磷保留时间为20.511 min、毒死蜱保留时间为19.674 min。

2 结果与分析

2.1 试剂的选择

二氯甲烷作为提取溶剂，溶解性强、毒性小，能充分提取样品中的敌敌畏、甲拌磷、马拉硫磷和毒死蜱[4]。

2.2 色谱条件优化

经多次试验，筛选检测器温度，载气流速和柱温程序条件，最终确定本试验的色谱分析条件，该方法的基线平稳，响应高，峰形对称，除溶剂峰外，基本没有杂峰。

2.3 线性范围、相关系数及方法的检出限

通常最小检出限是以仪器基线噪声3倍所对应的浓度值和对应的峰高值计[5]。结果表明：在0.05~1.00 μg/mL内线性关系良好，线性方程、相关系数和检出限如表1所示。

表1 线性方程、相关系数和检出限表

2.4 精密度试验

取浓度均为0.50 μg/mL的4种混标，重复检测7次[6]，计算敌敌畏、甲拌磷、马拉硫磷和毒死蜱的相对标准偏差（RSD/%）为2.30%~3.85%之间，结果见表2，表明精密度良好，满足微量分析的要求。

表2 微量分析表

2.5 准确度（加标回收率）试验

稻谷磨成粉，取6个离心管各加入10 g样品，分别加入浓度均为1.00 mg/mL的4种标准储备液各5 μL 2管、各10 μL 2管和各15 μL 2管[7]，各加入0.5 g中性氧化铝，20 mL二氯甲烷，即得加标浓度分别为0.25 μg/mL、0.50 μg/mL和0.75 μg/mL的4种混标加标浓度，均涡旋1 min，用冷离心机以5 000 r/min离心20 min，用0.22 μm有机相滤膜过滤，测得回收率见表3。

表3 回收率表

按照《实验室质量控制规范 食品理化检测》（GB/T 27404—2008）附录F的要求，回收率应在方法测定限、限量指标中选合适点进行加标回收实验,经多次采用冷热离心机比对、多种过滤方法比对,筛选得此样品前处理方法为最佳方法[8],采用本方法测得的回收率均在80%~110%之间，满足检测方法确认的技术要求。

3 结语

本方法采用涡旋、离心对样品进行前处理，用毛细管色谱柱、带火焰光度检测器FPD的气相色谱法，建立了稻谷中敌敌畏、甲拌磷、马拉硫磷和毒死蜱等农药残留量的检测方法，样品经二氯甲烷提取，气相色谱法进行测定。试验结果表明该方法样品前处理简单，干扰小，灵敏度高，线性良好，检出限低，其精密度、回收率均符合残留量测定的要求，可以有效测定粮食中有机磷的残留量。