昆明部分地区女性HPV 感染情况的调查研究

唐海先 洪颖 周力 满宝华★

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一种双链DNA 环状病毒，具有嗜上皮性，已被确定为宫颈癌（Cervical Cancer，CC）的主要病因，90%以上的宫颈癌与高危型HPV 持续感染相关［1］。HPV感染具有自限性，大多数人能自行清除，但约10%的人会发生持续性的感染，宫颈癌通常伴随持续性高危HPV 感染而发展［2］。目前发现的HPV 亚型有200 多种，与人类疾病相关的有40 多种，根据HPV致病性不同，分为高危型人乳头瘤病毒（high risk human papillomavirus，HR⁃HPV）和低危型人乳头瘤病毒（low risk human papillomavirus，LR⁃HPV），高危型与宫颈癌密切相关，低危型主要引起疣样病变。不同地区和人群HPV 感染率和亚型的流行情况各不相同［3］，HPV 筛查可以了解HPV 的区域流行情况，有助于设计预防CC 的HPV 疫苗，降低宫颈癌发病率和死亡率。本研究对昆明部分地区女性宫颈HPV 感染情况进行分析，以确定HPV 的感染情况、主要流行亚型和不同年龄感染率等情况。现报道如下。

1 材料和方法

1.1 样本来源

选取2015 年1 月至2020 年12 月在昆明市某三甲医院门诊、住院及体检科就诊并进行HPV 检测的女性22 485 例，年龄14～86 岁，平均年龄（38.4±10.0）岁，将受检者按年龄分为≤20 岁、21～岁、31～岁、41～岁、51～岁和≥61 岁共6 个年龄段。提前告知检测项目并自愿参检。由医生用一次性宫颈细胞采集器收集宫颈区域标本，采集的样本分别装入有3 mL 保存液（Hybribio，中国潮州）的专用取样管中，4℃保存，2 周内检测。本研究经医院医学伦理委员会批准通过。

1.2 实验方法

HPV⁃DNA 提取试剂盒、HPV 分型检测试剂盒（PCR+膜杂交法）、HbriMax 医用核酶分子快速杂交仪、一次性宫颈细胞采集器均购自潮州凯普生物化学有限公司。该试剂盒可检测21 种不同的HPV 基因型，包括15 个高危亚型（HPV⁃16、⁃18、⁃31、⁃33、⁃35、⁃39、⁃45、⁃51、⁃52、⁃53、⁃56、⁃58、⁃59、⁃66、⁃68），6 个低危亚型（HPV⁃6、⁃11、⁃42、⁃43、⁃44 和⁃CP8304）。HPV⁃DNA 提取、PCR 扩增、核酸分子快速导流杂交、HPV 显色分型等操作步骤及结果判读均按试剂盒要求进行。扩增仪采用潮州凯普生物化学有限公司提供的东胜龙ETC811 扩增仪。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计软件进行统计分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV 感染情况

去除重复病例及信息不完整病例后，在22 485 份标本中，检出阳性标本3 551 例，HPV 整体感染率为15.79%。在这些阳性病例中，分别有单纯高危亚型、单纯低危亚型、高低危亚型混合感染的患者，其中感染了高危亚型的有3 197例，感染率为14.24%，占阳性例数的90.03%；感染了低危亚型的632 例，感染率为2.81%，占阳性例数的17.80%。

2.2 HPV 亚型检出情况

在21 种HPV 亚型中，15 种高危型及6 种低危型全部检出。HPV 各型别感染情况见表1。排在前5 位的高危型为HPV⁃52、HPV⁃16、HPV⁃58、HPV⁃39 和HPV⁃53。低危型感染中最常见的是HPV⁃CP8304、HPV⁃6、HPV⁃11。

表1 昆明部分地区女性HPV 感染亚型检出情况Table 1 Detection of HPV genotypes in women in some areas of Kunming

2.3 HPV 单一和多重感染情况

检测出一种基因型为HPV 单一型感染，检测出二种、三种及四种HPV 基因型分别为二重、三重、四重感染，以此类推。在3 551 例HPV 阳性女性中，主要以单一感染为主。在多重感染中，二重感染模式最多见，有2 人最多同时最高感染了七种亚型。见图1。

图1 昆明部分地区女性HPV 单一和多重感染检出情况Figure 1 Detection of single and multiple HPV infection in f women in some areas of Kunming

2.4 不同年龄段女性HPV 感染情况

≤20 岁组筛查人数269 例，阳性78 例；21～岁组5 520 例，阳性1 028 例；31～岁组6 604 例，阳性983 例；41～岁组6 400 例，阳性914 例，51～岁2 595 例，阳性374 例；≥61 岁组1 097 例，阳性174 例。对不同年龄组女性感染率进行分析，≤20 岁组感染率最高，其次为21～岁组，第三为≥61岁；不同年龄组感染率比较，差异有统计学意义（χ2=87.32，P<0.05）。在多重感染中，≤20 岁年龄组感染率最高，其次为21～岁和≥61 岁年龄组；不同年龄组多重感染率比较差异有统计学意义（χ2=26.54，P<0.05）。在感染2 种以上高危HPV 的人群中，排在前三的是≤20 岁、≥61 岁年及21～岁；不同年龄组2 种以上高危型HPV 检出率比较，差异具有统计学意义（χ2=21.21，P<0.05）。不同年龄组HPV 感染趋势见图2。

2.5 HPV 各年感染率

2015—2020 年HPV 感染率呈逐渐下降趋势。各年感染率比较差异具有统计学意义（χ2=79.67，P<0.05）。2015—2020 年HPV 感染率见图3。

图3 2015—2020 年昆明部分地区女性HPV 感染率Figure 3 HPV infection rate of women in some areas of Kunming from 2015 to 2020

3 讨论

在本次调查中，昆明市部分地区女性HPV 总感染率为15.79%，高危型HPV 阳性率最高的3 种亚型依次为HPV⁃52、⁃16、⁃58，与曹杰贤等［4］的结果基本一致。但低危型感染中，本次调查排在前2位分别的是HPV⁃CP8304 和HPV⁃6，而曹杰贤等的研究发现，低危型HPV 感染中排在前2 位的为HPV⁃42、⁃43，可能与调查地区、调查对象不同有关。重庆HPV 感染率为19.9%，最常见的3 种亚型为HPV⁃52、HPV⁃16 和HPV⁃58［5］。杭州市上城区女性HPV 感染率22.41%，最常见的HR⁃HPV 基因型分别为16、52、18、58、56 和51［6］。马来西亚女性HPV 感染率为14.0%，最常见的高危型分别为HPV⁃52、66、33、39 和58，而低危型分别为HPV⁃6、40 和81［7］。土耳其伊斯坦布尔HPV 检出率为36.3%，最常见的HR⁃HPV 基因型分别为HPV16、39 和51［8］。在不同地区，HPV 感染率及主要基因型不尽相同，可能与各地区不同调查对象和方法及不同地区经济发展、健康意识、生活习惯不同等因素相关。

本次调查发现，昆明部分地区女性HPV 感染以单一型、高危型感染为主，在多重感染中，二重感染最多见，最高的多重感染为七重感染。Kim等［9］对多重HPV 感染病例和单一型HPV 感染病例进行比较，发现多重HPV 感染与高级别HSIL（high⁃grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）的相关性显著强于单一HPV 感染，与单一HPV 感染患者相比，多重HPV 感染患者表现出持续感染和更长时间的HPV 感染。而Iacobone 等［10］发现HPV 多重感染并不增加HSIL 风险，单一HPV 感染在HSIL 中普遍存在。陈婷婷等［11］的研究发现，HPV 多重感染并未增加宫颈癌的发生风险，多重感染随着宫颈病变严重程度的增加而减少。研究者可进一步调查单一HPV 感染和多重HPV 感染患者宫颈细胞学检查及HPV 持续感染等情况，了解不同感染模式对女性宫颈病变的影响，为临床治疗提供更多依据。

HPV 感染表现出年龄相关的差异，在不同年龄段女性中，≤20 岁女性的感染率最高，其次为21～岁女性，第三为≥61 岁女性，与相关报道结果相似［12⁃14］。≤20 岁女性的感染率最高，可能与以下因素有关：≤20 岁年轻女性缺乏自我保护意识，且对HPV、HPV 疫苗、宫颈癌等的认知程度较低，其次这一年龄段女性主动就医者较少，纳入样本数相对较少，可能导致结果偏倚。其次为21～岁女性，该年龄段女性为性活跃的年轻个体，感染HPV 的可能性较高。第三为≥61 岁女性，该年龄段女性性激素水平随年龄增加发生改变，机体免疫功能降低，使病毒易感性增加或潜伏病毒再活化，导致感染率增高。虽然31～岁、41～岁、51～岁年龄组感染率相对较低，但这三组人群人数最多，阳性病例也占最多，因此更要关注该年龄段女性HPV 的筛查。

本次调查显示，HPV 感染率正逐步下降，与Luo 等［12］及Wang 等［13］的结果相似。Luo 等［12］对郴州市第一人民医院2012—2018 年妇科及体检中心就诊并进行HPV 检测的女性进行分析，发现女性HPV 感染率呈下降趋势。Wang 等［13］对河南洛阳2015—2021 年女性HPV 感染情况进行分析，发现HPV 总体感染率、高危型、低危型、单一、多重感染率均逐渐下降。HPV 感染率逐渐下降考虑与HPV疫苗的应用以及经济社会发展、人们健康意识增强等有关。

综上所述，目前昆明部分地区女性HPV 感染主要流行亚型与国内外不同地区流行亚型不完全相同。虽然HPV 感染率在逐渐下降，但目前上市的HPV 二价、四价、九价疫苗并未全覆盖这些最常见感染亚型，未来需要进行更多的研究对区域性HPV 亚型和感染情况进行统计分析，以研发适用的HPV 疫苗。目前HPV 筛查仍是防治宫颈癌最经济、高效的方法，对适龄女性应定期筛查，早发现、早治疗，方能降低宫颈癌发病率和死亡率、提高女性健康。