EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分预测CRSw NP 患者术后复发的可行性

李文杰 王亮 马庆林

慢性鼻窦炎伴鼻息肉（Chronic sinusitis with nasal polyps，CRSwNP）是以鼻塞、嗅觉障碍、头痛等为主要症状的一种鼻腔、鼻窦黏膜炎症性疾病［1］。对于药物治疗无效的CRSwNP 患者多采用鼻内镜手术，虽具有一定疗效，但术后炎症转归时间较长，准确预测CRSw NP 患者术后复发率，对评估其预后具有重要意义［2］。研究发现，CRSwNP患者病变组织中长伴有嗜酸性粒细胞（Eosino⁃phils，EOS），CRSwNP 发病后会大量释放EOS 并浸润至鼻黏膜上皮，其在血清中的含量是评估CRSwNP 病情的重要指标之一［3］。白细胞介素⁃5（Interleukin⁃5，IL⁃5）是由活化的Th2 细胞产生的细胞因子，IL⁃5及其受体白介素5 受体α（Interleukin 5 receptorα，IL⁃5Rα）在EOS 生长及分化过程中发挥重要作用［4］。鼻窦CT 评分是临床诊断鼻窦炎分型的重要依据，亦是评估鼻窦炎病情的重要手段之一。目前鲜少研究探讨鼻息肉组织中的EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα及鼻窦CT 评分在预测CRSw NP 患者术后复发方面的作用。为此，本研究进行了相关探究，报道内容如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年12 月至2021 年10 月安阳市人民医院收治的102 例经鼻内镜手术治疗的CRSwNP患者进行分析。纳入标准：①均符合CRSwNP 相关诊断标准［5］；②年龄20～65 岁，病程>6 个月，且经保守治疗效果不佳，症状加重需手术治疗者；③病例资料齐全，首次接受鼻内镜治疗鼻息肉；④患者自愿参与本研究，且签署同意书。排除标准：①存在放疗、化疗等治疗病史；②伴鼻咽部恶性肿瘤者；③伴精神异常、认知功能障碍等；④近期内有心脏病、脑血管疾病等病史。根据患者术后是否复发进行分组，其中术后12 个月内复发患者36 例（复发组），未复发患者66 例（未复发组）。复发组男20例，女16 例，年龄20～65 岁，平均（45.16±8.12）岁。未复发组男47 例，女19 例，年龄20～64 岁，平均（44.54±7.56）岁。两组资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经院医学伦理委员会批准通过。

1.2 方法

1.2.1 资料收集

收集两组病程、体重指数、吸烟史、合并症等基线临床资料。

1.2.2 EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα检测

于术中取患者鼻息肉组织分为两等份，一份固定于4%甲醛溶液中石蜡包埋，并切成5 μm 的石蜡薄片行HE 染色。在×400 高倍视野下，任意读取黏膜固有层细胞浸润区域中10 个HPF，计算EOS。另一份鼻息肉组织进行充分研磨后加入Trizol 裂解液充分裂解细胞，置于EP 管中，加入200 μL 氯仿震荡20 s，取上层置于另一EP 管中，加入300 μL 异丙醇后以3 500 r/min 离心20 min，随后留取沉淀，用乙醇洗涤干燥，利用15 μL DEPC 水溶解RNA。采用逆转录试剂盒逆转录为cDNA，RT⁃PCR 技术检测IL⁃5、IL⁃5Rα。IL⁃5引物序列：上游：5′⁃ATGCTTCTGCATTTGAGT⁃3′，下游：5′⁃ATTCTAGTTGTGGTTTGT⁃3′，IL⁃5Rα引物序列：上游：5′⁃CTGTAGCCAAACAAGGCACA⁃3′，下 游：5′⁃ACTCCCAACAACCAAACTGC⁃ 3′ 。PCR 反应条件：94℃45 s，55℃30 s，70℃25 s，连续36 个循环，每个样本均设置3 个反应复孔。凝胶电泳PCR 反应产物后，采用图像分析软件分析IL⁃5、IL⁃5Rα表达。

1.2.3 鼻窦CT 评分

两组患者均于术前行鼻窦CT 检查，按Lund⁃Mackay［6］评估方法对术前鼻窦CT 进行分级。评估范围包括上颌窦、前组筛窦、后组筛窦、蝶窦、额窦及窦口鼻道复合体，评分标准：鼻窦无异常为0，部分浑浊为1，全部浑浊为2；窦口鼻窦复合体无阻塞为0，阻塞为2。每侧12 分，共计24 分。CT 评分由同一名影像科技师独立完成，得分越高表示严重程度越高。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18.0 统计软件进行统计分析，计量资料采用（）描述，采用t检验；计数资料采用n（%）表示，组间对比采用χ2检验；多因素Logistic回归分析影响CRSw NP 患者术后复发的危险因素；ROC 曲线分析EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα及鼻窦CT 评分对CRSw NP 患者术后复发的预测价值；以P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分比较

复发组鼻息肉组织中EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα水平及鼻窦CT 评分均高于未复发组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分比较（）Table 1 Comparison of EOS，IL⁃5，IL⁃5Rα And sinus CT score between the two groups（）

表1 两组EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分比较（）Table 1 Comparison of EOS，IL⁃5，IL⁃5Rα And sinus CT score between the two groups（）

2.2 两组患者临床资料比较

复发组前期鼻窦炎手术史患者占比明显高于未复发组，差异有统计学意义（P<0.05），两组在年龄、体重指数、病程、白细胞计数、性别、吸烟史、合并高血压、糖尿病及激素类药物服用史方面比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2 两组患者临床资料比较［（），n（%）］Table 2 Comparison of clinical data between the two groups［（），n（%）］

表2 两组患者临床资料比较［（），n（%）］Table 2 Comparison of clinical data between the two groups［（），n（%）］

2.3 Logistic 回归分析影响CRSw NP 患者术后复发的危险因素

以CRSw NP 术后复发（未复发组=0，复发组=1）作为因变量，将上述有统计学差异的因素EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα水平、鼻窦CT 评分及前期鼻窦炎手术史（0=无，1=有）作为自变量，纳入Logistic 回归分析模型。Logistic 回归分析结果显示，EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα水平、鼻窦CT 评分及前期鼻窦炎手术史均是影响CRSw NP 患者术后复发的确定性因素（P<0.05）。见表3。

表3 影响CRSw NP 患者术后复发的多因素分析Table 3 Multivariate analysis of factors influencing postoperative recurrence of CRSw NP patients

2.4 EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分对CRSw NP 患者术后复发的预测价值

ROC 结果显示，EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα及鼻窦CT评分单项检测曲线下面积（AUC）分别为0.785、0.808、0.813、0.821，均明显低于四者联合预测（EOS+IL⁃5+IL⁃5Rα+鼻窦CT 评分）的0.826。见表4、图1。

图1 ROC 曲线图Figure 1 ROC curve

表4 EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分对CRSw NP 患者术后复发的预测价值Table 4 The predictive value of EOS，IL⁃5，IL⁃5Rα and nasal sinus CT score on postoperative recurrence in patients with CRSw NP

3 讨论

CRSw NP 是临床耳鼻咽喉科较为常见的疾病，若不及时治疗可导致患者下呼吸道感染，影响肺通气功能，病情严重者可危及生命安全［7］。鼻内镜下鼻窦开放手术是临床目前治疗CRSw NP 患者常见的微创手术，经置入鼻内镜，术者可直视鼻窦与鼻腔结构，有效避免了传统开放性手术对鼻窦、鼻腔造成的损伤，且更有助于鼻粘膜重建［8⁃9］。鼻内镜微创手术具有创伤小、患者术后易恢复等优势，但无法直接治愈疾病，且术后创伤愈合时间较长，患者复发率仍高居不下［10］。故准确预测CRSw NP 患者术后复发情况，对于患者预后评估及疾病进一步的治疗尤其重要。

CRSw NP 发生与慢性病原微生物感染、慢性骨质炎症等存在紧密联系，但有关其发病机制尚未明确。近年来相关报道发现，CRSw NP 发生与EOS 浸润密切相关。EOS 是白细胞的重要成分，可释放多种细胞内容物，具有杀伤细菌、寄生虫的作用［11⁃12］。在CRSw NP 中EOS 可因炎症反应而大量释放，损伤鼻黏膜，诱发鼻黏膜上皮增厚及鳞状上皮化生，导致CRSw NP 复发［13］。何腾等［14］指出，T 细胞介导的免疫反应与CRSw NP 发病、进展关系密切。IL⁃5是由T2 细胞产生的细胞因子，IL⁃5Rα是IL⁃5受体的重要亚型之一，IL⁃5可通过与EOS 表面IL⁃5Rα受体结合而参与EOS 生长、分化过程，与EOS 参与Th2 细胞免疫存在一定关系。鼻窦CT Land⁃Mackay 评分法是在鼻窦CT 检查的基础上，通过对上颌窦、前组筛窦、后组筛窦及窦口鼻道复合体等各部位的CT 显像进行量化评分，从而评估鼻窦病情严重程度，其在多种疾病鼻窦的诊疗过程中均具有着明确的诊断价值。一般认为鼻窦CT 总分代表了疾病的严重程度，评分越高，病情越重，鼻息肉术后复发的比例亦越高。最近报道发现，鼻窦CT 评分总分>15 分时，预测CRSw NP 复发的特异性可高达87.25%［15］。本研究中，与未复发组比较，复发组鼻息肉组织中EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα水平及鼻窦CT 评分更高，差异有统计学意义，且经Logistic 回归分析发现上述指标均是影响CRSw NP 患者术后复发的独立危险因素。究其原因可能是，EOS 会经Th2 细胞所产生的IL⁃5趋化而活化迁徙到炎性组织，导致患者炎症程度增加，诱发CRSw NP 在术后复发；同时活化后的EOS 会进一步释放IL⁃5、IL⁃5Rα 等因子，趋化更多以EOS 为主的炎性因子浸润，使患者在术后仍存在一定复发倾向。此外，本研究经ROC曲线分析发现，EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα及鼻窦CT 评分对CRSw NP 患者术后复发具有一定预测价值，且上述指标联合检测的AUC 更高，提示EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα 及鼻窦CT 评分可作为CRSw NP 患者术后复发的预测指标，且联合检测效能更佳。

综上所述，EOS、IL⁃5、IL⁃5Rα及鼻窦CT 评分是引发CRSw NP 患者术后复发的相关因素，可作为预测CRSw NP 患者术后复发的相关可靠指标。