血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与输注效果的相关性

2023-07-01彭丹黎欢彭涛甘新宇杨俊龙刘丽萍李恒周倩羽

分子诊断与治疗杂志 2023年5期

彭丹黎欢彭涛甘新宇杨俊龙刘丽萍李恒周倩羽

血小板输注是临床预防和治疗各种血小板数量减少疾病或血小板功能障碍疾病的主要手段，可以用于恢复和维持机体的止血、凝血功能。随着输血医学的快速发展，血小板输注的重要性已经得到了普遍认可［1］。但血小板输注过程中会有部分患者出现血小板输注无效（Platelet transfusion refractoriness，PTR）现象，PTR 是指患者输注的血小板受到破坏，外周血血小板计数（platelet count，PLT）未能有效增加，从而未能改善因血小板数量减或血小板功能障碍引起的出血。目前PTR 发生率正在日益增高，如何预防PTR 已经成为了当前研究重点［2⁃3］。有报道指出［4⁃5］，部分PTR 是由免疫因素引起，血小板抗体作为最重要的免疫因素受到临床广泛关注，其中80%以上的PTR 是由人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）⁃Ⅰ类抗体的同种免疫引起的。临床主要使用输注后校正血小板增高指数（corrected count increment，CCI）和血小板回收率（percentage platelet recovery，PPR）来评价血小板输注效果，积极了解HLA⁃Ⅰ类抗体与血小板输注效果的相关性对PTR 的预防至关重要。因此，本研究以PTR 患者为研究对象，探究HLA⁃Ⅰ类抗体与输注效果的相关性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2021 年10 月至2022 年10 月期间于西部战区总医院接受血小板输注的PTR 患者，纳入标准：①年龄≥18 岁；②患者因血小板数量减少或功能障碍需反复多次输注血小板；③符合PTR 诊断标准［6］：临床出血未改善，PLT 未能有效增加甚至下降，1 h、24 h CCI 小于7.5、4.5，1 h、24 h PPR 小于30%、20%；④均接受ABO 同型血小板输注；⑤不存在影响血小板输注的非免疫因素。排除标准：①合并血液系统疾病、感染性疾病、恶性肿瘤者；②精神异常，难以配合输注；③临床病历资料不全者。共纳入62 例PTR 患者为PTR 组，选取60 例血小板输注有效患者为对照组。PTR 组男性33例，女性29 例；年龄19～68 岁，平均年龄（48.72±6.24）岁；血型：A 型24 例、B 型12 例、O 型23 例、AB型3 例。对照组男性31 例，女性29 例；年龄22～69岁，平均年龄（50.15±7.58）岁；血型：A 型22 例、B 型13 例、O 型21 例、AB 型4 例。两组一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者已签署知情同意书。

1.2 血小板输注方法

血小板输注输注遵循临床输血技术规范［7］，血液由本院所属采供血机构提供，输注血型相同的血小板，使用白细胞滤器去除成分血液中的白细胞，单次输注1 个治疗量血小板，约300 mL，20 min内输完。

1.3 血小板HLA⁃Ⅰ类抗体检测

输注前采集患者空腹静脉血2 mL，EDTA 抗凝，经3 000 rpm 离心5 min，取上清进行检测。使用由长春博讯生物科技有限公司提供的HLA 检测试剂盒，采用固相凝集法检测血小板HLA⁃Ⅰ抗体。严格遵循说明书进行操作。

1.4 血小板输注效果评价

使用CCI 和PPR 评价血小板输注效果，CCI=（输注后PLT⁃输注前PLT）（×109/L）×体表面积（m2）/输注的血小板总数（×1011），PPR（%）=（输注后PLT⁃输注前PLT）（×109/L）×血容量（mL）/输注的PLT（×1011）×2/3。

1.5 观察指标

比较两组HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率，比较两组输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR，分析血小板HLA⁃Ⅰ类抗体对PTR 的预测效果，并分析HLA⁃Ⅰ类抗体和CCI、PPR 的相关性。

1.6 统计学方法

使用SPSS 26.0 统计软件进行数据统计分析，计量资料使用（）表示，组间比较采用独立t检验，组内比较采用配对t检验；计数资料使用n或%表示，组间比较采用χ2检验。以曲线下面积（AUC）评价预测价值。相关性分析使用Spearman相关系数。以P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率比较

PTR 组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率比较Table 1 Comparison of the positive detection rate of platelet HLA class I antibody between the two groups

2.2 两组输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR 比较

PTR 组输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR 均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 两组1 h、24 h 的CCI 和PPR 比较（）Table 2 Comparison of CCI and PPR between the two groups at 1 h and 24 h（）

注：与同组输注后1 h 比较，aP<0.05。

2.3 血小板HLA⁃Ⅰ类抗体对PTR 的预测价值

血小板HLA⁃Ⅰ类抗体预测PTR 的AUC 为0.815（95%CI：0.735～0.880），Youden 指数为0.630，敏感度、特异度为85.45%、77.61%。见图1。

图1 ROC 曲线Figure 1 ROC curve

2.4 血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与CCI、PPR 的相关性

Spearman 相关检验结果显示，血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR 均呈负相关（P<0.05）。见表3。

表3 血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与CCI、PPR 的相关性Table Correlation between platelet HLA class I antibody and CCI and PPR

3 讨论

近年来随着现代输血学的不断发展，成分输血被不断应用于各类临床输血中，成分输血制剂容量小、纯度高、疗效佳、利于保存，是现代医疗的重要治疗措施。血小板输注是成分输血的主要种类，常用于血小板数量减少或功能障碍患者，目前已经成为临床主要输血方式。但研究指出，血小板输注患者会发生PTR，导致输注效果不佳，继而影响预后，因此PTR 是临床治疗面临的一大难题［8⁃10］。免疫因素和非免疫因素是引起PTR 的两大因素，非免疫性因素包括血小板质量、发热感染、肝功能不全、静脉闭塞等，而免疫因素主要包括ABO 血型不合、血小板抗原、血浆蛋白同种免疫等［11］。既往研究［12］证实，血液制剂成分是导致PTR 发生的重要因素，尤其是含有白细胞的混合血液成分，更易产生抗体，导致PTR 发生，另外据报道［13］，血小板输注患者抗体阳性率越来越高，其中以血小板HLA⁃Ⅰ同种免疫为主。HLA 是人体内重要的具有高度多态性的同种异体抗原，主要编码人主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC），而MHC与机体免疫调节、免疫应答密切相关，因此推测血小板HLA⁃Ⅰ类抗体是可能引起PTR的主要原因。

陈扬凯等［14］对广州地区各医院的245 份PTR送检标本进行检测，发现血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率85.30%（209/245），证实了血小板HLA⁃Ⅰ类抗体是引起PTR 的主要原因。张忠印等［15］也指出HLA⁃Ⅰ类抗体是影响PTR 发生的独立危险因素。本研结果显示，PTR 组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率为75.81%，对照组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率为13.33%，PTR 组血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率高于对照组，差异有统计学意义，CCI 和PPR 是反映输注效果的直接指标，CCI 根据体表面积进行换算，PPR 根据血容量进行换算，这两个指标可以最大限度地减少了患者个体差异影响，评价效果更精确客观，报道指出CCI、PPR 越大血小板输注效果越好［16］。本研究结果显示，PTR组输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR 均低于对照组，差异有统计学意义，与既往研究［17］相符。另外本研究还发现，血小板HLA⁃Ⅰ类抗体预测PTR 的AUC 为0.815（95%CI：0.735～0.880），敏感度、特异度为85.45%、77.61%，AUC 高于张忠印等［15］的0.726，侧面暗示了血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率正在不断升高，因此提高了预测敏感度。进一步经Spearman 相关检验显示，血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR 均呈负相关，提示了随着血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率增加，CCI 和PPR 会随之降低。目前PTR 在我国仍是临床输血难题，本研究提示对存在免疫性因素的血小板输注患者进行血小板HLA⁃Ⅰ类抗体检测可以降低PTR 发生率。对于存在HLA⁃Ⅰ类抗体同种免疫的患者，临床对存在选择HLA⁃Ⅰ类抗体的患者采取的措施主要是选择HLA⁃I 类抗原缺失进行血小板输注，这是行之有效的对应方案［17］。

综上所述，PTR 患者血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性检出率较高，或可以预测PTR 发生发展，且血小板HLA⁃Ⅰ类抗体与输注后1 h、24 h 的CCI 和PPR均呈负相关，对血小板HLA⁃Ⅰ类抗体阳性表达患者采取对应措施有望降低PPR 发生率。