微生物检验小知识

何源

微生物是指肉眼难以看清，需要借助光学显微镜或电子显微镜才能观察到的一切微小生物，主要有细菌、真菌、霉菌、衣原体、支原体等。

什么是微生物检验

微生物检验是一种从人体中或一些产品当中提取样本，并检测其中可能存在的微生物类型与含量的检验方法。微生物在人们的日常生活中扮演着非常重要的角色，有的对人类有益，但有的对人类有害。只有借助科学有效的微生物检验，才能更好地判断出对人体有害的微生物，并且采取积极有效的应对措施。

微生物检验的具体步骤

取样

在微生物检验过程中，工作人员首先需采集检验样品。其中，对人体微生物检验相对简单，只需从患者身上获取样本即可；对产品样本的采集则相对复杂，样本不仅需要具备对整体的代表性，且要对取样用到的取样筐、取样勺等工具使用酒精进行喷洒或擦拭消毒，必要时使用紫外线灯进行进一步消毒处理。工作人员在取样前要做好手部清洁工作，在取样完成后立即送达要求的区域，将获取的样品放入工作台，准备进行微生物培养与检验。

接种

在获取样本后，工作人员需要将其中的微生物移植到适合生长的人工培养基或活生物体内，这一过程被称为接种。常用的接种工具有接种针、接种环、玻璃涂棒、小解剖刀等。接种方式有划线接种、三点接种与穿刺接种等。其中，划线接种是最常用的接种方式，主要使用接种环、接种针等在固体培养基的表面进行来回直线型移动接种；三点接种常用在霉菌接种与研究上，使用装置将少量的微生物呈等边三角形分布接种；穿刺接种则是研究微生物动力或培养厌氧菌时常用的接种方法，即使用接种针蘸取少量的菌种，在半固体培养基中做直线穿刺接种。需要注意的是，所有的接种都必须保持无菌操作模式，培养基需要经过高压灭菌，接种的过程也需要在无菌环境下使用经过灭菌处理的工具进行接种。

分离纯化

通常情况下，人们获取的样本当中不只含有一种类型的微生物。但在进行微生物鉴定时，所需要的微生物一般要求为纯培养物，因此在培养前还需要对其进行分离纯化。通常情况下，微生物分离纯化的方式有倾注法、涂布法等。其中，倾注法指的是将微生物悬液进行稀释，并与40℃～50℃的营养琼脂混合，之后倾注到无菌培养皿中，等到含菌琼脂凝固后倒置，使单一细胞经过多次增殖后形成菌落，最后去单个菌落，重复上述步骤得到纯培养物。涂布法则是将微生物悬液稀释，后在已经凝固的无菌营养琼脂上使用无菌玻璃刮刀对其进行均匀涂布，最终在恒温培养下得到单个菌落。

微生物培养

在获取纯培养物后，工作人员就可以对微生物进行培养。在此过程中，根据微生物培养时是否需要氧气，可以将培养方法分为好氧培养与厌氧培养两类。其中，好氧培养又称“好气培养”，这种微生物在培养时需要加入氧气，否则就无法正常生长。一般需要使用棉花塞过滤获取无菌空气，或是借助摇床震荡来使空气进入培养瓶中；厌氧培养则需要清除培养基当中的氧气。根据培养基状态，又可以分为固体培养与液体培养两类。其中，固体培养指的是在疏松且有营养的固土培养基中进行微生物培养；液体培养是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，使微生物均匀地在液体培养基中生长繁殖的一种培养方法。

微生物鑒定

在完成微生物培养后，工作人员需要对微生物进行形态观察、生化实验、化学成分分析、基因型分析以及系统发育分析等五个方面的鉴定。其中，形态观察指对微生物进行染色，后使用显微镜对其细胞的形状、大小、排列以及细胞结构等进行分析，进而根据微生物形态结构上的差异做出鉴定；生化实验分为糖酵解实验、淀粉水解实验等，能够帮助工作人员有效判定微生物各方面能力；化学成分分析可以帮助工作人员判断微生物属于放线菌还是其他细菌等。通过完善的微生物鉴定，工作人员可以有效判断出微生物可能造成的影响，及时采取针对性的应对措施。

微生物保存

在微生物鉴定完成后，工作人员还需要对微生物样本进行保存，使其在一定时间内具备菌种原本的优良特性。常用的保存方法有定期移植法、液体石蜡法、零下80℃低温冻结法等。其中，定期移植法是定期将菌种重新在适宜的培养基上接种并培养的保存方法，属于一种常用的短期保存方法；液体石蜡法指的是在菌种培养基当中注入灭菌的液体石蜡覆盖整个培养基表面，使微生物在隔绝的环境下保存。只有严格遵循“真空、冷冻、干燥”的三大微生物保存原则，才能更有效地保持微生物样本的质量。

微生物检验如何控制质量

在微生物检验过程中，检验质量的控制指的是使微生物从样本采集到完成鉴定的全过程当中，隔绝外来微生物对样本的污染，确保微生物检验的结果准确无误。通常情况下，微生物检验的质量控制方式分为外部质量控制与内部质量控制两种。其中，外部质量控制指的是将实验室检验完成后获取的微生物质量检验结果与其他实验室在相同环境下相同微生物检验的结果进行对比，根据微生物质量检测结果的误差判断微生物检验工作的质量。需要注意的是，这种质量控制方法有时会受到不同实验室当中设备、环境等因素的影响，导致微生物检验质量难以控制在一定的标准内。

内部质量控制又被称作控制变量法，包括使用不同分析设备检验、不同操作人员检验、不同样本检验以及不同检测溶液检验等，借助对上述可能影响检验结果的变量更换来确定微生物检验过程当中究竟是哪一个环节发生问题与误差，从而使微生物检验的结果更加真实有效。

结语

微生物在日常生活当中无处不在，与人们的身体健康有着密切关系。只有对微生物采取适当的检验分析措施，并针对不同微生物的特点采取适当的应对方法，才能更好地利用微生物改善人们的生活质量。