血清sErbB3、HSP70水平对肝癌患者化疗后预后及生存期的评估价值

孙勤波 郑现成 钱 程

原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)是临床常见恶性肿瘤疾病之一,具有病情进展快、恶性程度高等特点,多数患者就诊时已处于疾病中晚期,不利于患者治疗后的预后生存[1],因此探讨PLC早期诊断及预后预测方法的相关研究具有极其重要的意义。人类表皮生长因子受体3(epidermal growth factor receptor 3,EGFR3/ErbB3)是酪氨酸激酶受体家族成员,与肝细胞癌的增殖、迁移及侵袭能力密切相关[2]。已有研究[3]表明,分泌型ErbB3(secreted epidermal growth factor receptor 3,sErbB3)是诊断肝癌的潜在血清标志物。而热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)属于HSP家族,可维持细胞蛋白稳定,调控细胞增殖过程,同时对原癌基因及抑癌基因均有影响,在肝癌细胞的基因调控过程中具有重要作用[4]。本研究通过检测PLC患者血清中sErbB3、HSP70水平,以探究其与临床病理特征、患者预后之间的关系,并评估其在PLC患者化疗后预后预测中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析本院2015年1月至2018年1月收治的符合纳入标准的62例PLC患者的临床资料,并将其设置为观察组(n=62),其中男性38例、女性24例;年龄38～72岁,平均(51.47±6.38)岁。另回顾性分析同期在本院体检的50例健康受试者的临床资料,将其设置为对照组(n=50),其中男性28例、女性22例;年龄37～70岁,平均(50.86±6.12)岁。2组基线资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组基线资料比较

1.2 PLC患者的纳入及排除标准

纳入标准:①患者均符合《原发性肝癌诊疗规范(2019版)》[5]:经临床、影像学、甲胎蛋白或肝穿刺病理学诊断为PLC,均行TACE治疗;②临床病历资料齐全者;③患者及其家属均知情同意且签订同意书。排除标准:①肝肿瘤转移者;②肝功能Child Pugh分级为C级者;③合并血液系统、自身免疫性疾病者;④合并脏器功能衰竭者;⑤表达障碍或无法配合研究者。

1.3 方法

血清sErbB3、HSP70水平检测:对照组取当日体检外周静脉血5 mL,观察组取化疗后清晨空腹静脉血5 mL,离心后取上层清液,置于冰箱冷冻待检。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中sErbB3、HSP70水平,试剂盒选自上海酶联生物科技有限公司,操作步骤按照说明书进行。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 2组血清中sErbB3、HSP70水平

与健康受试者比较,PLC患者血清中sErbB3,HSP70水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组血清中sErbB3,HSP70水平比较

2.2 PLC患者血清中sErbB3、HSP70水平与临床病理特征的关系

PLC患者血清中sErbB3水平与年龄、性别、肝硬化、门静脉癌栓等无关,差异无统计学意义(P>0.05);与肿瘤直径、肿瘤数目、TNM分期等相关,差异有统计学意义(P<0.05)。PLC患者血清中HSP70水平与年龄、性别、肝硬化等无关,差异无统计学意义(P>0.05);与肿瘤直径、肿瘤数目、门静脉癌栓、TNM分期等相关,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 PLC患者血清中sErbB3,HSP70水平与临床病理特征的关系

2.3 血清中sErbB3、HSP70水平与PLC患者预后的关系

以sErbB3水平均值(3165.47)为界,将PLC患者分为sErbB3高水平组(n=29)和sErbB3低水平组(n=33),sErbB3高水平组化疗后平均生存时间为(28.76±4.72)个月,sErbB3低水平组化疗后平均生存时间为(32.31±3.52)个月,差异有统计学意义(t=3.382,P<0.05)。以HSP70水平均值(84.39)为界,将PLC患者分为HSP70高水平组(n=30)和HSP70低水平组(n=32),结果显示,HSP70高水平组化疗后平均生存时间(29.45±4.26)个月,HSP70低水平组化疗后平均生存时间为(31.97±3.74)个月,差异有统计学意义(t=2.479,P<0.05)。

2.4 sErbB3、HSP70水平联合应用对肝癌患者预后的预测价值

ROC结果显示,sErbB3、HSP70水平联合诊断的灵敏度和特异度分别为80.00%(28/35)和74.07%(20/27)。见表4。

表4 sErbB3,HSP70水平联合应用对肝癌患者预后的预测价值

2.5 Cox回归模型分析PLC患者预后的影响因素

建立Cox比例回归模型,因变量为患者预后情况,选择肿瘤直径、肿瘤数目、TNM分期、sErbB3高水平、HSP70高水平等5个指标为自变量,回归过程采用逐步后退法,以行自变量的选择和剔除,设定α=0.10,α入选=0.05。见表5。结果显示,肿瘤多发、TNM高分期、sErbB3高水平、HSP70高水平是PLC患者预后的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05)。见表6。

表5 赋值

表6 PLC患者预后影响因素的分析结果

3 讨论

PLC是一类进展迅速的恶性肿瘤,在疾病早期临床症状不明显,但随病情发展,则会并发多种感染疾病,严重威胁患者生命安全,部分患者经切除术后仍具有较高的复发率,对患者预后造成不利影响[6]。sErbB3基因位于12号染色体长臂,是人类表皮生长因子受体家族成员,主要负责细胞外信号传导以及细胞内下游信号传导,在生理条件下是细胞生长调节因子,当肿瘤细胞异常表达时,ErbB3异常激活参与细胞增殖、分化的调控,在恶性肿瘤疾病中起到重要作用[7-8]。ErbB3还可激活PI3K/AKT、Jak/Stat等信号通路,促进肿瘤发生[9]。HSP70是高度保守蛋白,可在细胞凋亡及增殖过程中参与调控,通常处于低水平状态,在癌症组织中高表达[10],丁莉利等[11]研究中高分化肝细胞癌HSP70的表达率高达83.3%。本研究中,观察组血清中sErbB3,HSP70水平较健康人群呈上升趋势,ROC结果显示,血清sErbB3,HSP70单独及联合预测肝癌患者预后不良的AUC分别为0.779、0.725、0.812,表明联合检测预测预后不良的价值优于两者单独检测。

Masroor等[12-13]研究表明,ErbB3蛋白表达同时,细胞可以分泌可溶性的sErbB3,sErbB3在乳腺癌患者以及肺癌患者血清中均呈现高表达,可用作癌症早期诊断的标志物。本研究结果显示,PLC患者血清中sErbB3水平较高,且与肿瘤直径、肿瘤数目、TNM分期等相关,sErbB3高水平组化疗后平均生存时间为(28.76±4.72)个月,sErbB3低水平组化疗后平均生存时间为(32.31±3.52)个月,差异有统计学意义,证实sErbB3高水平可诱发肝癌患者预后不良,促进肿瘤再发生[14]。且经Cox回归模型显示sErbB3高水平可作为肝癌患者预后的检测指标。相关研究[15]表示,细胞外HSP70肽复合物能够通过P13K/AKT调控缺氧诱导因子,促进人体肝癌HepG2细胞发生上皮-间充质转化,从而参与肿瘤发生。本研究显示肝癌患者HSP70水平较高,且与肿瘤直径、肿瘤数目、门静脉癌栓、TNM分期等相关,且与HSP70低水平组相比,HSP70高水平组生存时间较短,提示HSP70可用作肿瘤标志物,在临床预后方面可以考虑降低HSP70表达抑制肿瘤发生,改善患者预后[16]。

综上所述,PLC患者血清中sErbB3和HSP70表达水平显著升高,且与预后情况以及临床病理特征密切相关,sErbB3高水平、HSP70高水平均是患者预后的独立危险因素,检测sErbB3和HSP70有助于PLC患者的预后预测。