滑液囊支原体病的研究进展

王柏林, 周 怡, 程振涛

(1. 贵州省开阳县农业农村局,贵州 开阳 550300; 2. 贵州大学动物科学学院,贵州 贵阳 550025; 3. 贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室,贵州 贵阳 550025)

1 病原特点

滑液囊支原体(Mycoplasmasynoviae,MS)的直径为100～400 nm,在改良Frey氏支原体固体培养基中菌落呈中央凸起的圆形“煎蛋状”,经瑞氏染色可见细小的球形或椭圆形菌体[1,2]。MS无细胞壁,对外界环境较敏感,多种药物可抑制其生长或将其杀死,对酸性环境特别敏感,pH值低于6.8易失活[3]。温度高于39 ℃时生长受限,-80 ℃以下可存活1年以上,常温干燥环境仅能存活几小时,支原体冻干粉可保持活性10年以上[4]。

2 流行病学

滑液囊支原体病是由MS引起家禽滑膜炎、腱鞘炎和滑囊炎的总称。近年来,国内外均有感染报道,给养禽业造成巨大经济损失。该病一年四季均可发生,冬、春两季易发,鸡、火鸡、珍珠鸡易感,雏鸡感染症状较严重,随着年龄的增长抵抗力增强[5,6]。病禽和隐性感染禽是主要传染源,可水平或垂直传播[7]。该病的潜伏期受致病菌数量、菌株毒力、环境等多种因素影响,潜伏期一般为2～3周,传播速度快,易在鸡舍和鸡群中迅速流行,感染鸡长期甚至终身带毒。MS与新城疫病毒(NDV)、禽流感病毒(AIV)、传染性支气管炎病毒(IBV)同时感染会加剧呼吸道症状[8]。

3 临床症状和病理变化

3.1 临床症状

鸡群感染MS后症状不尽相同,可呈呼吸道症状、关节肿大(无呼吸道症状)、无临床症状[9]。感染初期可出现厌食、精神沉郁、喜卧、不愿走动等现象,进一步发展可出现消瘦、跛行、排绿色粪便、关节肿胀等典型症状,蛋鸡感染后产蛋性能下降,严重影响生产力[10]。慢性感染的鸡群不出现关节肿大、跛行等典型症状,饲养管理良好的条件下死淘率下降,但继发感染禽流感、新城疫及其他细菌性疫病,死淘率将明显上升[11]。

3.2 病理变化

MS感染的典型症状为滑膜炎和腱鞘炎,发病较轻的病禽关节剖检可见少量黏性渗出物,发病较严重的病禽关节可见淡黄色黏液或黄色干酪样渗出物,部分病禽还可出现胸部皮下囊肿,肝脏和脾脏肿大[12]。病禽也可表现出气囊炎等典型的呼吸道症状,感染较严重的病禽可见气囊膜明显增厚[10]。

4 诊断

4.1 MS的分离培养鉴定

分离培养鉴定是诊断MS的金标准。MS通常采用改良Frey氏培养基和SPF鸡胚培养,因其自身不能合成生长所需氨基酸,体外培养较困难[13]。0.01%烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、10%马血清或猪血清、5%CO2、37 ℃、pH 6.8条件下可促进MS的生长[14]。MS不能产生沉淀致培养基浑浊,培养基中可添加0.5%比例的1%酚红,根据酚红颜色的变化判断MS在培养基中的生长代谢状况,采用颜色变化单位(CCU)计数法计算菌落数[15]。急性期感染鸡群易分离MS,但慢性感染阶段病变组织中活菌数量较少,若同时感染其他病原,分离MS较难,不适用于快速诊断。

4.2 血清学方法

血清学方法操作简便、迅速,常用作临床快速诊断。常见的血清学方法有血清平板凝集试验(SPA)、血凝抑制试验(HI)、酶联免疫吸附试验(ELISA)。SPA操作简单、耗时短,适用于MS的快速诊断,但因血清污染、交叉感染易出现假阳性;HI检测对象为血清IgG,通常感染7天后宿主才产生IgG,所以该方法不适用于鸡群早期感染诊断。ELISA方法诊断快速,但准确率不高,适用于鸡群MS监测和初筛[16]。

4.3 分子生物学方法

聚合酶链式反应(PCR)方法特异性强、敏感性高、快速,广泛用于MS感染的诊断。刘洋洋等[17]建立了滑液囊支原体、鸡毒支原体、鸡毒支原体疫苗株和非疫苗株的四重PCR方法,可同时检测4种抗原。Wu Qianqian等[18]根据MS的vlhA基因保守区设计特异引物,建立了1种快速、特异、灵敏的MS聚合酶螺旋反应(PSR)检测方法,灵敏度是PCR的100倍,简便、快速、特异、灵敏,适用于MS的现场和实验室诊断。

5 防治措施

5.1 预防

澳大利亚的减毒活疫苗MS-H是国外许多国家常用的疫苗,但活疫苗的使用不利于鸡场中支原体的净化,因此美国禁止使用该活疫苗,我国也很少使用。ISA 71 VG佐剂灭活MS疫苗能诱导肉鸡产生高水平的细胞和体液免疫应答,可提供较高保护力,安全有效,在滑液囊支原体病预防领域有较大的应用前景[19]。采用疫苗预防的同时,在生产中还应加强饲养管理和生物安全措施,提高饲养环境卫生水平,加强祖代、父母代鸡群的流行病学监测,从源头上控制滑液囊支原体病的发生和流行,降低鸡群感染的风险[20]。

5.2 治疗

药物治疗能有效减轻MS感染,常用的敏感药物有多西环素、泰万菌素、泰妙菌素、泰乐菌素、强力霉素等。在条件允许的情况下应进行药敏试验,以准确用药,避免长期单一用药产生耐药性,药物治疗联合疫苗免疫防治效果明显优于单一药物治疗[21]。