探究UF-5000 尿液有形成分分析仪在快速筛查ICU 患者疑似尿路感染中的应用价值
2023-05-27龚虹黄程勇
龚虹，黄程勇
(1.福建省邵武市立医院检验科，福建 邵武 354000；2.福建省立医院检验科，福州 350001)
尿路感染（Urinary tract infection，UIT）被视为医院感染的常见获得性感染之一，通常由患者自身的常居菌上行至膀胱导致，如不能及时诊断治疗将可导致患者上升成为难治性复发性UIT，不仅严重影响患者的生活质量，还会增加患者的经济负担[1]。重症监护室(ICU)患者由于存在侵入性操作(如导尿)多，普遍免疫力低，年龄相对偏大，UIT 发生率高于普通病房患者[2]。
目前，诊断UIT 的金标准仍然是尿培养，但其出报告时间偏长，故能够有及时、准确的诊断ICU 患者UIT 的手段显得尤为重要。随着医疗技术的发展，新的检测技术和检测设备应运而生。日本希森美康（Sysmex）公司UF-5000 尿液有形成分分析仪基于荧光流式细胞术的检测原理，具有细菌计数（BACT）、真菌计数、细菌提示等功能，在检测尿沉渣颗粒计数、细菌分类方面体现出良好性能，但用于评价其在筛查ICU 患者疑似UIT 性能情况的报道很少[3]。
基于此，本研究旨在探讨和评估UF-5000 分析系统对ICU 疑似UIT 患者快速筛查的应用价值，从而为UF-5000 分析系统的临床推广，提高临床UIT 的诊断效率提供参考。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2020 年8 月至2021 年4 月于本院ICU住院临床怀疑为UIT 的患者438 例为研究对象，其中男性276 例，女性162 例，中位数年龄为67岁，按《全国临床检验操作规程（第4 版）》[4]标准，留取中段尿或导尿分2 份，各10mL，一份做尿液有形成分分析，一份做尿培养，于30 min 内同时送检，2 h 内完成常规检查和细菌培养接种工作。纳入标准：ICU 住院患者；留取的尿液为中段尿；尿液在2 h 内完成常规检查和细菌培养接种。排除标准：无法取出尿液；尿液受到污染。全部患者均知情同意，并经我院伦理委员会批准。
1.2 方法
1.2.1 主要仪器和试剂
Sysmex 公司UF-5000 尿液有形成分分析仪、法国生物梅里埃公司的VITEK2-Compact 全自动细菌鉴定及药敏分析仪、哥伦比亚血琼脂培养基、麦康凯平板、真菌显色平板、CO2 培养箱、10uL定量接种环。UF-5000 所使用的试剂都来源于Sysmex 公司。VITEK2-Compac 使用的细菌和真菌鉴定卡均由法国生物梅里埃公司生产。质控菌株：大肠埃希菌（ATCC25922）、金黄色葡萄球菌（ATCC29213）、金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、铜绿假单胞菌（ATCC27853）均来源于卫生部临检中心。
1.2.2 UF-5000 分析
按UF-5000 的标准操作规程检测尿液标本，每天标本检测前做室内质控，在控后方可进行标本分析。收集UF-5000 尿液有形成分分析仪的WBC、BACT、细菌提示、真菌计数。
1.2.3 尿液培养
将每一份尿标本用10 μL 定量接种环取一环接种于哥伦比亚血琼脂培养基、麦康凯平板、真菌显色平板。培养18～24 h 看结果，无细菌生长或细菌生长＜104CFU·mL-1的标本判断为培养阴性，培养出1 种或2 种细菌且菌落计数＞104CFU·mL-1的判断为培养阳性。将阳性的标本通过VITEK2-Compact 全自动细菌鉴定及药敏分析仪鉴定。
1.3 统计学方法
运用SPSS26.0 软件进行数据分析。选用百分比（%）表示计数资料。以尿培养结果为金标准，采用受试者工作特性（ROC）曲线对WBC、BACT进行分析。对数据进行正态性检验，正态分布的组间数据采用ANOVA 分析。P＜0.05 差异有统计学意义。
2 结果
2.1 尿液培养结果
本研究收集到的有1027 份尿标本，其中被判为污染重送的标本103 份，占10.0%（103/1 027)、培养为阴性585 份，占57.0%、培养为阳性339份，占33.0%。
在339 份尿培养阳性结果中，总的阳性菌株为385 株，其中细菌有237 株，革兰阳性菌（GP）101 株中主要为屎肠球菌、粪肠球菌；革兰阴性菌（GN）136 株中主要为肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、奇异变形杆菌、大肠埃希菌。真菌生长的有148 株中主要为白念珠菌。
见表1-3。
表1 革兰阳性病原菌分布表
表2 革兰阴性病原菌分布表
表3 真菌分布表
2.2 WBC、BACT 诊断ICU UIT 的性能情况
以尿培养为金标准，将UF-5000 分析仪的WBC、BACT 和尿培养结果作ROC 曲线分析比较。如图1，WBC 的曲线下面积（AUC）为0.794，95%的置信区间(CI)为0.763-0.825，尤登指数（YI）最大为0.505，临界（Cutoff）值为58.8 μL-1，敏感性为81.4%，特异性为69.1%,；BACT 的AUC为0.981，95%的置信区间(CI)为0.973-0.989，YI最大为0.870，Cutoff 值为119.7 μL-1，敏感性为94.9%，特异性为92.1%。
图1 UF-5000 WBC 和BACT 与尿培养的ROC 曲线分析
2.3 真菌计数与尿真菌培养结果的比较分析
以尿真菌培养结果为金标准的ROC 曲线得出UF-5000 的真菌计数敏感性为87.2%，特异性为91.8%，Cutoff 值为6.1 μL-1。如图2。
图2 UF-5000 真菌计数与尿真菌培养的ROC 曲线分析
2.4 UF5000 分析仪判断GP、GN 的能力分析
UF-5000 的细菌提示信息与尿培养结果相比，总的诊断准确度（AC）为85.5%；GP 的AC 为76.8%，灵敏度为84.5%，特异性为98.1%；GN 的AC 为77.5%，灵敏度为86.2%，特异性为99.2；GP+GN 的AC 为70.8%，灵敏度为60.0%，特异性为95.3%。如表4。
表4 尿培养结果与UF-5000 细菌提示结果的相关表
2.5 BACT 值、WBC 值与尿细菌培养菌落计数的关系分析
UF-5000 的BACT 与尿细菌培养菌落计数存在一定的等级相关性，菌落计数高者BACT 也较高（P 值为0.006），而UF-5000 WBC 差异无统计学意义（P 值为0.919），见表5、图3、表6 和图4。
图3 UF-5000 BACT 和尿细菌培养菌落计数关系图
图4 UF-5000 WBC 和尿细菌培养菌落计数关系图
表5 UF-5000 BACT 和尿细菌培养菌落计数相关指标
表6 UF-5000 WBC 和尿细菌培养菌落计数相关指标
3 讨论
UIT 是临床常见的感染性疾病，主要因感染细菌、真菌等病原体而致病。如果患者不能得到早期诊断，往往会导致病情迁延，严重者可导致死亡[1,2]。ICU 患者发生UIT 几率高于普通病房患者。UF-5000 尿液有形成分分析仪在检测尿沉渣颗粒计数、细菌分类方面体现出良好性能，但用于评价其在筛查ICU 患者疑似UIT 性能情况的报道很少[3]。本研究中发现本院ICU UIT 病原菌所占比例中真菌(39%)＞GN(35%)＞GP 占(26%)。
本研究中以尿培养结果为金标准的ROC 曲线得出UF-5000 分析仪BACT 的AUC、YI、敏感性、特异度均远高于WBC，表明在筛查ICU UIT 中UF-5000 的WBC 有一定的诊断意义，BACT 则具有很高的诊断价值。同时得出UIT 的WBC Cutoff 值为58.8 μL-1，BACT Cutoff 值为119.7 μL-1，与冯敏亚报道[8]存在差异，分析原因是本次标本来源是ICU 疑似UIT 患者，其很多是导尿标本，可能会比清洁中段尿的白细胞和细菌较多，导致提示UIT 的临界值更低。UF-5000 具有真菌定量检测的功能，本研究以尿真菌培养结果为金标准作ROC 曲线得出UF-5000 的真菌计数敏感性为87.2%，特异性为91.8%，Cutoff 值为6.1 μL-1。说明其在诊断真菌性UIT 方面也具有较高的应用价值。UF-5000 还具有细菌提示的作用。本研究以尿培养结果为金标准，发现UF-5000 的细菌提示功能在诊断ICU UIT 患者中有较高的价值，判断单独GN 或GP UIT 比GN 混合GP 感染的诊断效能更高。本研究UF-5000 提示GN、GP、以及GN 混合GP 的敏感性和特异性与之相近。在假阴性和假阳性的原因分析中，本研究发现5例尿培养为GN混合GP，而UF-5000只提示GN，有可能是肠球菌等GP 菌因为生长速度较慢、营养要求更高，未达到仪器检测时菌量未能被分类。64 例尿培养结果为阴性，而UF-5000 细菌提示分别为47 例GP、10 例GN 和7 例GP 混合GN。分析原因可能是ICU UIT 的患者，病情重、留置导尿时间偏长、存在广泛激素以及广谱抗菌药物应用的现象，会使细菌失去活性，造成传统细菌培养结果为假阴性。本研究发现UF-5000 的BACT 值与尿细菌培养菌落计数之间存在一定的等级相联性，即UF-5000 BACT 高的尿细菌培养菌落计数也较高。综上所述，尿液有形成分仪UF5000 所具有的WBC、BACT、真菌计数和细菌提示功能在ICU 患者疑似UIT 中具有较高的快速筛查作用，其BACT 的诊断效能优于WBC。
