2019年至2021年某医院临床分离真菌的菌种分布及耐药分析

高 阳,吉彤珍,杨冬梅

(首都医科大学附属北京妇产医院/北京妇幼保健院 检验科,北京100026)

真菌在自然界中广泛分布,并且种类繁多、数量极大,其中绝大多数对人类有益,而引起人类和动物疾病的真菌仅150余种[1]。念珠菌是一种常见的条件致病菌,存在于人体体表及和外界相通的腔道中,当宿主免疫力低下时可引起多种原发或继发感染,轻者仅累及表皮和黏膜,重者可造成深部器官的侵袭性感染或菌血症[2]。近年来,由于抗生素的广泛使用、内分泌失调以及盲目使用阴道冲洗剂等因素,念珠菌的感染率呈现递增趋势[3]。首都医科大学附属北京妇产医院以妇产科病人为主,91%以上分离株来自生殖道。本研究通过对北京妇产医院2019年1月至2021年12月分离出的616株真菌的分布和药物敏感性进行分析,为临床诊疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

1.1.1试验菌株 收集北京妇产医院2019年1月至2021年12月临床送检标本(包括生殖道分泌物、咽拭子、血液等)培养分离出的病原菌616株,已剔除同一患者相同部位的重复菌株。接种标本时严格按照《全国临床检验操作规程》要求进行操作。

1.1.2质控菌株 大肠埃希菌 ATCC8739、光滑念珠菌ATCC MYA-2950 质控菌株均购自国家菌毒种中心。

1.2 培养、鉴定及药敏试验

1.2.1培养基使用OXIOD产品,有哥伦比亚血琼脂培养皿、3号麦康凯培养皿、万古霉素巧克力培养皿。

1.2.2真菌鉴定首先通过识别菌落形态、革兰氏染色进行初筛,将分离的菌株用梅里埃VITEK MS质谱仪及ATB-Fungus3真菌药敏试剂盒进行菌株鉴定和药敏试验。结果判读严格遵照说明书,结果报告MIC值及敏感、中介和耐药。

1.3 统计学分析

实验数据采用WHONET5.6及SPSS25软件进行统计分析。

2 结果

2.1 病原菌分布

616例菌株中白色念珠菌检出率最高75.16%(463/616),光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌的检出率分别为15.26%(94/616)、3.41%(21/616)、2.11%(13/616),其他念珠菌占4.06%(25/616),包括热带念珠菌1.14%(7/616)、酿酒念珠菌0.97%(6/616)、高里念珠菌0.49%(3/616)、涎沫念珠菌0.16%(1/616)、葡萄牙念珠菌0.16%(1/616)等(表1)。

表1 念珠菌菌种分布构成比(%)

2.2 念珠菌对抗菌药物的总体敏感性

616株念珠菌对伊曲康唑敏感率最低(45.78%),其次为氟康唑(69.32%)、伏立康唑(73.05%)、5-氟胞嘧啶(95.29%)、对两性霉素全部敏感(表2)。

表2 念珠菌对抗真菌药物的敏感率(%)

2.3 主要念珠菌对抗真菌药物的敏感性

白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌对两性霉素敏感率都为100%,克柔念珠菌对氟康唑天然耐药、白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌对氟康唑的敏感率分别为69.33%、74.47%、90.48%。白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌分别对5-氟胞嘧啶、伊曲康唑敏感率差异有统计学意义(P<0.0001)(表3)。

表3 主要念珠菌对抗真菌药物的敏感率(%)

3 讨论

首都医科大学附属北京妇产医院分离出的真菌菌株标本91%以上来源于产科和妇科就诊患者的生殖道分泌物标本,还有不足9%的分离菌株来源于全院送检的咽分泌物和全血标本。外阴阴道念珠菌病是一种常见的妇科感染性疾病,其主要致病菌为白色念珠菌(85%～95%)[4-6],高于本研究中白色念珠菌的分离率,这与本院送检标本还含有少量的非生殖道分泌物标本有关。真菌分离菌株中白色念珠菌最多(75.16%),其次是光滑念珠菌,与田洹、梁齐合、等[7-8]的报道一致,分离率第3、4位病原菌近平滑念珠菌和克柔念珠菌的分布与二者的报道有所不同,提示不同地区不同医院分离的念珠菌分布存在差异,还与送检标本的种类有关。由于正常人口腔中也可能存在念珠菌定植,一般不会引发临床症状[9],在没有相关临床症状时应考虑定植菌的污染。北京妇产医院NICU新生儿通常免疫力低下,是念珠菌定植或感染的危险因素。

药敏结果显示北京妇产医院分离出的念珠菌对两性霉素B的药物敏感率为100%,与秦晓林等[10]的研究一致,但此类药物副作用较大,长期使用能导致肝肾损害,临床上应用较少。近平滑念珠菌对5种药物敏感率最高(90.48%～100%)。白色念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌对5-氟胞嘧啶的敏感率为96.54%～100%,但由于其毒副作用大,临床应用也受到限制。白色念珠菌和光滑念珠菌对伊曲康唑的敏感性不高,可能是由于它的不良反应小,临床使用广泛,出现了耐药菌株。唑类化合物通过抑制目标酶羊毛甾醇14-甾醇去甲基化酶,参与真菌细胞膜的一种重要成分即羊毛甾醇向麦角甾醇的转化,并导致有毒产物14-甲基-3,6-二醇, 因此,麦角甾醇在真菌细胞膜中的含量减少,导致细胞膜结构和功能的改变,最终抑制真菌的生长,唑类药物在临床上被广泛地用于经验性治疗和预防,可能是念珠菌感染菌种变迁的主要原因之一[11]。有研究发现,白色念珠菌对氟康唑的耐药问题日渐明显[12-13],在本研究中氟康唑尚未出现严重耐药,仍是临床常用药物之一。克柔念珠菌对氟康唑天然耐药,临床用药应避免使用此药。临床治疗真菌感染时应结合鉴定及药敏试验结果合理使用抗真菌药物[14-15]。

综上所述,不同地区不同医院分离出的念珠菌的菌种分布不同,不同念珠菌对不同药物的敏感性也有差异,做好真菌鉴定和药敏试验才能为合理选择抗真菌药物提供依据,防止盲目治疗和耐药的产生。