广州市儿童TORCH指标筛查结果及常见感染模式分析

姚亚男,张莉滟,张 娟,陈敏静,唐 晓,廖亚龙*

[1.南方医科大学附属广东省人民医院(广东省医学科学院)检验科,广东 广州510080;2.罗城人民医院 检验科,广西 河池546400]

TORCH是一组病原微生物的英文名称缩写,其中T(Toxoplasma gondii)是弓形体,O(Others)是其他病原微生物,如梅毒螺旋体、带状疱疹病毒、细小病毒B19、柯萨奇病毒等,R(Rubella Virus)是风疹病毒,C(Cytomegalo Virus)是巨细胞病毒,H(Herpes Virus)即是单纯疱疹Ⅰ/Ⅱ型病毒。TORCH感染主要导致患儿先天畸形、器官损害、免疫功能下降以及中枢神经系统异常等危害[1-2]。临床上多通过血清学方法对TORCH病原体IgM和IgG进行检测并判断是否为急性感染或复发感染。IgM主要见于感染早期,但该抗体在体内维持的时间较短;IgG出现于感染中后期,其在机体内维持的时间较长,IgG的存在表示机体处于感染中后期或者有既往感染史。本研究回顾性分析自2019年1月1日至2021年8月11日共3 390例0～18岁未成年人TORCH的感染情况并探讨其流行病学特点。

1 资料与方法

1.1 一般资料

3 390例0～18岁未成年人按性别分为男性1 976例,女性1 414例;按发病季节分为春季(3～5月)918例,夏季(6～8月)815例,秋季(9～11月)760例,冬季(12月、1月和2月)897例;按年度分为2019年1 961例,2020年1 028例,2021年401例;按年龄分为0～3岁婴幼儿2 567例,3～12岁儿童556例,12～18岁青少年267例。

1.2 标本采集

所有研究对象空腹采血,用干燥管采血2 ml,离心机3 000 r/min离心10 min。若当天不能及时检测标本,将标本置于4℃冰箱内进行保存,并于24 h内进行检测。

1.3 标本要求

通过静脉穿刺取血后,若标本出现严重溶血、脂血,黄疸以及标本被污染的情况下,应进行重新采血,或标本不纳入检验。

1.4 检验方法

整个实验使用的是酶联免疫吸附试验(ELISA)。将测试血清、校准品以及质控品用样本稀释液按照1∶81(即10 μL+800 μL)的比例稀释。充分摇匀后在每个微孔加入相应的100 μL稀释的校准品,质控品和稀释后的血清样本。在空白孔中加入100 μL样本稀释液。37℃水浴孵育30 min后洗板并拍干所有液体,重复该步骤5次。在每孔中加入100 μL酶结合物,37℃水浴孵育30 min,洗板并拍干所有液体,重复该步骤5次。每孔中加入100 μL染液(TMB),37℃水浴孵育15 min。每孔加入100 μL终止液终止反应。用设备有450 nm滤光片的酶标仪读取产生的颜色,仪器需要空气调零。试剂空白孔在450 nm处吸光度必须<0.150,如果试剂空白≥0.150,则该批实验必须重做。将读数减去试剂空白后继续读取整板数值。

1.5 实验结果判定

所有结果<0.90为阴性,0.90～1.10为可疑,>1.10为阳性。

1.6 统计学分析

采用SPSS26.0软件进行统计分析,计数资料用率表示,采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 未成年人TORCH总体阳性率比较

在3 390位受检者中,TOX IgM的可疑率为0.2%(6/2 824),阳性率为0.4%(10/2 824);RUV IgM的可疑率为0.2%(6/2 848),阳性率为0.8%(22/2 848);CMV IgM的可疑率为1.1%(31/2 944),阳性率为2.9%(86/2 944);HSV-1 IgM的可疑率为4.2%(22/530),阳性率为10.9%(58/530);HSV-2 IgM的可疑率为0.9%(28/3 029),阳性率为1.7%(50/3 029)。HSV-1 IgM阳性率最高,差异有统计学意义(P<0.05),结果见表1。

表1 未成年人TORCH总体阳性率比较[n(%)]

2.2 不同年龄段的未成年人 TORCH阳性率比较

儿童与婴幼儿的TOX IgM、HSV-2 IgM阳性率有统计学差异(P<0.05),青少年与婴幼儿的TOX IgM、HSV-2 IgM、CMV IgM阳性率有统计学差异(P<0.05)。而不同年龄段间RUV IgM、HSV-1 IgM阳性率无差异,结果见表2。

表2 不同年龄段的未成年人TORCH阳性率比较[n(%)]

2.3 不同年度、性别、季节的未成年人 TORCH阳性率比较

不同年度、性别、季节的未成年人TOX IgM、RUV IgM、CMV IgM、HSV-1 IgM、HSV-2 IgM的阳性率无统计学差异,结果见表3～5。

表3 不同年度的未成年人TORCH阳性率比较[n(%)]

表4 不同性别的未成年人TORCH阳性率比较[n(%)]

表5 不同季节的未成年人TORCH阳性率比较[n(%)]

2.4 0～18岁未成年人TORCH感染模式分析

在3 390例患者中共有75例患者同时进行了上述5种病原体的筛查,阳性率为18.67%(14/75)。单一病原体感染以单纯疱疹病毒Ⅰ型感染为主,占6.67%(5/75);两种病原体及以上感染以单纯疱疹病毒Ⅰ型+单纯疱疹病毒Ⅱ型感染为主,占4.0%(3/75),结果见图1。

图1 0～18岁未成年人TORCH感染模式分析

3 讨论

TORCH原发性感染是指机体首次被感染,IgM是机体被感染后最先出现的抗体,IgM阳性可以作为机体感染的早期指标,具有特异性。而IgG抗体产生的时间较晚,且IgG阳性不能直接判断机体为原发性感染还是既往感染或是接种疫苗所导致的。

本研究中TOX IgM阳性率较低,这与邵婧等人研究结果一致[3]。HSV-1 IgM阳性率最高,为10.9%,差异具有统计学意义,这与郑辉等[4]、Bordea等[5]、莫秋菊等[6]的研究结果存在差异。郑辉等学者的研究得出的结果均是以CMV感染为主。上述分析中,婴幼儿与儿童、青少年TORCH阳性率均有差异。具体表现在儿童HSV-2 IgM、TOX IgM抗体阳性率高于婴幼儿;青少年HSV-2 IgM、CMV IgM、TOX IgM抗体阳性率高于婴幼儿。TORCH感染可以抑制或破坏细胞的分裂和增殖,造成流产、早产以及胎儿先天性畸形等不良后果[7]。

本研究中TORCH感染不具有季节差异,可能与广州的四季温差变化较小、空气湿度较大有关系。在同时进行了5种病原体筛查的患者中以HSV-1和HSV-2混合感染模式多见,这可能是因为TORCH病原体间存在着共同抗原而导致的交叉感染,但还需要进一步研究[8]。另外,由于ELISA方法学受影响因素较多,例如抗原抗体比例的不协调、孵育时间、显色时间和温度等均会影响到实验的准确性。