喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系

邝 林 赵 静 张 静 伦巍巍

受空气污染、吸烟饮酒、烫食辣食等不良因素的影响,近年来喉癌的发病率一直居高不下[1]。喉癌患者早期多无明显特异性症状,仅表现为咳嗽声嘶、喉部异物感等症状,而随着癌肿的进一步发展,可逐渐出现颈部肿块、呛咳、吞咽困难以及呼吸困难等症状,严重者还可出现恶病质表现。喉癌的临床治疗主要以手术切除辅以放、化疗的综合性治疗,而实际治疗方案的选择则需结合癌肿分期、分化等多方面因素进行综合考量,因而对于喉癌患者癌肿发展情况的早期评估亦是其临床治疗中的重要一环。F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)是近年发现的抑癌基因,其在正常生理状态下高表达以诱导癌细胞凋亡,其低表达或表达缺失均对机体癌肿发展变化有一定的提示作用[2]。鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)异常表达多与肺癌、卵巢癌以及部分消化系统恶性肿瘤的发生发展有密切联系[3]。基于此,本院选取83例喉癌患者资料进行研究,探讨喉癌组织FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2016年1月至2022年1月本院收治的83例喉癌患者资料,其中男性62例,女性21例;年龄37～75岁,平均年龄(58.87±6.53)岁。

1.2 入组条件

纳入标准:①病理学检测确诊为喉癌[4];②提取病理标本前未接受过放、化疗;③无喉部手术史;④临床及随访资料完整。排除标准:①合并不典型增生;②合并声带息肉;③合并重要脏器功能障碍;④合并其他肿瘤疾病;⑤合并全身感染性疾病。

1.3 方法

所有研究样本均通过手术获取喉癌组织及癌旁正常组织(距癌组织边缘>3.0 cm,且经病理学检测确定无癌细胞浸润),以多聚甲醇固定,无水乙醇脱水浸泡2 h后进行石蜡包埋,切片后以60 ℃进行烘烤,脱蜡水化后以抗原修复液进行抗原修复。自然冷却至室温后以磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次,每次冲洗持续5 min,而后以3%的过氧化氢溶液孵育0.5 h,再次以PBS冲洗3次,每次冲洗持续5 min。以山羊血清封闭后于37 ℃恒温水浴箱内孵育0.5 h,去除封闭液,加入稀释后的FBXW7、SCC单克隆抗体,低温湿盒过夜。次日复温至室温以PBS冲洗3次,每次冲洗持续5 min,以辣根过氧化物酶标记后于37 ℃恒温水浴箱内孵育0.5 h,再次以PBS冲洗3次,每次冲洗持续5 min,滴加二氨基联苯胺显色剂,通过显微镜观察切片染色情况,直至染色满意后以自来水冲洗,再以苏木精复染,冲洗脱水后以中性树胶封片,于显微镜下观察FBXW7、SCC-Ag表达情况。

1.4 FBXW7、SCC-Ag表达情况

所有病理标本均由两位病理医师进行双盲阅片和评分,以二者评分均值为最终评估结果。于显微镜下随机去5个高倍视野,评估染色强度和阳性细胞占比:染色强度:无着色记0分,黄色记1分,棕黄色记2分,棕褐色记3分。阳性细胞占比:无阳性细胞记0分,≤24%记1分,>24%～50%记2分,>50%～75%记3分,>75%记4分。计算两项总分,总分≥4分提示为阳性表达。

1.5 观察指标

①比较癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;②比较不同癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况患者基础(性别、年龄、吸烟饮酒史)及临床病理资料(癌肿分期、分化、浸润深度以及淋巴结转移)。③患者出院后通过门诊、电话等形式进行随访,评估患者6个月内预后(复发、远处转移或死亡记为预后不良,反之为预后良好),比较不同预后患者癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况。

1.6 统计学方法

2 结果

2.1 癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率比较

癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%(P<0.05),见表1。

表1 癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率比较(例,%)

2.2 FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理情况的关系

单因素分析显示,肿瘤病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况具有密切联系(P<0.05),见表2、3。

2.3 FBXW7、SCC-Ag表达与患者预后的关系

6个月内预后良好患者54例,预后不良患者29例。预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率为29.63%,高于预后不良患者的10.34%;预后良好患者癌组织SCC-Ag表达阳性率为62.96%,低于预后不良患者的89.66%(P<0.05),见表4。

表2 FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理资料的关系(例,%)

表3 FBXW7、SCC-Ag表达与患者预后的关系(例,%)

3 讨论

喉癌是咽喉部最常见的恶性肿瘤,其发病原理尚不明确,但与吸烟饮酒、不良饮食习惯等因素密切相关。喉癌患者早期多无明显症状,中晚期则可逐渐出现声音嘶哑、咳痰咳血、喉部异物等症状,如肿瘤表面破溃还易并发感染出现呼气恶臭味等症状[5]。临床对于喉癌的治疗多以手术根治切除为主,但受癌肿分期及分化等情况的影响,其术后的抗肿瘤治疗方案具有较大差异。对于中、晚期喉癌患者,在手术治疗后仍需长期进行放、化疗辅助治疗,而放化疗方案的制定亦需结合患者实际癌肿分期分化、浸润程度以及淋巴结转移等情况进行综合评估。因此,找到更多辅助早期评估喉癌发展的参考指标,对其抗肿瘤治疗方案的制定、延长患者生存期、改善其生活质量均有重要意义[6]。

近年来,分子生物技术逐渐成为临床研究的重点,其在疾病的评估及治疗中均起到了极大的辅助作用,而其中生物标志物在各类肿瘤疾病的诊断评估和用药指导中起到不容忽视的作用。FBXW7是近年新发现的抑癌基因,其与卵巢癌、乳腺癌以及消化道恶性肿瘤的癌肿细胞增殖、侵袭以及转移发展均有一定联系,作为机体潜在的标靶基因,其在多种恶性肿瘤的发生发展中均起到部分调控作用[7-8]。SCC-Ag属鳞状上皮癌标志物,是丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员,主要分布于各类鳞状细胞癌癌肿细胞胞质内,既往多用于鳞癌的诊断评估,随着近年对相关肿瘤标志物的研究发展,SCC-Ag在卵巢癌、肺癌、消化道恶性肿瘤的早期诊断评估中亦有较高的应用价值[9]。此次研究结果显示,所有研究样本中患者癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%,且单因素分析显示,癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况具有密切联系。正常生理状态下,FBXW7高表达可诱导癌细胞凋亡,抑制癌肿细胞的增殖和转移,以达到控制癌肿发展的效果,而喉癌组织中FBXW7多呈低表达或缺失表达,无法抑制c-Myc等原癌基因的表达而导致c-Myc蛋白蓄积,癌细胞的增殖能力增强而凋亡减少,癌细胞大量扩增,其侵袭性明显增加,癌肿转移风险更高[10]。假复层柱状上皮及鳞状上皮在正常生理状态下虽能表达SCC-Ag,但表达水平极低,而在喉癌组织中,异常增殖的鳞状细胞内则多见大量酸性SCC蛋白表达,尤以低分化癌细胞更为明显,本次研究结果亦与王剑等[11]的临床研究相印证。此次研究中,随访6个月内预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率为29.63%,高于预后不良患者的10.34%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为62.96%,低于预后不良患者的89.66%,提示癌组织FBXW7、SCC-Ag表达对喉癌患者预后情况亦有提示作用。因此,临床可根据癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况结合其具体病情评估其癌肿发展情况,并参考评价结果制定针对性的术后抗癌肿治疗方法,以尽可能保证患者预后,延长患者生存期。

综上所述,喉癌患者癌组织中FBXW7多呈低表达或表达缺陷,而SCC-Ag多呈高表达,同时,患者病理分期、分化、浸润程度、淋巴结转移均与癌组织FBXW7和SCC-Ag的表达密切相关,且患者预后情况亦与二者表达有一定关联,因此在早期评估喉癌患者癌肿发展时,可将癌组织FBXW7、SCC-Ag表达情况作为辅助参考,并结合具体病情制定相应的抗癌肿治疗方案,以延长患者生存期,提升其生存质量。