湖北地区原发性高血压人群药物相关基因多态性研究

任国庆 易天骄 范浩 康文义 范文

[关键词]高血压；高血压药物相关基因；基因多态性；基因型

高血压的病因是由遗传因素和环境因素共同导致的。我国最新数据显示18岁以上高血压患者人数约为2.45亿，已对我国居民的身体健康构成严重危害[1]。口服降压药物是治疗高血压最重要的方法，研究表明相同降压药的疗效在不同患者间存在明显差异，药物相关的基因位点多态性可改变药物代谢酶活性和影响药物作用靶点，导致个体差异[2]。通过检测高血压药物相关基因的多态性，可指导医师对常规用药疗效不佳的患者选择合适的药物和给药剂量。本研究分析目前国内外研究较多的7种抗高血压药物相关基因多态性[AGTR1（1166A>C）、CYP2C9*3、ACE（I/D）、CYP2D6*10、ADRB1（1165G>C）、NPPA（2238T>C）、CYP3A5*3]在湖北地区高血压人群中的分布特征，给个体化基因导向治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年9月至2022年6月在湖北省中医院和各课题参与单位就诊的500例原发性高血压患者为研究对象，其中男274例，女226例。经湖北省中医院医学伦理委员会研究审核通过，患者签署知情同意书。纳入标准：年龄>18周岁；符合最新版中国高血压诊断标准[1]中1级和2级原发性高血压的新确诊患者。排除标准：继发性高血压；心力衰竭等严重的心脏疾病；慢性肾小球肾炎、肾盂肾炎等肾脏疾病。

1.2 基因型检测

乙二胺四乙酸抗凝管采集2ml静脉血标本，对采集的血标本进行核酸提取，并对提取的核酸进行扩增，每次实验保证阴性和阳性质控合格。核酸提取仪型号为GeneRotex96（西安天隆科技有限公司），核酸提取试剂使用Ex-DNA（西安天隆科技有限公司，批号：21050720T146）；熒光定量PCR扩增仪型号为QuantStudioDx（美国ABI公司），扩增试剂使用PCR-溶解曲线法检测试剂（无锡锐奇基因生物科技有限公司，批号：H242105002）。

1.3 观察指标

基因检测结果分为野生型（WW）、杂合突变型（WM）、纯合突变型（MM），等位基因分为野生型等位基因（W）和突变型等位基因（M）。等位基因频率=某基因的总数/种群中全部基因的总数；基因型频率=某种类型的基因型个数/种群的总数。

1.4 统计学方法

采用SPSS22.0统计学软件进行数据处理，计数资料以[n（%）]表示，基因型及基因频率分布的组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基因型及基因频率检测结果

根据Hardy-Weinberg平衡吻合度检验结果（P>0.05），7种高血压药物相关的基因型分布频率处于遗传平衡状态。其中ADRB1（G/C）和CYP3A5*3等位基因突变频率超过70%，CYP2D6*10和ACE（I/D）的突变频率较高分别为55.41%和35.70%，AGTR1（A/C）、CYP2C9*3和NPPA（T/C）突变频率较低不足10%。见表1。

2.2 各基因型在不同性别、年龄组间的分布频率比较

7个抗高血压药物相关基因的分布频率在男、女间差异无统计学意义（P>0.05）。老年组和青中年组间，AGTR1（1166A>C）基因型的分布频率差异有统计学意义（P<0.05），尚未发现其余6种基因型的分布频率有统计学意义（P>0.05）。见表2。

2.3 湖北地区高血压患者与正常人群抗高血压药物相关的等位基因分布频率比较

500例原发性高血压患者中5个高血压药物相关的等位基因分布频率与正常人群[2]比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

3 讨论

基因多态性影响药物疗效的作用机制是药物基因组学这门学科主要的研究内容，相关药物代谢酶和药物作用靶点的基因位点可以通过分子诊断技术被检测出来，对指导临床精准用药和避免用药不良反应的发生尤为重要。

血管紧张素转换酶抑制剂（angiotensinconvertingenzymeinhibitor，ACEI）可抑制体内的血管紧张素转换酶，使得血管紧张素转换酶催化血管紧张素Ⅰ转化为血管紧张素Ⅱ的功能降低，达到降低血压的作用。ACE基因编码血管紧张素转换酶的生成，该基因Alu插入片段（I）和缺失片段（D）的多态性可影响人体血浆ACE浓度（DD型>ID型>II型），导致ACEI降压疗效的差异不同[3]。研究表明[4]，服用相同的ACEI类药物治疗前后，携带D等位基因与携带I等位基因的高血压患者相比较，携带D等位基因的高血压患者血压下降幅度更大。ACE基因可能影响高血压的发生发展，高血压患者中D等位基因的频率要高于健康人群[5]，本研究中尚未发现高血压患者中的D等位基因与正常人群存在差异。

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（angiotensionⅡreceptorantagonist，ARB）通过抑制ATⅡ受体，抑制ATⅡ的缩血管作用，从而降低血压。血管紧张素Ⅱ-1型受体（angiotensinⅡreceptor1，AGTR1）由AGTR1基因编码，AGTR1（1166A>C）突变可使受体的敏感性提高，可增强ARB的降压疗效。研究表明[6]，AA、AC和CC基因型患者在接受相同剂量的厄贝沙坦治疗前后，AC+CC基因型组比AA基因型组疗效更好。许景峰等[7]研究发现高血压患者中AGTR1（1166A>C）突变频率显著低于健康受试者（P<0.05），本研究中AGTR1（A/C）突变型等位基因频率与中国健康人群相比较差异无统计学意义，在湖南和福建地区高血压患者的AGTR1（A/C）突变型等位基因频率与中国健康人群相比较存在差异[8]。受地域和种族影响，尚未得出一致性结论。此外，AGTR1（1166A>C）基因型在老年组和青中年组间的频率分布差异有统计学意义（P<0.05），说明AGTR1（1166A>C）突变型等位基因频率在青中年人群中发生较高。本研究中CYP2C9*3等位基因突变频率为5.10%，与文献[7]研究基本一致。肝脏中的CYP2C9可以代谢ARB类药物，CYP2C9*3的突变频率在人群中发生率不高，但是CYP2C9*3的突变可导致代谢酶的活性大大降低，从而影响ARB的降压疗效。对于前体药物氯沙坦，CYP2C9*3突变会使转换生成羟酸代谢产物减少，携带CYP2C9*3突变型等位基因的患者需要增加氯沙坦的剂量；对于厄贝沙坦和坎地沙坦等原型降压药，CYP2C9*3突变会导致血药浓度明显升高，应当适量减药[9]。

β1-受体阻滞剂通过与β1肾上腺素受体（β1adrenergicreceptorantibody，β1-AR）的结合，并通过G蛋白-腺苷酸环化酶-环磷酸腺苷-蛋白酶A（GS-AC-cAMP-PKA）通路对平滑肌产生抑制性效应使得血管扩张和血压下降。β1-AR由ADRB1基因编码，ADRB1（1165G>C）突变可导致受体敏感性提高，增加β1-受体阻滞剂的降压疗效。研究表明[10]，CC基因型患者对于β1-受体阻滞剂的降压疗效要好于GG和GC基因型患者。肝脏中CYP2D6能代谢β1-受体阻滞剂，CYP2D6*10突变可导致代谢酶活性极大地下降，从而增强β1-受体阻滞剂疗效。CYP2D6*10/*10基因型的患者对于β1-受体阻滞剂的降压疗效要明显好于其他基因型[11]。本研究结果尚未发现CYP2D6*10和ADRB1（1165G>C）等位基因频率与文献中健康人群[2]分布存在差异，CYP2D6*10和ADRB1（1165G>C）突变频率都高于50%，临床医师应根据基因检测结果合理使用β1-受体阻滞剂，避免不良反应的发生。

钙通道阻滞剂（calciumchannelblocker，CCB）主要通过CYP3A5代谢，CYP3A5*3突变可导致代谢酶功能降低，底物在体内被降解的时间延长，从而增强药物的疗效。CYP3A5不同基因型对药物代谢存在差异，需要个体化治疗[12]。使用相同CCB治疗方案下，根据基因型对高血压患者进行分组比较降压疗效，CYP3A5*3/*3组疗效最好，CYP3A5*1/*3组次之，CYP3A5*1/*1組疗效较差[13]。本研究中CYP3A5*3突变频率较高，临床医师在经验性用药时，应当适当减药。

目前对利尿剂药物疗效与NPPA（2238T>C）基因多态性研究较少，携带C等位基因的患者，对利尿剂药物的敏感性增加[14]。本研究中，NPPA（2238T>C）在7种基因突变位点中频率最低仅为0.80%，说明大部分患者对于利尿剂不敏感，此结论与杨梅等[15]研究结论相一致。

本研究旨在分析7种抗高血压药物基因多态性在湖北地区高血压人群中的分布特征，与中国健康人群比较中尚未发现存在显著性差异，但是为湖北地区原发性高血压基因库的扩充奠定了基础。由于标本量较少，后期将增加高血压患者样本同时增加对湖北西部地区少数民族高血压患者的样本，检测其全部7种基因多态性结果与用药疗效的相关性，为湖北地区高血压患者提供个体化临床治疗。