浅析食品、药品、化妆品微生物检验的异同

曹鲁娜 魏红焕 赵蕊蕊 宋红卫

摘 要：通过对食品、药品、化妆品三个品类微生物检验在检验依据、样品采集及检验用量、培养基、实验室环境、方法适用性、具体操作差异（以菌落总数为例）等方面进行对比分析，浅析三个品类在微生物检验中的异同，发现三品类微生物检验可以优势互补，互相借鉴。建议相关从业人员在工作中总结经验、融会贯通，持续增强实验的严谨性和科学性，更好地保障人民群众的饮食、用药、用妆安全。

关键词：食品，药品，化妆品，微生物检验

DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.20.032

0 引 言

近年来，随着国务院就市场监管系统机构改革提出的指导意见，各级市场监督管理机构陆续完成了改革，其下属的检验机构随之整合，涉及产品领域涵盖了食品、药品和化妆品（以下简称三品类）等品类的检验。目前，各相关检验机构的检验部门组织结构一般分为理化、微生物、毒理病理、动物实验等科室，其中微生物室承担着三品类的微生物检验。微生物检验控制是保障三品类质量安全的重要措施，与人民群众饮食、用药、用妆安全息息相关。三品类在微生物检验中既有相同点，又有不同点，检验工作中有值得相互借鉴之处，对微生物从业人员提出了更高要求，把握三品类的各自特点，才能保证出具可靠的检验数据、准确的检验结果。本文通过分析比较三品类微生物检验的异同点，为相关从业机构和同行提高检验检测水平提供参考依据。

1 三品类微生物检验的重要性

食品微生物检测是国家食品风险监控项目的组成部分[1]，《国家食品安全监督抽检实施细则（2022版）》中共涉及33个食品大类，其中设置微生物检验项目的有30个食品大类[2]。这足以证明食品微生物检验的重要性。

药品是用于调节人的生理机能的物质。微生物污染直接影响药品有效性，还有可能危及用药患者的生命安全[3]。

化妆品是施用于皮肤、毛发、指甲、口唇等人体表面的日用化学工业产品[4]。刘佩等[5]研究发现化妆品不合格项目中菌落数超限的不合格样品最多，而化妆品污染微生物后可能会导致人体发生皮肤过敏、感染、眼部疾患等损伤，危害使用者的健康[5-6]。

2 三品类微生物检验的异同

2.1 三品类微生物检验的共同处

三品类微生物检验均是以微生物分析为基础，是微生物分析应用的不同分支。其共同点在于：一是检验对象一致，都是微生物，有着相同的检验原理；二是检验目的一致，都是为了检验样品污染微生物的程度，保证人民群众的使用安全有效；三是开展检验依据的法典、标准或规范等都是国家颁布的。

2.2 三品类微生物检验的不同处

三品类微生物检验在标准依据、检验对象（微生物种类）、培养基、环境及设备、方法适用性等方面均有差异。就检验依据而言，三品类微生物检验依据的标准名称、现行有效版本及标准更新情况均不同，微生物限度标准也有所不同。检验依据：食品为《中华人民共和国国家标准》、行业标准等；药品为《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）；化妆品为《化妆品安全技术规范》。现行有效版本：食品为GB 4789《食品安全国家标准 食品微生物检验系列标准》；药品为《中国药典》2020年版四部；化妆品为《化妆品安全技术规范》2021年修订版。食品标准不定期更新，需要及时查新；药品标准自1985年版以来，更新周期为5年，2020年版为第十一版；化妆品标准不定期更新，2002年发布第一版 ，分别于2007、2015、2021年更新。

3 检验实践中的借鉴

3.1 样品采集

样品采集是微生物检验的前置环节，也是关键影响要素，样品是否具有代表性，直接关系到能否真实反映出样品污染微生物的情况，影响检验结果。在抽样方法和抽样数量方面：食品随机抽样，根据检验目的等制定二级或三级采样方案，抽取不少于5份样品；药品随机抽样，不得抽取外包装有明显破损的样品，抽取不少于2个最小包装；化妆品要求样品具有代表性，不少于2个包装单位。在检验量方面：食品一般是25 g（mL）；药品制剂一般是10 g（mL），大蜜丸、贴膏剂等特殊剂型另有规定，贵重药品等检验量可酌减；化妆品一般是10g（mL）。

对比而言，本文认为食品抽样方法更加复杂细致，更具随机性和代表性，且检验量较大，能更好地反映出样品的微生物真实污染水平。这与三品类的自身特点有关，相对于药品和化妆品，食品抽样包装规格更大、使用量更大、使用人群范围更广、受舆论关注程度更高。

3.2 培养基的质量控制

培养基是微生物生长的物质基础，在微生物检验实验物料中属于关键要素，其质量状况直接影响检验结果。三品类质控要求依据的区别：食品为GB 4789.28 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》；药品为《中国药典》四部通则（以下简称通则）9203药品微生物实验室质量管理指导原则；化妆品未作要求。质控试验区别：食品为pH值、颜色、澄清度、生长率（PR值、G值、浊度值）、选择性及特异性测试等；药品为pH值、适用性检查（回收率、促生长能力、抑制能力和指标特性）、灵敏度检查、稳定性试验；化妆品未作要求。

食品和藥品培养基质控具体要求有所不同。比如通则9203药品控制菌检查培养基适用性试验中仅对菌落生长状况、大小和形态特征一致性作出要求；GB 4789.28食品培养基质控则提出PR值、G值、浊度值等量化要求，实操性更强。再如，GB 4789.28要求培养基制备后标记有效期，而通则9203中给出了保存参考期限（1周且须经过验证）。由此可见，食品和药品培养基质控各有优劣，可相互借鉴，以保证培养基质量，提高微生物检验结果的准确性。化妆品微生物检验对培养基没有提出质控要求，其菌落总数用卵磷脂吐温80营养琼脂，配方中的卵磷脂和吐温80中和防腐剂的效果较差，可能造成检验结果不准确[7]。建议参考食品、药品用培养基的质控要求，适当进行控制。

3.3 实验室环境要求

微生物检验对试验环境要求较高，如果洁净级别不达标，可能造成样品的二次污染，出现假阳性结果。按行业共识，样品的检测环境不能低于生产环境，否则检验结果的可信度下降。三品类在环境要求方面：食品和化妆品均要求洁净区域内单方向工作流程；药品要求不低于D级背景下的生物安全柜或B级洁净区。在微生物监测方面：食品对温度、相对湿度、噪声等物理参数有要求，药品除温度、相对湿度、噪声等物理参数外，对悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物（含手套及操作服）等有明确要求；化妆品则未作要求，与药品和化妆品相比较，食品标准对微生物的要求一般限值稍高，而且食品检验过程中，一般菌落生长比较多，对药品和化妆品检验容易造成交叉污染，导致出现假阳性结果。本文建议食品和化妆品实验室可以参考通则9205的药品洁净实验室微生物监测和控制指导原则开展洁净监测活动。微生物实验室三品类洁净区独立设置可降低交叉污染的风险，如果实验室受条件限制没有各自独立区域，应制定相应的控制措施，避免出现假阳性和假阴性结果，保证检验结果的准确性。

3.4 方法适用性

药品微生物计数方法和控制菌检查应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于本产品的微生物计数或控制菌检查[8]。《中国药典》2010年版以前，对方法适用性试验未作要求，试验中经常遇到低稀释级样品没有菌落生长，但高稀释级样品却有菌落生长的现象。其原因在于可能是药品中含有抑菌活性成分，方法适用性试验可以去除样品的抑菌活性。

在生产和加工食品的过程中使用化学防腐剂，能够有效抑制微生物产生，延长保存期限。某些食品中有国家标准允许添加的防腐剂[9]，化妆品中加入防腐剂是为了控制化妆品卫生质量，但是防腐剂的存在会影响微生物的检测结果[7]。食品和化妆品微生物检验未提出方法适用性的要求，但本文认为，为了增强试验的科学性和严谨性，保证检验结果的准确性、真实性和可靠性，建议参考药品微生物限度检查的理念，开展方法适用性试验考察及评估。目前，已有多个研究借鉴药品微生物限度检查方法适用性试验对化妆品微生物检验开展方法适用性研究，用于判断检验方法是否适用于相应产品[10-12]。

3.5 实验操作中的差异（以菌落总数为例）

三品类微生物检验在培养基配制、灭菌、仪器设备等方面要求相似，以菌落总数为例，比较三品类在稀释液、培养基、培养温度和时间等方面的差异。稀释液：食品用pH7.2 磷酸盐缓冲液或0.85%生理盐水；药品用pH7. 0 无菌氯化钠－蛋白胨缓冲液，或 pH7.2 磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基；化妆品用0.85%生理盐水。培养基：食品用PCA培养基；药品用胰酪大豆胨琼脂培养基；化妆品用卵磷脂吐温 80 营养琼脂培养基。培养温度和时间：食品（36±1）℃培养（48±2） h，水产品（30±1）℃培养（72±3） h；药品30～35℃培養3～5天；化妆品（36±1）℃培养（48±2） h。

4 微生物的鉴定

微生物鉴定是借助现有的分类系统，通过对未知微生物的特征测定，对其进行细菌、酵母菌和霉菌大类的区分或属、种及菌株水平确定的过程[8]。药品在微生物鉴定中可自行选择适宜的验证方法，呈现出开放性和灵活性[3]。食品中的致病菌、化妆品中的控制菌检查在出现可疑菌落后，必须严格按照相应的法定方法进行，不得自行变更。

5 结 语

通过对三品类微生物检验在检验依据、样品采集及检验用量、培养基、实验室环境、方法适用性、具体操作差异（以菌落总数为例）等方面进行对比分析，发现三品类微生物检验相似之处较多，兼具各自的特点，可以优势互补。食品微生物检验中检验程序更加详细和明确，利于实际操作应用；化妆品微生物检验由于开展时间较短，规范化程度尚待提高；而药品微生物限度检查标准体系实现了与国际标准的接轨，可以对食品和化妆品的微生物鉴定提供借鉴。建议相关从业人员在工作中总结经验、融会贯通，关注实验细节，持续增强实验的严谨性和科学性，提高微生物检验的质量控制水平，更好地保障人民群众的饮食、用药、用妆安全。