毛麝香乙酸乙酯部位的化学成分研究

2023-03-10王呈文钟秋梅江炜钰蔡映举

生物化工 2023年3期

王呈文，钟秋梅，江炜钰，蔡映举

（汕头职业技术学院，广东汕头 515000）

毛麝香[Adenosma glutinosum(L.) Druce]为玄参科（Scrophulariaceae）毛麝香属直立草本植物全草，别名麝香草、凉草等，主要分布在我国南部，用药历史悠久，容易获取，且在李镇魁等著的《潮汕中草药》一书中有记载，为潮汕常用药及特色药。其性味辛、苦、气香，味稍辣而凉，具有杀菌、消炎、祛风止痛、散瘀消肿、解毒止痒的功效，可用于治疗小儿麻痹初期、跌打损伤、肿痛、湿疹、荨麻疹等疾病，是一种具有研究价值的药用植物资源。已从毛麝香全草中分离得到33 个化合物[1-4]。

目前对毛麝香的基础研究还不够深入和全面，产业化发展程度较低，主要集中在种植及普通的干草药物销售上，而一些高附加值的深加工产品目前尚未得到开发，没有充分发掘其价值。本研究为进一步科学合理地利用和开发毛麝香的药用价值提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

毛麝香全草，广东省汕头市草药店，经药剂师验证，样品留存于实验室；柱层析色谱硅胶GF254（200 ～300 目）及薄层层析硅胶板，青岛海洋化工有限公司；葡聚糖凝胶LH-20，北京酷来搏科技有限公司；75%乙醇、石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、甲醇，分析纯，广东西陇化工有限公司；Bruker AV-400 型核磁共振仪，瑞士布鲁克公司。

1.2 提取与分离

取5 kg 干燥的毛麝香全草，用粉碎机粉碎至约10 目，75%的乙醇15 L 常温浸取48 h，重复3 次，合并提取液，75 ℃减压浓缩，再进行真空冷冻干燥，得到冻干品462.32 g。对冻干品加入1.5 L 水，超声波溶解，再分别用60-90 石油醚、乙酸乙酯进行少量多次萃取（每次溶剂用量约为500 mL，萃取3-5 次），合并相应萃取液，60 ℃减压浓缩得到石油醚浸膏、乙酸乙酯浸膏和水相（萃余部分）浸膏。

对乙酸乙酯浸膏进行化学成分分离。取乙酸乙酯浸膏，用体积比1 ∶1 的三氯甲烷-甲醇溶解，上硅胶柱，依次用石油醚-乙酸乙酯（9 ∶1 →0 ∶1）、乙酸乙酯-甲醇（9 ∶1 →0 ∶1）梯度洗脱，洗脱流速为每秒4 ～6 滴，不成线，每25 mL 洗脱液浓缩1次，用薄层层析硅胶板分析，合并极性相似流分，得到组分AGY1 ～AGY15。组分AGY2 ～7 均用体积比1 ∶1 的三氯甲烷-甲醇溶解后上硅胶柱，依次用石油醚-乙酸乙酯（9 ∶1 →0 ∶1）、乙酸乙酯-甲醇（9 ∶1 →0 ∶1）梯度洗脱，每50 mL 洗脱液浓缩1 次，用薄层层析硅胶板分析，合并极性相似流分，得到化合物1（7 mg）、2（5 mg）、3（7 mg）、4（7 mg）、5（6 mg）、6（5 mg）、7（4 mg）、8（4 mg）、9（6 mg）、10（6 mg）。组分AGY10 ～13 均用甲醇溶解后上葡聚糖凝胶LH-20 柱，依次用水-甲醇（1 ∶0 →0 ∶1）梯度洗脱，每25 mL 洗脱液浓缩1次，用薄层层析硅胶板分析，合并极性相似流分，得到11（7 mg）、12（8 mg）、13（7 mg）、14（7 mg）、15（6 mg）、16（6 mg），结合理化性质，通过1H-NMR、13C-NMR 等方法对所得化合物的结构进行鉴定。

2 结果与分析

化合物1：白色针状结晶，易溶于氯仿。（1）1HNMR（400 MHz，CDCl3）。δ：5.5（81H，s，H-6），3.6（71H，m，H-3），2.51（1H，ddd，J=13.0、5.0、1.8 Hz，H-4α），2.40（1H，m，H-4β），2.22（1H，t，J=11.8 Hz，H-8），2.02（1H，dt，J=12.8、4.0 Hz，H-12β），1.21（3H，s，H-19），0.92（3H，d，J=5.8 Hz，H-21），0.85（3H，d，J=7.2 Hz，H-27），0.83（3H，t，J=10.2 Hz，H-29），0.81（3H，d，J=7.2 Hz，H-26），0.66（3H，s，H-18）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：202.2（C-7），165.1（C-5），126.0（C-6），70.5（C-3），54.6（C-17），49.9（C-9，C-14），45.7（C-8），45.2（C-24），43.0（C-13），41.6（C-4），38.6（C-12），38.2（C-10），36.4（C-1），35.8（C-20），34.0（C-22），30.8（C-2），28.9（C-25），27.8（C-16），26.3（C-15），25.9（C-23），23.0（C-28），21.1（C-11），20.0（C-26），18.9（C-27），18.8（C-21），17.2（C-18），11.9（C-19，C-29）。以上数据与文献[5]报道基本一致，故鉴定为7-羰基-β-谷甾醇。

化合物2：淡黄色油状物，易溶于氯仿。（1）1HNMR（400 MHz，CDCl3）。δ：6.88（1H，m，H-6），6.66（2H，m，H-2，5），5.95（1H，m，H-8），5.07（2H，m，H-9a，-9b），3.86（3H，s，3-OCH3），3.30（2H，d，J=6.4 Hz，H-7）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：145.2（C-3），143.8（C-4），137.7（C-8），131.5（C-1），120.9（C-6），116.0（C-9），115.1（C-5），110.9（C-2），56.2（3-OCH3），39.7（C-7）。以上数据与文献[6]报道基本一致，故鉴定为丁香酚。

化合物3：白色粉末，易溶于氯仿。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：4.70（1H，m，J=2.4 Hz，H-29），4.58（1H，m，H-29），3.19（1H，dd，J=4.8、12.0 Hz，H-3），1.69（3H，s，H-30），1.00（3H，s，H-26），0.98（3H，s，H-23），0.94（3H，s，H-27），0.84（3H，s，H-25），0.79（3H，s，H-28），0.74（3H，s，H-24）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：150.9（C-20），109.5（C-29），79.0（C-3），55.9（C-5），50.1（C-9），48.4（C-18），48.0（C-19），43.0（C-17），42.8（C-14），40.6（C-8），39.8（C-22），39.0（C-4，-1），37.8（C-13），37.0（C-10），35.5（C-16），34.1（C-7），30.0（C-21），28.0（C-23），26.9（C-2，-15），25.0（C-12），21.0（C-11），19.0（C-30），18.0（C-6，-28），16.0（C-25，-26），15.1（C-24），13.9（C-27）。以上数据与文献[7]报道基本一致，故鉴定为羽扇豆醇。

化合物4：白色粉末，易溶于氯仿。（1）1H-NMR（400 MHz，CDCl3）。δ：7.70（1H，d，J=15.8 Hz，H-β），7.44（2H，d，J=8.2 Hz，H-2，H-6），6.86（2H，d，J=8.2 Hz，H-3，-5），6.34（1H，d，J=15.8 Hz，H-α），3.84（1H，s，-OCH3）。（2）13C-NMR（100 MHz，CDCl3）。δ：167.9（C=O），157.8（C-4），144.6（C-β），129.8（C-3，-5），127.2（C-1），115.9（C-2，-6），115.2（C-α），52.0（-OCH3）。以上数据与文献[8]报道基本一致，故鉴定为对羟基桂皮酸甲酯。

化合物5：白色粉末，易溶于1 ∶1 氯仿- 甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：7.40（1H，s，H-3），5.80（1H，s，H-7），5.10（1H，d，J=7.8 Hz，H-1），4.32（1H，d，J=14.4 Hz，H-10），4.18（1H，d，J=14.4 Hz，H-10），2.90（1H，m，H-5），2.68（1H，t，J=7.8 Hz，H-9），2.10（1H，m，H-6），1.78（1H，m，H-6），4.68（1H，d，J=7.8 Hz，H-1’），3.20 ～3.90（4H，m，H-2’～5’），3.88（1H，d，J=12.8 Hz，H-6’），3.70（1H，dd，J=12.8 Hz，5.0 Hz，H-6’）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：170.0（-CO），153.1（C-3），145.0（C-8），127.9（C-7），109.9（C-4），99.8（C-1’），97.8（C-1），77.9（C-3’），75.1（C-2’），71.4（C-4’），68.2（C-5’），62.2（C-6’），61.8（C-10），47.0（C-9），39.8（C-6），36.9（C-5）。上述数据与文献[9]报道基本一致，故鉴定为栀子酸。

化合物6：黄色针状结晶，易溶于丙酮。（1）1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）。δ：7.40（1H，dd，J=8.4、1.8 Hz，H-6’），7.39（1H，d，J=1.8 Hz，H-2’），6.86（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），6.66（1H，s，H-2），6.42（1H，s，H-8），6.17（1H，s，H-6）。（2）13C-NMR（100 MHz，Acetone-d6）。δ：181.4（C-4），164.2（C-7），163.9（C-2），161.3（C-9），157.2（C-5），149.6（C-4’），145.6（C-3’），122.0（C-6’），119.8（C-1’），115.8（C-5’），113.8（C-2’），103.4（C-10），103.0（C-3），98.6（C-6），93.7（C-8）。以上数据与文献[6,8]报道基本一致，故鉴定为木犀草素（luteolin）。

化合物7：淡黄色粉末，易溶于丙酮。（1）1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）。δ：7.90（2H，d，J=8.2 Hz，H-2’，-6’），6.90（2H，d，J=8.2 Hz，H-3’，-5’），6.76（1H，s，H-3），6.45（1H，s，H-8），6.14（1H，s，H-6）。（2）13C-NMR（100 MHz，Acetone-d6）。δ：163.8（C-2），102.4（C-3），181.2（C-4），156.9（C-5），98.6（C-6），163.9（C-7），93.8（C-8），160.9（C-9），109.9（C-10），120.8（C-1’），128.4（C-2’，-6’），115.6（C-3’，5’），160.8（C-4’）。以上数据与文献[10-11]报道基本一致，故鉴定为芹菜素（apigenin）。

化合物8：黄色针状结晶，易溶于丙酮。（1）1H-NMR（400 MHz，Acetone-d6）。δ：7.83（1H，s，H-2’），7.71（1H，d，J=8.4 Hz，H-6’），7.00（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），6.53（1H，s，H-8），6.27（1H，s，H-6）。（2）13C-NMR（100 MHz，Acetone-d6）。δ：176.6（C-4），165.0（C-7），162.3（C-9），157.8（C-5），148.4（C-2），147.0（C-4’），145.9（C-3’），136.8（C-3），123.8（C-1’），121.5（C-6’），116.2（C-5’），115.8（C-2’），104.2（C-10），99.2（C-6），94.5（C-8）。以上数据与文献[12]报道基本一致，故鉴定为槲皮素（quercetin）。

化合物9：无色晶体，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：9.59（1H，d，J=7.6 Hz，-CHO），7.41（1H，d，J=16.0 Hz，H-7），7.08（1H，d，J=8.0、2.0 Hz，H-6），7.03（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），6.92（1H，d，J=8.0 Hz，H-5），6.60（1H，d，J=16.0、7.6 Hz，H-8），3.92（3H，s，3-OCH3）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：194.0（-CHO），152.9（C-7），149.2（C-4），149.3（C-3），126.8（C-1），126.2（C-8），123.6（C-6），115.1（C-5），108.9（C-2），55.8（-OCH3）。以上数据与文献[13]报道基本一致，故鉴定为松柏醛。

化合物10：无色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：9.58（1H，d，J=7.8 Hz，-CHO），7.58（1H，d，J=15.8 Hz，H-7），6.99（2H，s，H-2，-6），6.68（1H，dd，J=15.8、7.8 Hz，H-8），3.90（6H，s，3-，5-OCH3）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：196.2（-CHO），156.5（C-8），150.8（C-3，-5），140.8（C-4），127.2（C-7），126.7（C-1），107.8（C-2，-6），57.2（3，5-OCH3）。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为芥子醛。

化合物11：浅黄色晶体，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：6.29（1H，d，J=6.6 Hz，H-3），5.69（1H，s，H-1），4.95（1H，d，J=6.6 Hz，H-4），4.58（1H，d，J=7.9 Hz，H-1’），3.90（1H，d，J=10.2 Hz，H-6b’），3.68（1H，d，J=4.0 Hz，H-6），3.66（1H，dd，J=10.2、4.8 Hz，H-6a’），3.39（1H，d，J=9.0 Hz，H-3’），3.29（1H，t，J=4.8 Hz，H-5’），3.27（1H，d，J=7.9 Hz，H-4’），2.54（1H，s，H-9），3.18（1H，t，J=9.0 Hz，H-2’），1.88（1H，dd，J=12.8、3.8 Hz，H-7b），1.79（1H，dd，J=12.8、3.8 Hz，H-7a），1.20（3H，s，H-10）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：142.3（C-3），108.0（C-4），99.2（C-1′），92.8（C-1），77.9（C-8，-5′，-3′），77.1（C-6），74.5（C-2′），73.5（C-5），71.5（C-4′），62.5（C-6′），59.3（C-9），46.9（C-7），24.9（C-10）。以上数据与文献[15]报道基本一致，故鉴定为哈巴苷。

化合物12：白色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：6.38（1H，d，J=6.6 Hz，H-3），6.09（1H，s，H-1），4.93（1H，dd，J=6.6、1.4 Hz，H-4），4.60（1H，d，J=8.0 Hz，H-1′），3.89（1H，dd，J=12.0、1.4 Hz，H-6′b），3.72（2H，m，H-6，H-6′a），3.40（1H，m，H-5′），3.22（1H，t，J=8.0 Hz，H-2 ′），2.88（1H，s，H-9），2.20（1H，d，J=15.2 Hz，H-7b），2.02（3H，s，-COCH3），1.96（1H，dd，J=15.2、4.6 Hz，H-7a），1.50（3H，s，H-10）。（2）13C-NMR（100MHz，CD3OD）。δ：172.8（-COCH3），143.8（C-3），107.0（C-4），100.0（C-1′），94.2（C-1），88.5（C-8），77.8（C-6），77.4（C-5′，-3′），74.2（C-2′），73.2（C-5），71.4（C-4′），63.0（C-6′），55.4（C-9），46.0（C-7），22.4（C-10），21.8（-COCH3）。以上数据与文献[16]报道基本一致，故鉴定为8-O-乙酰哈巴苷。

化合物13：淡黄色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：7.92（2H，d，J=8.2 Hz，H-2’，-6’），6.92（2H，d，J=8.2 Hz，H-3’，-5’），6.86（1H，s，H-3），6.82（1H，s，H-8），6.44（1H，s，H-6），5.02（1H，d，J=7.0 Hz，H-1’’），3.14-3.86（6H，m，H-2’’，-6’’）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：181.8（C-4），164.2（C-7），162.8（C-2），161.0（C-4′），160.8（C-5），158.0（C-9），128.6（C-2′，-6’），120.8（C-1’），115.9（C-3’，-5’），105.0（C-10），102.9（C-3），100.2（C-1’’），99.4（C-6），95.0（C-8），77.1（C-3’’），76.9（C-5’’），73.1（C-2’’），69.8（C-4’’），60.6（C-6’’）。以上数据与文献[6]报道基本一致，故鉴定为芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物14：黄色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：7.40（2H，d，J=8.0 Hz，H-2’，-6’），6.89（1H，d，J=8.2 Hz，H-5’），6.57（1H，s，H-3），6.50（1H，s，H-8），4.8（81H，m，H-1″），4.2（01H，t，J=.8.8 Hz，H-2″），3.90（1H，dd，J=11.8、2.2 Hz，H-6a″），3.75（1H，dd，J=11.8、5.4 Hz，H-6b″），3.45 ～3.49（2H，m，H-3″，-4″），3.39～3.43（1H，m，H-5″）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：184.0（C-4），166.1（C-2），162.0（C-7），158.6（C-5，-9），151.0（C-4’），147.0（C-3’），122.9（C-1’），119.7（C-6’），116.7（C-5’），114.0（C-2’），109.1（C-6），105.0（C-10），103.7（C-3），95.2（C-8），81.9（C-5″），80.1（C-3″），75.1（C-1″），71.9（C-2″），71.6（C-4″），62.7（C-6″）。以上数据与文献[14,17]报道基本一致，故鉴定为异荭草苷。

化合物15：黄色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：8.51（2H，d，J=9.0 Hz，H-2’，-6’），7.30（2H，d，J=9.0 Hz，H-3’，-5’），7.00（1H，m，H-1″），6.93（1H，s，H-6），6.80（1H，s，H-8），4.58（1H，d，H-6″a），4.38（4H，m，H-2″，-4″，-3″，-6″b），4.32（1H，m，H-5″）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：179.1（C-4），166.2（C-7），163.1（C-2），162.0（C-4’），158.0（C-9），156.8（C-5），134.9（C-3），132.1（C-2’，-6’），122.2（C-1’），115.8（C-3’，-5’），104.8（C-10），104.2（C-1 ″），100.2（C-6），95.0（C-8），79.2（C-3″），78.8（C-5″），75.9（C-2″），70.9（C-4″），62.4（C-6″）。以上数据与文献[11,17]报道基本一致，故鉴定为山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物16：黄色粉末，易溶于甲醇。（1）1H-NMR（400 MHz，CD3OD）。δ：14.48（1H，s，5-OH），8.31（2H，d，J=8.6 Hz，H-2’，-6’），7.30（2H，d，J=8.6 Hz，H-3’，-5’），6.58（1H，s，H-3），5.90（1H，d，J=9.6 Hz，H-1″），5.00（1H，d，J=9.6 Hz，H-1″’）。（2）13C-NMR（100 MHz，CD3OD）。δ：183.0（C-4），164.2（C-2），162.7（C-7），161.9（C-5），159.8（C-9），149.8（C-4′），128.9（C-2’，-6’），121.9（C-1′），117.0（C-3′），116.4（C-5′），107.8（C-6），105.9（C-3），104.8（C-8），102.8（C-10），82.8（C-5’″），81.9（C-5″），80.6（C-3’″），79.9（C-3″），75.8（C-1″），74.8（C-1’″），73.8（C-4’″），73.0（C-4″），71.8（C-2″），69.8（C-2’″），62.5（C-6″），61.1（C-6’″）。以上数据与文献[18]报道基本一致，故鉴定为芹菜素-6,8-二-C-β-D-吡喃葡萄糖苷。