采精频率对长白种公猪精液品质的影响

2023-03-08易宗容李雪梅雷美红刘桂英冯堂超

中国饲料 2023年4期

易宗容，李雪梅，雷美红，刘桂英，冯堂超，阳刚

（1.宜宾职业技术学院，四川宜宾 644000；2.西南大学，重庆市 400715；3.叙州区农业农村局，四川宜宾 644000；4.宜宾市农业农村局，四川宜宾 644000）

种公猪精液品质优劣直接影响母猪受胎率、产仔数、断奶存活率和断奶窝重等指标（梅军四等，2016），种公猪精液品质受遗传、年龄、饲养管理、营养水平、疾病等因素的影响（胡国娟，2020）。采精频率在近几年逐步成为影响精液品质的一个关键因素和重要研究对象，采精频率根据种公猪的年龄、饲养水平、生长发育程度和使用年限等因素进行确定。采精频率过低，附睾内会贮藏大量精液，精子密度偏，造成精子高死亡率；采精频率过高，其附睾内的精子数量较少或成熟率较低，会造成生产效率低下。本试验利用计算机辅助精液分析仪对试验长白种公猪的精子活力、密度、精子结构完整性和精液量等进行研究，有效揭示不同采精频率对长白种公猪精液品质的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物精液种公猪体型健硕、个体发育良好、健康的成年长白种公猪（18～24月龄），精液专人徒手采集。猪精液稀释粉（葡萄糖、柠檬酸钠、EDTA、抗生素）、蒸馏水、乙醇、乙酸异戊脂、2.5%戊二醛、PBS缓冲液。

1.1.2 试验仪器高温高压蒸汽灭菌锅、恒温水浴锅、电子分析天平、恒温箱、磁力搅拌器、移液枪、光学显微镜、离心机、扫描电子显微镜、计算机辅助精液分析仪（CASA）、CO2临界点干燥仪。

1.2 方法

1.2.1 测定项目及方法按照1、2、3、4、5次/周的采精频率采精，采精时间9：00～10：00，由专人采精，试验准备期为1周，所有种公猪集中采精一次，然后统一饲养管理标准集中饲养且不采精，每次完成种公猪采精后立即送检。通过CASA检测精子的活率、活力、密度及精子运动性能等指标，使用扫描电子显微镜检测精子畸形数和顶体完整性指标，电子分析天平准确称量精液质量（换算方式：1 g=1 mL）。

1.2.2 统计与分析使用IBM SPSS Statistics 22.0软件对试验数据进行显著性分析，试验结果以“Mean±SD”表示结果。P＞0.05表示组间差异显著。

2 结果分析

2.1 采精频率对精子密度、活力及精液量等的影响由表1可知，种公猪精液的密度、活力、活率随采精频率增加呈先升后降的趋势，采精频率为3次/周时，各指标均达到最高值。采精频率为3次/周的精子密度与1、2及5次/周的精子密度有显著差异（P＞0.05），与4次/周时差异不显著（P＞0.05）。采精频率为3次/周时，精子活力与精子活率达到峰值，显著高于5次/周（P＞0.05）。采精频率为1次/周时精液量达到峰值，与2、3和4次/周时差异不显著（P＞0.05）。精子总数在采精频率为3次/周时达到峰值，与1、2和4次/周时差异不显著（P＞0.05），但显著高于5/周时（P＞0.05）。

表1 采精频率对长白种公猪精液各参数的影响

2.2 采精频率对精子顶体完整性的影响由图1可知，种公猪采精频率为1、2和3次/周时，顶体完整性分别为95%、94%和93%，三者差异不显著（P＞0.05），但显著高于4次/周（89%）和5次/周（87%）时的精子顶体完整性（P＞0.05）。

图1 采精频率对长白种公猪精子顶体完整性的影响

2.3 采精频率对精子畸形率的影响由图2可知，精子畸形率在采精频率5、4次/周时分别高达19%和16%，差异不显著（P＞0.05）；在采精频率为3次/周时的畸形率为12%，与其余4次采精频率差异显著（P＞0.05）；采精频率在1、2次/周时的精子畸形率分别是3%和4%。有研究表明，公猪精液畸形率一般不高于18%，否则会影响后代质量与母猪产仔数（梅军四等，2016）。

图2 采精频率对长白种公猪精子畸形率的影响

2.4 采精频率对精子运动性能的影响由表2可知，精子的VCL、VAP、VSL指标会随采精频率的增加而出现先升后降的变化，VCL和VSL在3次/周时达到最高，而VAP在4次/周时达到最高值，该3项运动性能指标在采精频率为3、4次/周时与采精频率为1、2和5次/周时差异显著（P＞0.05）；LIN和STR指标随着采精频率的增加逐渐下降，在频率为5次/周时有轻微上升趋势。WOB、BCF、MAD等指标均随采精次数的增多而降低，其中1次/周时显著高于其余4次采精频率（P＞0.05）。CMS运动参数随着采精频率提高出现先下降后上升的趋势，且频率为1次/周时显著高于其余4次采精频率的参数值（P＞0.05）。PMS运动参数随采精次数增加呈先增后减的变化，采精频率为5次/周时显著低于其余4次采精频率所测出的参数值（P＞0.05）。此外，ALH这一参数与采精频率之间未发现规律性变化。

表2 采精频率对长白种公猪精子运动性能的影响

3 讨论

3.1 采精频率对长白种公猪精液品质基本参数的影响本试验结果显示，随着采精频率的提高，精子的密度、活力、活率、精子总数4个指标总体呈先上升后下降的趋势，而且均在采精频率为3次/周时达到最大。就精液量而言，没有表现出规律性变化，精液量在采精频率为1次/周时最多，5次/周时最少。在本次检测的5项精子基本参数中，有4项参数都是在采精频率为3次/周时达到最大，均显著高于采精频率为4、2次/周时。因此，本试验认为，最佳的采精频率为3次/周。而阳文攀等（2021）研究发现，公猪采精间隔为5、7 d时精子活力较高，本试验结果未能明显反映较长时期的精子活力变化趋势，可能是由于试验时间不足导致的。赵辉玲等（2022）研究表明，采精量会随采精频率的提高而呈下降趋势；有研究发现，不同品种猪的精液量与精子密度呈现负相关（KNECHT等，2014），在本试验中没有明显表现，可能是由于试验过程和饲养管理的差异造成的。Simtal等（2004）认为，采精频率过于频繁会使公猪性欲与精子数目下降，因此将采精间隔控制在2～5 d为最佳。

本次试验发现，采精频率为4、5次/周时，精子顶体完整性显著下降，采精频率为3次/周时，精子畸形率显著上升，因为随着采精频率的提高，精子细胞发育不成熟，结构和功能还没有发育完全，从而引起精子出现各种畸形形态，而且当采精频率为5次/周时，精子畸形率为19%，超过18%的国家标准。

综上所述，为了提高猪场种公猪的精液品质和利用率，在采精频率为3次/周时，精液品质最佳；在采精频率为4、2次/周时，精液品质次之。

3.2 采精频率对长白种公猪精液运动性能的影响 Donnelly等（1998）研究发现，精子活力较高时，精子的运动性能比较强，和其相关的运动参数也会随之提高。在本试验中，精子的VCL、VAP、VSL指标会随采集精液频率的增加而表现出先增加后下降的趋势，在3、4次/周时，以上3个指标达到最高，说明精子运动性能在这两个采精频率时最佳。VCL、VAP、VSL指数越高，精子活力越好，运动性能越好，受精率越高，说明精子的活力、密度与精子总数与精子的VCL、VAP、VSL之间有关联。在本试验中，VCL、VAP、VSL等指标在3、4次/周时达到最高。