结直肠癌患者HOXA9、FGFR1基因表达情况及临床意义研究

郑华雨

河南省滑县人民医院病理科 456400

结直肠癌(CRC)是我国发病率第2位的常见恶性肿瘤，多见于中老年群体，近年来我国CRC发病率逐年上升，且出现年轻化趋势[1-2]。目前CRC患病机制尚未完全明确，研究显示，多种癌基因、抑癌基因共同参与调控其发生发展[3]。同源盒A9(HOXA9)是HOX基因A簇中的成员之一，有证据表明其在结肠癌病灶内表达明显升高，可能促进结肠癌恶性转变过程[4]。成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)是一类具有自身磷酸化活性的受体酪氨酸激酶，在多种恶性肿瘤组织中呈高表达[5]，但其在CRC中的作用机制尚未明确。基于此，本文探讨HOXA9、FGFR1水平变化与CRC患者临床分期的相关性。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 经我院伦理委员会审批通过，选取2017年8月—2018年8月我院110例CRC患者，其中男62例，女48例；年龄47～81岁，平均年龄(56.73±7.54)岁；临床分期(TNM分期)：Ⅰ期21例，Ⅱ期28例，Ⅲ期41例，Ⅳ期20例；肿瘤类型：腺癌102例，鳞腺癌8例；分化程度：高分化18例，中分化34例，低分化58例。CRC临床分期、肿瘤类型、分化程度均参照《中国结直肠癌诊疗规范(2017年版)》[6]判定。1.2 选例标准 (1)纳入标准：①参照《中国结直肠癌诊疗规范(2017年版)》[6]诊断为CRC，并经病理诊断确诊；②首次检出；③未接受相关治疗；④患者知晓本研究，已签署同意书。(2)排除标准：①合并其他原发恶性肿瘤者；②自身免疫性疾病患者；③血液系统疾病患者；④具有明显炎症细胞浸润癌旁组织者。

1.3 方法 所有研究对象均行手术或组织活检采集癌组织标本及癌旁(距病灶边缘>5cm，且病理结果显示无癌细胞)正常组织标本，取组织标本，采用Trizol溶液(购自上海名劲生物科技有限公司)提取组织总RNA，采用反转录试剂盒(购自赛默飞世尔科技)进行反转录，合成cDNA，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测癌组织、癌旁正常组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况，qRT-PCR试剂盒购自北京华夏远洋科技有限公司，引物设计：HOXA9 mRNA上游引物5’-TGTCCCTGACTGACTATGCTT-3’，下游引物5’-TGCTCGGTCTTTGTTGATTTT-3’；FGFR1 mRNA上游引物5’-GGCTGTATGAAAAGGGTGGGAATG-3’，下游引物5’-GGTGCGTCGTGAGGTCTGG-3’；以GAPDH为内参基，上游引物5’-ATTGGAACGATACAGAGAAGATT-3’，下游引物5’-GGAACGCTTCACGAATTTG-3’。因引物均由上海生工生物工程股份有限公司合成。反应条件：95℃10min；(95℃15s、60℃30 s、72℃30s)×40个循环。应用公式2-ΔΔct计算HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA相对表达水平。

1.4 观察指标 (1)癌组织、癌旁正常组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况。(2)不同临床分期CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况。(3)分析HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达与CRC患者临床分期的相关性。(4)不同预后CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况。

1.5 统计学方法 数据处理采用SPSS22.0软件，计量资料以均数±标准差描述，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验，两组间比较采用独立样本t检验。相关性分析采用Spearman相关系数模型。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 癌组织、癌旁正常组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较 CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量均较癌旁正常组织高(P<0.05)。见表1。

表1 癌组织、癌旁正常组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较

2.2 不同临床分期癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较 随着CRC患者临床分期升高，癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量逐渐升高(P<0.05)。见表2。

表2 不同临床分期癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较

2.3 HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达与临床分期的相关性 通过Spearman相关系数模型验证，发现CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量与临床分期间存在正相关关系(r=0.601、0.574，P均<0.05)。

2.4 不同预后癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较 110例CRC患者随访过程中失访3例(家庭住址变迁、联系方式变更)，完成随访的107例患者中，死亡21例，生存86例，生存率为80.37%(86/107)。死亡患者入院时癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量均较生存患者高(P<0.05)。见表3。

表3 不同预后癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达比较

3 讨论

CRC患病早期症状不明显，多数患者确诊时已进展至中晚期，近年来CRC在临床诊断及治疗上已取得新突破，但患者远期生存率仍较低[7]。探寻新的分子标记物作为CRC的早期诊断、治疗及预后评估的参考依据，一直是临床研究的重点。

研究显示，HOXA是人体组织器官正常发育必需的蛋白，其基因表达异常可引发多种疾病，也是导致恶性肿瘤发生发展的因素之一[8]。HOXA9是HOXA家族的主要成员，HOXA9蛋白在膀胱癌组织中的表达上调，与临床特征及预后关系密切，可为临床治疗提供新思路[9]。本文结果显示，CRC患者癌组织中HOXA9 mRNA表达量明显高于癌旁正常组织，且与CRC患者临床分期呈正相关，说明HOXA9 mRNA在CRC的发生发展过程中可能发挥正向调节作用，推测HOXA9 mRNA表达升高可能促进肿瘤细胞的增殖。新近研究发现，CRC癌组织中HOXA9 mRNA与FGFR1 mRNA表达量呈正相关，两者可能共同促进CRC的发展[10]。本文结果显示，CRC患者癌组织中FGFR1 mRNA表达量均高于癌旁正常组织，与上述研究结果一致，且FGFR1 mRNA表达量与患者临床分期间存在正相关关系，提示FGFR1 mRNA在CRC发生发展过程中也可能发挥促癌作用。FGFR1被证实是一种血管源性生长因子受体，与血管形成及维持血管通透性密切相关，其基因表达增加可通过上调FGFR1蛋白水平促进肿瘤新血管生成，为肿瘤的发生发展提供有利条件[11]。相关研究显示，敲减FGFR1基因表达可通过影响PI3K/AKT信号通路抑制婴幼儿血管瘤内皮细胞的活力，并诱导其凋亡，阻碍细胞迁移和侵袭，从而控制肿瘤进展[12]。结合本文结果推测抑制HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达可能作为控制CRC发生发展的新靶点。此外，本文进一步探讨了HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达与CRC患者远期预后的关系，发现预后为死亡患者入院时癌组织中HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达量明显高于生存患者，提示两者表达升高可增加患者病死率，推测早期检测HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA表达情况可作为判断CRC患者预后的生物学指标。

综上所述，HOXA9 mRNA、FGFR1 mRNA在CRC患者癌组织过表达，其表达量与患者临床分期及预后密切相关。