一例鸡球虫病的诊断与防治

●罗世民（怀化职业技术学院 湖南 怀化 418000）

鸡球虫病是由几种艾美耳属球虫寄生于鸡肠道上皮细胞所引起的一种常见的烈性原虫病[1]，是在鸡养殖过程中最为常见且危害十分严重的寄生虫病。病鸡感染该病后，往往出现羽毛脏乱、肉髯苍白、食欲不振、下痢、血便及体重减轻等一系列临床症状，严重感染则会导致死亡[2]。各个品种及日龄段的鸡均易感，但主要危害雏鸡，成年鸡对球虫有一定的抵抗力。15～50日龄的雏鸡发病率最高，死亡率可高达80%以上[2-3]，给养殖户造成极大的经济损失。成年鸡感染后不出现明显的病理症状，但出现生长发育受阻和生产性能下降等情况[4]，常被养殖户忽视而成为传染源。

患病鸡为主要的传播源，其他被粪便污染过的器物均可成为传染源。例如，被带有鸡球虫卵囊的粪便污染的饲料、鞋子、衣服、饮水、土壤及器具均可传播鸡球虫病，某些昆虫也可成为该病的传播媒介。然而，鸡球虫的孢子化卵囊对常用消毒剂和外界环境具有极强的抵抗力，一般常用的消毒剂不能使其失活，其可在土壤中存活4～9 个月而不失感染力，如在树荫遮蔽的地方可存活15～18 个月。温度对鸡球虫的孢子化卵囊影响很大，如环境温度超过36℃，孢子化率大幅下降；如超过40℃，鸡球虫孢子化卵囊停止发育；在65℃环境下，孢子化卵囊只能存活几秒钟。此外，环境湿度对孢子化卵囊生长发育也影响较大，鸡球虫的孢子化卵囊不耐干燥，曾有学者将鸡球虫的孢子化卵囊于干燥、室温的环境下放置1 d，鸡球虫则失去孢子化能力，丧失全部感染力，潮湿、多雨且气温较高的夏季是鸡球虫病的暴发期，尤其是梅雨季节。鸡球虫病的传播途径为消化道传播，故而饲养管理条件差，鸡舍潮湿、拥挤、不通风，易诱发该病的发生，且根据鸡球虫的生物属性，鸡场一旦发生鸡球虫病很难彻底根治。

鸡球虫病对鸡影响巨大，一旦感染，病愈后也会造成鸡后期生长缓慢，产蛋率下降[1]，还能诱发其他疾病[5]。

1 发病情况

2017年6月17日，湖南娄底市新化县某养殖户（饲养规模为2000 羽）反映在其所饲养的鸡群中出现异常状况。大部分雏鸡表现出如羽毛蓬松、脏乱、精神萎顿、闭眼缩颈、鸡冠、脸及肉髯苍白、食欲不振或废绝、频频拉血痢及体重渐行性消瘦等临床症状。一部分成年鸡也出现腹泻、体重减轻、产蛋量下降等临床症状。该养殖户曾使用阿莫西林、恩诺沙星等抗生素对病鸡进行治疗，但病情未得好转和控制，反而愈加严重。

2 临床症状

大部分发病的雏鸡表现出羽毛蓬松、无光泽且脏乱，精神沉郁或萎顿，闭眼缩颈，喜堆积在一起，不愿运动，头低垂，食欲不振或废绝，嗉囊充满酸臭味液体，倒提可从口中流出，鸡冠、眼睑及肉髯苍白，下痢带血及渐行性消瘦等症状，且多于排出胡萝卜色粪便后的1～2 d内死亡。成年鸡无明显的病理症状，主要表现出轻度腹泻、体重减轻、停止产蛋等症状。

3 剖解及病理变化

随机挑选1 只濒临死亡的病鸡进行解剖。通过临床检查发现，病鸡体格消瘦、羽毛蓬松、杂乱且无光泽、肛门附近的羽毛有粪便附着。盲肠明显肿大，为正常的3～5 倍，外观呈棕红色或暗红色，质地比正常坚实，腔内充满含暗红色血液的内容物。剖解盲肠，可见盲肠内充满血凝块等坏死物，肠黏膜有弥漫性出血点，一些部位的黏膜发生严重糜烂和脱落。部分小肠黏膜上附有一层黄绿色假膜，后段肠管的肠黏膜增厚，内含大量黏液，充满气体。

4 诊断

4.1 初步诊断

根据临床症状、养殖户用药情况及在显微镜下观察到的卵囊形状，初步诊断为鸡球虫病。

4.2 分子生物学诊断

收集新鲜的粪便和肠内容物于自封袋中，置于冰盒内，拿回实验室进行分子生物学检测。用粪便基因组DNA 提取试剂盒（购自北京天根生化科技有限公司）提取粪便中的总DNA；将提取的DNA 样品置于-20℃保存备用。

利用鸡球虫ITS-2 的引物ITS-2-F（5'-ACGT CTGTTTCAGTGTCT-3'），ITS-2-R（5'-AAAT-TCA GCGGGTAACCTCG-3'）[6]，分别对粪便及肠内容物DNA 的ITS-2 区域部分序列进行扩增。反应体系为50 μL：高保真酶（Mix）25 μL；ddH2O 22 μL；DNA 模板1 μL；上游引物，1 μL；下游引物，1 μL。反应条件：95℃（预热）5 min；95℃（变性）30 s，53℃（退火）30 s，72℃（延伸）1 min，共35 个循环；最后72℃（延伸）5 min。反应完全后，吸取5 μL PCR 产物在1·5%琼脂糖上进行凝胶电泳检测，结果均为阳性。将PCR 产物进行测序，获得ITS-2 区域的部分序列。

将获得序列进行比对，结果显示两者ITS-2序列的相似度为100%。将序列在GenBank 上进行BLAST 搜索分析，发现所获得的序列与已公布的艾美耳球虫的ITS-2 序列的相似度为99%～100%，从而确定该病原体为艾美耳球虫，由此确诊鸡艾美耳球虫病。

5 治疗

根据分子生物学技术诊断结果，对病鸡和健康鸡群采用氨丙啉、磺胺间二甲氧嘧啶等药物联合用药进行治疗。首先，使用氨丙啉拌料饲喂，对鸡群进行预防性驱虫和治疗，用量为240 mg/kg，1 次/d，连喂7 d[7]；同时，使用磺胺间二甲氧嘧啶拌料饲喂，以防继发性感染，用量为600 mg/kg，连喂3 d，停药2 d，再连喂3 d[8]。此外，于鸡群的饮水中适量添加维生素A 和维生素K，以增强鸡的抗病力[9]。1 周后，该养殖场的病情基本得到控制。

6 预防措施

6.1 加强饲养管理

养殖户在平时的饲养过程中，应当注重饲料的搭配，使其营养均衡；可在饲料中适量添加一定量的维生素和矿物质，提高鸡的抗病能力。

6.2 改善养殖场内的卫生条件

及时清扫鸡舍卫生，及时更换垫料，确保鸡舍的地面常处于干燥状态，并保持良好通风。对鸡排出的粪要置于偏僻处进行堆积发酵[10]。此外，要合理控制鸡群的饲养密度，以防止饲养数量过多，造成拥挤。

6.3 定期消毒

对养殖场内的鸡笼、料槽、饮水器等器具设施定期消毒。使用开水或热碱水对地面进行消毒。同时，要求工作人员在工作前更换衣物和鞋帽，并经消毒后方可开始工作。养殖场实行封闭式管理，禁止外来人员进入，车辆进出养殖场必须消毒，从而切断球虫的传播途径，使发病率降到最低。

6.4 药物预防

在充分了解鸡场发病规律的基础上，于球虫病高发期之前，使用药物对鸡球虫病进行预防。不同时期轮换药物或联合使用2 种以上药物进行预防，以避免球虫产生耐药性。此外，一旦发现病鸡立即隔离、治疗。

6.5 接种疫苗

接种疫苗是一种有效的预防球虫病的措施，在鸡群免疫前后禁止添加抗球虫药物，以免影响疫苗的免疫效果[11]。

7 总结

鸡球虫病是由几种艾美耳属球虫寄生于鸡肠道上皮细胞所引起的一种常见的烈性原虫病。该病主要危害雏鸡，15～50日龄的雏鸡发病率最高，死亡率可高达80%以上。成年鸡感染后不表现明显的病理症状，而且病鸡所表现出来的症状也类似于大肠杆菌病或其他细菌病，极容易误诊。传统的检测技术操作过于繁琐，造成诊治极为不便，利用分子技术检测不仅克服了传统检测技术的缺陷，同时也提高了检测结果的精确性，为养殖户对该病的诊断和治疗提供了便捷有效的途径。