仔猪亚硝酸盐急性中毒致死剂量的探究
2023-02-18陈德纯吉文汇
陈德纯,吉文汇,黄 坚,汤 承*
(1.西南民族大学畜牧兽医学院,四川 成都 610041;2.动物医学四川省高校重点实验室,四川 成都 610041)
亚硝酸盐普遍用于食品加工等行业[1]。机体摄入过量亚硝酸盐,会影响血红蛋白运输氧的过程,亚硝酸盐在机体中可以把氧合血红蛋白氧化为高价铁血红蛋白,失去运输氧气的功能,最终导致各组织器官缺氧[2],出现头晕、昏迷甚至休克等反应,可因呼吸衰竭致死[3]。常有人误食亚硝酸盐中毒的报道[4],中毒后的临床表现有头晕、心悸、呕吐、腹泻等症状。亚硝酸盐中毒也多发生于猪,偶有牛、马、羊等家畜发生[5-6]。目前,关于仔猪亚硝酸盐中毒的已有一些报道,但关于不同剂量引发亚硝酸盐中毒的临床表现和救治效果的研究较少。本试验通过复制仔猪低剂量亚硝酸盐(0.25 g/kg)和高剂量亚硝酸盐(0.50 g/kg)中毒模型,来探究猪亚硝酸盐中毒的发生发展情况,为防治亚硝酸盐中毒提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 试验分组 仔猪45头,分为三组:试验组低剂量组(0.25 g/kg 亚硝酸钠),高剂量组(0.50 g/kg亚硝酸钠)和对照组(等体积的生理盐水),每组3个重复,每个重复5只。
1.2 试剂 分析纯亚硝酸钠(纯度99.0%,成都市科龙化工试剂厂),亚甲蓝注射液(哈尔滨生物制品二厂有限责任公司),维生素C注射液,0.9%生理盐水注射液,犬眠宝注射液。
1.3 临床体征观测 先对仔猪进行系统的检查,包括呼吸系统、消化系统、心血管系统和泌尿系统等的系统检查。测量仔猪安静状态下的体温、脉搏、呼吸数和体重,观察仔猪的可视黏膜及耳血管的颜色,口腔唾液和精神状态,采食和饮水情况,粪便和尿液状况,口腔唾液量和肛门外周分泌物等。
1.4 中毒模型复制 将亚硝酸钠用生理盐水配制成30%溶液浓度。低剂量组按每千克体重0.25 g/kg 灌服,高剂量组按每千克体重0.50 g/kg灌服,对照组灌服等体积的生理盐水。保定者双手擒住猪的耳朵,右肘夹紧仔猪胸腹。术者从仔猪嘴角或口腔正中持灌药器将亚硝酸钠溶液注入猪的口腔深部,另一只手抚摸其咽部促使其吞咽。记录灌服时间,并随时观察仔猪的临床症状如呼吸方式、呼吸数和精神状态等。
1.5 中毒的解救 各组随机选取2只仔猪,待仔猪出现中毒症状的时候,助手用手指压迫猪耳基部阻塞血液流通,使血管充盈怒张,注射者左手抓住猪耳,以10°~15°的角度向近心端刺入血管,如有回血,表示针头已刺入血管,此时放开耳根部,按每千克体重0.2 mL缓慢注入亚甲蓝注射液,同时肌注维生素C注射液6 mL。观察并记录解救效果。
1.6 仔猪的剖检 试验组仔猪因高度呼吸困难窒息而死后,立刻进行剖检;对照组仔猪先用“犬眠宝”麻醉后,心脏注射饱和氯化钾溶液进行安乐死,随后剖检。
1.7 数据分析 用SPSS 19.0软件对数据进行统计,采用单因素方差分析各组间的差异显著性。
2 结果与分析
2.1 生理体征变化 在灌服亚硝酸钠前后,检测试验组和对照组仔猪的体温、心率、呼吸数等情况(详见表1)。
表1 各组仔猪攻毒前后生理体征对比
2.2 试验组仔猪发病情况(表2)低剂量试验组在灌服亚硝酸钠溶液后1.5~2 h发病,口吐白沫,多次呕吐,精神沉郁,呈祈祷姿势有腹痛的表现,后喜卧,逐渐站立不稳,倒地,呼吸困难,呼吸和心率增加。仔猪出现划水样姿势,神经症状明显,出现腹泻排便、排尿5~7 次。眼结膜颜色由粉红色逐渐变白,耳根部和鼻盘由粉色转为蓝紫色,呼吸呈深而大的节律,耳、鼻、四肢厥冷,肌肉战栗,末期出现强直性痉挛,窒息而死。
表2 仔猪发病时间和主要临床症状
高剂量试验组仔猪的发病时间在35~60 min,灌服亚硝酸钠后最早出现的是神经症状,初期正常觅食,不久即站立不稳,共济失调,步态蹒跚,由短时间的精神兴奋立刻转为精神抑制。眼结膜变白,鼻、口腔黏膜、耳根部转为蓝紫色。心跳急速而亢进,呼吸加快,后转为深呼吸。倒地不起,呈划水样姿势,抽搐,角弓反张,四肢厥冷,眼结膜变为蓝紫色,肌肉战栗,强直性痉挛,库斯茂尔氏呼吸,迅速死亡。
低、高剂量试验组出现中毒症状的时间差异较大,同组猪只同时或相继发生。低剂量试验组仔猪在灌服亚硝酸钠2 h 内相继出现症状,中毒发生时间比高剂量试验组的长。对照组仔猪用生理盐水灌胃后行为正常,未出现明显异常。
2.3 解救后的临床症状 低剂量组仔猪在神经症状明显的时候,从耳静脉推注亚甲蓝注射液,5~10 min后仔猪呼吸困难有所缓解,后精神状态逐渐好转,约20min后排出淡蓝色尿液。40min后心率、呼吸等生命体征逐渐恢复正常,食欲恢复。
高剂量组仔猪从发病到死亡的时间较短,发病急,救助效果一般,均死亡。
2.4 剖检病理变化 与对照组相比,低剂量和高剂量试验组仔猪的血液呈暗红褐色酱油状,凝固不良,气管黏膜有泡沫状出血;对照组仔猪的肺部未见异常,试验组仔猪的肺脏发生水肿,充血,甚至有出血斑;对照组仔猪的胃底黏膜未见异常,试验组仔猪的胃底黏膜大面积充血、脱落;对照组仔猪的脾脏未见异常,试验组仔猪的脾脏、肝脏和肾脏呈紫黑色,心外膜上有出血点。
3 讨论
亚硝酸盐主要从氧化作用和扩张血管两个方面引发机体损伤。首先,亚硝酸盐使血液中的二价铁血红蛋白氧化成三价铁血红蛋白[7],这种转化是可逆的,少量亚硝酸盐引发的高铁血红蛋白数量较少时,机体可自行解毒,但当约30%以上的高铁血红蛋白存在时,仔猪就表现出明显的中毒症状[8],当高铁血红蛋白浓度达60%~70%时就会引起死亡,且病程发展较快,死亡率高。因高价铁血红蛋白不能输送氧,且抑制氧合血红蛋白释放氧,阻碍氧的输送和利用,从而引发全身组织器官缺氧[9]。其次,亚硝酸盐使仔猪末梢血管发生扩张而导致血压下降,外周循环衰竭,这是仔猪耳鼻、四肢等发生厥冷的原因。亚硝酸盐对消化道具有强烈的刺激作用,导致低剂量组和高剂量组仔猪的胃底黏膜均发生大面积充血、出血,胃黏膜脱落。低剂量组仔猪出现流涎、口吐白沫、呕吐、腹痛、腹泻等症状。
有研究表明,摄入0.2 g以上的亚硝酸盐就可引发中毒,3 g以上则可致死亡[10]。生产实践中对仔猪亚硝酸盐中毒应重在预防,改善青绿饲料的加工和堆放方式,青绿饲料尽量生喂,不宜放置过久,生、熟青绿饲料应摊开敞放,避免长期堆放;避免采割施用重氮肥或农药的青饲料,减少硝酸盐或亚硝酸盐的摄入;避免摄入含硝酸盐较多的田水或青草沤肥的坑水。
4 结论
本研究复制了仔猪亚硝酸盐中毒模型,低剂量组仔猪灌服亚硝酸钠后的发病时间较高剂量组时间长,最先出现消化系统症状如流涎、呕吐、腹泻等;高剂量组仔猪最初表现为神经症状,如站立不稳、共济失调等。低剂量组可被特效解救药亚甲蓝成功救治,而高剂量组发病较快难以解救。尸体剖检发现低、高剂量组仔猪的血液呈暗褐色,凝固不良;胃底黏膜充血、出血和脱落;肝肾脏呈褐色;心包膜有出血斑;肺脏充血、出血。研究结果表明,0.25 g/kg剂量的亚硝酸钠即可导致仔猪急性中毒和死亡。