T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白在小儿支原体肺炎中的表达及临床意义

李翔

（福建省福州市儿童医院检验科，福建 福州 350001）

小儿支原体肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia，MPP）是指由肺炎支原体（Mycoplasma Pneumoniae，MP）引起的儿童急性呼吸道感染，有一定的自限性，好发于学龄前期（3周岁至6～7岁进入小学前）及学龄期（自入小学始至青春期）儿童[1]。临床上以发热、咳嗽为主要表现，偶尔伴有心肌损害、溶血性贫血等呼吸系统症状，以往多采用大环内酯类抗生素治疗[2]。由于小儿免疫功能低下，器官发育尚未完全，因此，一旦发生MPP会影响其生长发育，严重者可发展成重症肺炎和难治性MPP，患儿病情重，病程延长，且易出现肺内外并发症，部分还可遗留后遗症，应尽快采取有效针对性措施抑制其炎症介质，组织机体免疫过度反应对自身的破坏，减轻细胞损伤[3]。近年来有研究报道，T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白参与肺炎免疫反应与炎症反应的全过程，且免疫球蛋白在儿科肺炎治疗中的作用越来越重要，可有效改善患儿免疫球蛋白水平，提高临床治疗效果，但目前临床对T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白水平评估病情程度的研究较少[4]。基于此，本文主要探讨T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白在MPP中的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年7月至2022年7月本院收治的98例MPP患者作为研究对象的观察组，选取同期入院体检且各项指标正常的80例健康儿童作为研究对象的对照组，对他们的临床资料进行回顾性分析。本研究获得医学伦理委员会同意批准。观察组中女42例，男56例；年龄2～10岁，平均5.05±1.48岁；其中轻症肺炎62例，重症肺炎36例。纳入标准：符合MPP诊断标准[5]；患儿经临床表现、影像学特征结合病原学检查确诊为MPP；临床资料完整。排除标准：有严重造血系统疾病和传染病者；合并心、肺、肝、肾等其他脏器并发症者；合并恶性肿瘤和全身感染者；存在认知功能障碍和心理问题者。对照组中女37例，男43例；年龄3～11岁，平均6.12±0.79岁。两组儿童男女比例和年龄分布差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集观察组患儿入院时和对照组健康儿童体检时清晨空腹静脉血。对比两组外周血T淋巴细胞亚群检测情况、血清免疫球蛋白水平、炎症细胞因子水平。分析观察组中T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白表达与疾病严重程度之间的相关性。

1.3 观察指标

1.3.1 炎性细胞因子检测

采集清晨空腹静脉血3 mL，3000 rpm离心10min后收集血清，-20℃冷冻待检。采用酶联免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA）对血清γ-干扰素（Interferon-γ，IFN-γ）、白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、白细胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）水平进行检测

1.3.2 T淋巴细胞亚群检测

采集清晨空腹静脉血2 mL全血，肝素钠抗凝。采用流式细胞仪（购自BD FACSCanto II流式细胞仪）检测CD3+、CD4+、CD8+细胞水平。

1.3.3 免疫球蛋白检测

采集清晨空腹静脉血3 mL，3000 rpm离心10min后收集血清，-20℃冷冻待检。采用免疫比浊法对血清免疫球蛋白G（Immune Globulin G，IgG）、免疫球蛋白A（Immune Globulin A，IgA）、免疫球蛋白M（Immune Globulin M，IgM）水平进行检测（全自动生化分析仪均购自深圳国赛 Aristo全自动特定蛋白分析仪）。

1.3.4 相关性分析

采用Spearman分析观察组中T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白表达及T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白水平变化与疾病严重程度的相关性（判断为相关的指标值）。其中相关系数的数值范围为[-1，1]；判断标准为：1为正相关，-1为负相关，0为不相关。

1.4 统计学方法

数据采用SPSS 28.0软件进行统计学分析。计量资料以均数标准差（±SD）表示，采用t检验；计数资料以例数（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组T淋巴细胞亚群检测情况

两组CD8+细胞水平、CD4+/CD8+值均无明显差异（P＞0.05），观察组CD3+、CD4+细胞水平均明显低于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组T淋巴细胞亚群水平比较（±SD）

表1 两组T淋巴细胞亚群水平比较（±SD）

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别 例 348D4+/CD8+对照组 80 68.29±7.35 38.72±6.30 24.38±5.79 41.53±0.30观察组 98 62.56±6.45a 33.54±5.82a 25.84±5.61 41.40±0.35

2.2 两组免疫球蛋白检测情况

两组血清IgG、IgA水平均无明显差异（P＞0.05），观察组血清IgM水平明显高于对照组（P＜0.05）。见表2。

表2 两组免疫球蛋白水平比较（±SD）

表2 两组免疫球蛋白水平比较（±SD）

注：与对照组比较，aP＜0.05。

组别 例 IgG(g·L-1) IgA(g·L-1) IgM(g·L-1)对照组 80 9.75±1.57 0.70±0.25 1.17±0.29观察组 98 10.16±1.80 0.68±0.22 1.99±0.38a

2.3 两组炎症细胞因子水平

观察组血清IFN-γ水平为21.36±7.65 ng·L-1，IL-2水平为 4.87±1.54 ng·L-1，IL-4水平为9.87±2.13 ng·L-1，IL-6水平为12.36±3.74 ng·L-1；对照组血清IFN-γ水平为5.94±1.39 ng·L-1，IL-2水平为6.73±1.85 ng·L-1，IL-4水平为6.30±1.68 ng·L-1，IL-6水平为5.25±1.38 ng·L-1。观察组血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平均明显高于对照组（P＜0.05），而血清IL-2水平明显低于对照组（P＜0.05）。

2.4 观察组中T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白表达相关性

观察组中T淋巴细胞亚群与免疫球蛋白表达呈负相关（r=0.368，P＜0.05）；T淋巴细胞亚群水平与疾病严重程度呈负相关（r=0.245，P＜0.05）；免疫球蛋白表达与疾病严重程度呈显著正相关（r=-0.421，P＜0.05）。

3 讨论

MPP是常见的儿童呼吸道感染，约占小儿肺炎的20%，在密集人群可达50%，主要是经过呼吸道（如健康人吸入患者打喷嚏、咳嗽时排出的口、鼻分泌物之后均有可能被感染）进行传播[1,2]。

目前MPP的发病机制尚未阐明，多数学者认为，是因为机体在受到MP感染后出现免疫功能紊乱情况，引发炎症反应，呼吸道上皮吸附能力发生紊乱[6]。淋巴细胞是正常免疫系统中最重要的细胞群之一，在免疫应答过程中，淋巴细胞发育成为功能不同的亚群，当各亚群的数量和功能出现异常时，机体就会出现免疫紊乱和病理变化[7]。因此，观察MPP患儿的免疫功能、炎性因子水平变化及具有重要临床意义，对于淋巴细胞亚群的分析也是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，可以反映机体当前免疫状态。本次研究中观察组CD3+、CD4+细胞水平均低于对照组，血清IFN-γ、IL-4、IL-6水平均远高于对照组，而血清IL-2水平远低于对照组。提示T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+细胞均参与MPP患儿机体免疫应答，且能促进抗体产生，介导体液免疫应答，抑制炎症因子水平。CD3+表达于全部T细胞表面，是T细胞共有的表面标志，能反映机体细胞免疫应答的能力，主要杀伤病原体感染细胞和肿瘤细胞，CD4+主要识别MHCII类分子结合的外源性多肽抗原，具有辅助或诱导免疫应答的功能，部分细胞也有杀伤和抑制功能[8]。免疫球蛋白指具有抗体（Ab）活性或化学结构，与抗体分子相似的球蛋白，具有提高免疫力、保卫人体正常组织的防御功能，可有效的吞噬外界进入人体的致病因子、细菌、病毒或自身产生的肿瘤细胞，引发全身性免疫反应，提高人体内吞噬细胞、白细胞和中性粒细胞的杀菌效果[9]。在MP感染后，体液免疫检测中发现，IgM是最早产生的一种抗体，MP感染l-2 w内，体内产生IgM及IgA，而IgG一般在感染后2 w才开始升高[12]。本次研究中两组血清IgG、IgA水平比较均无明显差异，而观察组血清IgM水平高于对照组，推测其原因可能是IgM抗体形成时间一般在机体感染后7 d，一般在感染后20-28 d达到高峰，且MP感染有一定的潜伏期，一般在14-21 d，因此，患者发生临床症状并就诊时，IgM抗体水平往往已经处于较高的水平。综上所述，T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白水平与MPP疾病严重程度密切相关，且炎症细胞因子参与MPP疾病的发生与发展，可作为临床辅助诊断的参考指标，为临床诊断治疗提供依据。