红景天苷衍生物的合成及其抗缺氧活性

任新建, 崔耀文, 陈婷婷, 温晓雪, 彭 涛, 张首国*, 王 林,*

(1. 军事医学研究院 辐射医学研究所,北京 100850; 2. 广东药科大学 药学院,广东 广州 510000)

缺氧(hypoxia)是指机体得不到充足的氧或机体在无法充分利用氧时组织和细胞的代谢、机能、甚至形态结构发生异常变化的病理过程。人在高原、航空和潜水等特殊环境下作业极易受到缺氧损害[1]。目前,国内外临床用于抗缺氧的药物主要有地塞米松、尼莫西平以及中药等,其中化学药物虽然对缺氧有一定的缓解作用,但其毒副作用较大[2-4],而中药成分复杂,作用机制尚不明确。因此研发更安全和高效的抗缺氧药物具有重要意义。

红景天苷(Sal)是天然植物红景天的主要活性成分,其水溶性强且易于吸收,毒性小,具有抗疲劳、抗衰老、抗缺氧、抗肝纤维化以及保护心血管等多方面药理作用[5-7],因而具有较好开发前景。目前文献有关红景天苷的结构改造主要集中于通过改变糖苷键、引入烯丙基型连接链、采用杂环结构取代苯环等来合成红景天苷类似物[8-9]。研究表明，改变苯环上取代基对于该类化合物药理活性的研究具有重要的意义,杨硕[10]等通过改变苯环上甲氧基和氯原子的数目和位置,合成了19个化合物,其中有9个化合物抗缺氧活性高于红景天苷。张文彬[11]等在苯环2-位引入卤原子,结果表明有利于提高化合物的抗缺氧活性。马臣[12]等研究发现在苯环上不同位置引入羟基、甲氧基、硝基、卤素等不同取代基时,化合物的抗缺氧活性均有不同程度的提高,然而对酚羟基的修饰及胺基的引入尚未见报道。

本文以红景天苷为先导化合物,拟分别在酚羟基邻位引入胺甲基，在其酚羟基引入烷基或胺基烷基,设计一系列新型红景天苷衍生物,以期改善其理化性质和透过血脑屏障的能力,进而发现高效且安全的抗缺氧活性分子。以对羟基苯乙醇和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯为起始原料,共经酚羟基成醚、氧苷键形成、脱乙酰基保护及曼尼希反应等,合成25个目标化合物,其化学结构由1H NMR,13C NMR和HR-MS(ESI)表证,且均未见文献报道,合成路线如图1所示。并对目标化合物进行了体外抗缺氧活性筛选,同时选取活性较好的化合物进一步进行细胞毒性及体内抗缺氧活性评价。

图1 目标化合物合成路线

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

SGW X-4型显微熔点仪;Bruker Avance Neo 600型超导NMR仪(TMS为内标,DMSO为溶剂);1260/G6230A型飞行时间质谱仪。

大鼠心肌细胞(H9C2)、人肾上皮细胞(293T)、人肺上皮细胞(BEAS-2B)、人正常肝细胞(LO2)、KM小鼠。实验所用试剂均为市售分析纯。

1.2 合成

(1)Sal和中间体a的合成

将对羟基苯乙醇(1)(10.00 g, 72.38 mmol)溶于100.00 mL乙酸乙酯中,并加入三乙胺(12.00 mL, 86.86 mmol),冰浴下搅拌。将苯甲酰氯(10.00 mL, 86.86 mmol)溶于20.00 mL乙酸乙酯中,滴加至上述溶液中。滴完转移至室温反应1 h。过滤,依次用饱和碳酸钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤有机相(3×30.00 mL),无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂,得白色块状固体2。将化合物2和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯(33.90 g,86.86 mmol)溶于250.00 mL无水二氯甲烷中,氩气保护下,加入三氟化硼乙醚溶液(9.20 mL,72.38 mmol),加热回流反应8 h。依次用水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤有机相(3×75.00 mL),无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂,得黄色油状液体3。将化合物3溶于100.00 mL甲醇,加入甲醇钠(4.69 g, 86.86 mmol),室温搅拌2 h[13]。用40%盐酸的甲醇溶液调节pH=7,滤除不溶物,减压浓缩后经硅胶柱层析(洗脱剂:二氯甲烷∶甲醇=10∶1,V∶V)纯化得白色固体(Sal) 6.81 g,收率31.30%,m.p.156.4～157.5 ℃(m.p.159.5～160.3 ℃[13])。

1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 9.15(s, 1H), 7.04(d,J=8.4 Hz, 2H), 6.66(d,J=8.5 Hz, 2H), 4.96(d,J=5.0 Hz, 1H), 4.91(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.88(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.47(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=9.0 Hz, 6.7 Hz, 1H), 3.66(dd,J=11.6 Hz, 5.9 Hz, 1H), 3.56(dd,J=9.1 Hz, 6.5 Hz, 1H), 3.42(dt,J=11.7 Hz, 5.9 Hz, 1H), 3.13(td,J=8.8 Hz, 4.9 Hz, 1H), 3.09～3.01(m, 2H), 2.97～2.92(m, 1H), 2.73(dd,J=14.9 Hz, 8.4 Hz, 2H)。

将化合物1(6.90 g, 49.94 mmol)溶于50.00 mL丙酮,加入碳酸钾(20.70 g, 149.77 mmol)、 1,3-二溴丙烷(14.90 g, 73.80 mmol),加热回流6 h[14],过滤,滤饼用(3×15.00 mL)乙酸乙酯洗涤,合并滤液,蒸除溶剂,得淡黄色固体4。将化合物4和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯(23.39 g, 59.93 mmol)溶于60.00 mL无水二氯甲烷中,加入三氟化硼乙醚溶液(6.40 mL, 49.94 mmol)后加热回流8 h。依次用水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤有机相(3×20.00 mL),无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂,得黄色油状液体5。将化合物5溶于100.00 mL甲醇,加入甲醇钠(3.24 g, 59.93 mmol),室温搅拌2 h。用40%盐酸甲醇溶液调节pH=7,滤除不溶物,减压浓缩后经硅胶柱层析(洗脱剂:二氯甲烷 ∶甲醇=20 ∶1,V∶V)纯化得白色油状物(a) 6.38 g,收率30.3%；1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.18(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.86(d,J=8.6 Hz, 2H), 5.00～4.81(m, 3H), 4.54～4.45(m, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 4.04(t,J=6.0 Hz, 2H), 3.90(dd,J=16.3 Hz, 8.5 Hz, 1H), 3.66(t,J=6.5 Hz, 3H), 3.60(dd,J=15.9 Hz, 8.6 Hz, 1H), 3.45～3.40(m, 1H), 3.15～3.01(m, 3H), 2.95(t,J=8.3 Hz, 1H), 2.78(dd,J=14.5 Hz, 6.5 Hz, 2H), 2.26～2.18(m, 2H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.23, 131.27, 130.39, 114.77, 103.32, 77.25, 73.91, 70.56, 70.20, 68.57, 65.64, 61.56, 35.23, 32.33, 31.81; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C17H25BrO7{[M+Na]+} 443.0682, found 443.0676。

(2) 化合物R1～R10的合成(以R1为例)

将Sal(0.30 g, 1.00 mmol)溶于5.00 mL无水乙醇,在0 ℃条件下加入40%二甲胺水溶液(0.45 g, 4.00 mmol)、38%甲醛水溶液(0.15 mL, 2.00 mmol),搅拌反应1 h后于60 ℃油浴条件下继续反应6 h(TLC检测)。减压浓缩后经硅胶柱层析(洗脱剂:二氯甲烷 ∶甲醇=20 ∶1,V∶V)纯化得淡黄色油状液体0.22 g。用相同的方法合成化合物R2～R10。

R1:淡黄色油状液体,收率61.10%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.41(s, 1H), 7.00～6.93(m, 2H), 6.62(d,J=8.1 Hz, 1H), 4.98～4.13(m, 4H), 3.90～3.35(m, 8H), 3.19～2.93(m, 3H), 2.76～2.68(m, 2H), 2.22(s, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 153.49, 127.77, 126.92, 126.65, 120.01, 113.22, 100.99, 75.06, 74.94, 71.44, 70.93, 70.12, 66.38, 59.09, 42.28, 32.82; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C17H27NO7{[M+Na]+} 358.1866, found 358.1860。

R2:淡黄色油状液体,收率74.40%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 11.11(s, 1H), 6.96(d,J=8.1 Hz, 1H), 6.94(s, 1H), 6.59(d,J=8.1 Hz, 1H), 4.70(d,J=9.6 Hz, 4H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(td,J=9.1 Hz, 6.6 Hz, 1H), 3.70～3.64(m, 3H), 3.56(td,J=9.1, 6.5 Hz, 1H), 3.42(dd,J=11.7 Hz, 5.9 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.09～3.06(m, 1H), 3.05～3.01(m, 1H), 2.97～2.93(m, 1H), 2.72(dd,J=15.0 Hz, 8.4 Hz, 2H), 2.53(q,J=7.1 Hz, 4H), 1.02(t,J=7.1 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.37, 129.56, 128.85, 128.83 122.80, 115.60, 103.28, 77.36, 77.24, 73.90, 70.56, 70.33, 61.57, 55.85, 46.22, 35.31, 11.56; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C19H31NO7{[M+Na]+} 386.2179, found 386.2172。

R3:淡黄色油状液体,收率73.20%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.94(s, 1H), 7.01～6.90(m, 2H), 6.59(d,J=8.1 Hz, 1H), 5.10～4.78(m, 3H), 4.47(s, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.1 Hz, 1H), 3.70～3.63(m, 3H), 3.56(dd,J=15.7 Hz, 9.1 Hz, 1H), 3.42(d,J=5.8 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.10～3.05(m, 1H), 3.05～3.01(m, 1H), 2.95(t,J=8.4 Hz, 1H), 2.76～2.69(m, 2H), 2.44～2.37(m, 4H), 1.51～1.45(m, 4H), 0.83(t,J=7.4 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.16, 129.60, 128.88, 128.86, 122.98, 115.54, 103.29, 77.36, 77.24, 73.90,70.56, 70.32, 61.56, 57.00, 55.27, 35.32, 19.52, 12.15; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C21H35NO7{[M+Na]+} 414.2492, found 414.2486。

R4:淡黄色油状液体,收率59.20%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.95(s, 1H), 6.98～6.92(m, 2H), 6.59(d,J=8.1 Hz, 1H), 5.03～4.79(m, 3H), 4.47(s, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.1 Hz, 1H), 3.68～3.63(m, 3H), 3.56(dd,J=15.7 Hz, 9.2 Hz, 1H), 3.42(d,J=5.9 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.09～3.06(m, 1H), 3.05～3.01(m, 1H), 2.95(t,J=8.4 Hz, 1H), 2.76～2.67(m, 2H), 2.45～2.41(m, 4H), 1.45(tt,J=7.9 Hz, 7.5 Hz, 4H), 1.24(qt,J=7.7 Hz, 7.4 Hz, 4H), 0.85(t,J=7.4 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 155.08, 128.52, 127.78, 127.74, 121.89, 114.44, 102.21, 76.26, 76.15, 72.81, 69.46, 69.25, 60.46, 55.89, 51.88, 34.23, 27.37, 19.38, 13.21; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C23H39NO7{[M+Na]+} 442.2805, found 442.2798。

R5:淡黄色油状液体,收率54.00%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.65(s, 1H), 6.98～6.93(m, 2H), 6.60(t,J=7.5 Hz, 1H), 5.02～4.82(m, 3H), 4.46(s, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.1 Hz, 1H), 3.68～3.53(m, 4H), 3.43(d,J=5.9 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.7 Hz, 1H), 3.09～3.01(m, 2H), 2.95(t,J=8.4 Hz, 1H), 2.75～2.68(m, 2H), 2.47～2.36(m, 3H), 1.50～1.33(m, 4H), 1.28～1.16(m, 6H), 0.89～0.79(m, 9H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 155.87, 129.61, 128.88, 128.82, 123.26, 115.53, 103.32, 77.36, 77.24, 73.90, 70.54, 70.36, 61.55, 57.36, 53.20, 35.33, 29.46, 29.44, 22.40, 14.35; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C25H43NO7{[M+Na]+} 470.3118, found 470.3112。

R6:淡黄色油状液体,收率68.00%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.91(s, 1H), 6.98～6.92(m, 2H), 6.59(d,J=8.1 Hz, 1H), 5.04～4.77(m, 3H), 4.46(s, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.2 Hz, 1H), 3.66～3.63(m, 3H), 3.56(dd,J=15.7 Hz, 9.2 Hz, 1H), 3.43(d,J=6.0 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.7 Hz, 1H), 3.09～3.02(m, 2H), 2.95(t,J=8.4 Hz, 1H), 2.75～2.68(m, 2H), 2.44～2.40(m, 4H), 1.48～1.43(m, 4H), 1.22(t,J=6.2 Hz, 12H), 0.84(t,J=7.0 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.18, 129.61, 128.87, 128.81, 123.02, 115.54, 103.32, 77.36, 77.25, 73.89, 70.54, 70.37, 61.54, 57.00, 53.22, 35.33, 31.51, 26.88, 26.19, 22.50, 14.36; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C27H47NO7{[M+Na]+} 498.3431, found 498.3424。

R7:淡黄色油状液体,收率47.70%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.25(s, 1H), 6.99(s, 1H), 6.96(d,J=8.1 Hz, 1H), 6.62(d,J=8.1 Hz, 1H), 4.96(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.88(d,J=5.1 Hz, 1H), 4.46(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.2 Hz, 1H), 3.68～3.63(m, 1H), 3.59～3.53(m, 3H), 3.43(dt,J=11.6 Hz, 5.8 Hz, 1H), 3.13(dd,J=13.5 Hz, 8.7 Hz, 1H), 3.09～3.01(m, 2H), 2.95(dd,J=13.3 Hz, 8.4 Hz, 1H), 2.76～2.69(m, 2H), 2.13(d,J=7.1 Hz, 4H), 1.85(dt,J=13.4 Hz, 6.7 Hz, 2H), 0.85(d,J=6.5 Hz, 12H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 153.35, 127.94, 126.83, 126.76, 121.62, 113.32, 101.25, 75.29, 75.18, 71.84, 68.48, 68.30, 61.29, 59.49, 55.36, 33.33, 23.76, 19.28; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C23H39NO7{[M+Na]+} 442.2805, found 442.2799。

R8:淡黄色油状液体,收率50.10%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.02(s, 1H), 7.01～6.96(m, 2H), 6.65(d,J=8.0 Hz, 1H), 4.91(d,J=13.2 Hz, 3H), 4.47(s, 1H), 4.16(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.87(dd,J=15.9 Hz, 9.0 Hz, 1H), 3.66(d,J=8.9 Hz, 1H), 3.62～3.53(m, 7H), 3.45～3.39(m, 1H), 3.15～3.00(m, 3H), 2.95(t,J=7.8 Hz, 1H), 2.77～2.68(m, 2H), 2.42(s, 4H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 154.24, 129.37, 127.97, 127.95, 121.05, 114.48, 102.18, 76.25, 76.14, 72.80, 69.45, 69.20, 65.49, 60.46, 58.22, 52.09, 34.18; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C19H29NO8{[M+Na]+} 400.1971, found 400.1965。

R9:淡黄色油状液体,收率62.90%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 10.87(s, 1H), 6.97(d,J=8.2, 1H), 6.93(s, 1H), 6.60(d,J=8.1, 1H), 5.05～4.36(m, 4H), 4.22～3.63(m, 2H), 3.61～3.52(m, 3H), 3.51～3.46(m, 1H), 3.44～3.34(m, 2H), 3.20～2.92(m, 3H), 2.78～2.65(m, 2H), 2.42(s, 4H), 1.58～1.47(m, 4H), 1.42(s, 2H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.01, 129.78, 129.21, 128.92, 122.15, 115.59, 103.28, 77.24, 73.74, 73.21, 72.42, 70.71, 68.70, 61.38, 53.73, 35.13, 25.93; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C20H31NO7{[M+Na]+} 398.2179, found 398.2172。

R10:淡黄色油状液体,收率71.10%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 6.96(d,J=2.1 Hz, 2H), 6.61(d,J=4.4 Hz, 1H), 5.08～4.31(m, 4H), 4.17～3.84(m, 1H), 3.74～3.64(m, 3H), 3.59～3.54(m, 1H), 3.49(d,J=7.1 Hz, 1H), 3.44～3.36(m, 2H), 3.19～3.02(m, 3H), 2.76～2.69(m, 2H), 2.53(s, 4H), 1.74(s, 4H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 155.72, 129.50, 128.85, 128.81, 123.33, 115.46, 103.29, 77.36, 77.25, 73.91, 70.56, 70.33, 61.56, 57.04, 53.56, 35.32, 23.66; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C19H29NO7{[M+Na]+} 384.2022, found 384.2016。

(3) 化合物X1～X10的合成(以X1为例)

将中间体a(2.10 g, 5.00 mmol)溶于15.00 mLN,N-二甲基甲酰胺中,加入碳酸钾(2.63 g, 19.00 mmol)、 33%二甲胺水溶液(1.35 g, 10.00 mmol),在60 ℃油浴中反应4 h(TLC检测)。滤除不溶物,减压浓缩后经硅胶柱层析(洗脱剂:二氯甲烷 ∶甲醇=10 ∶1,V∶V)纯化得白色油状物0.89 g。用相同的方法合成化合物X2～X10。

X1:白色油状液体,收率45.60%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.5 Hz, 2H), 6.83(d,J=8.6 Hz, 2H), 4.93(d,J=15.4 Hz, 3H), 4.48(s, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.96(t,J=6.4 Hz, 2H), 3.89(dd,J=16.4 Hz, 8.4 Hz, 1H), 3.66(d,J=11.7 Hz, 1H), 3.59(dd,J=14.9 Hz, 9.7 Hz, 1H), 3.43(d,J=5.9 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.07(d,J=3.8 Hz, 1H), 3.06～3.00(m, 1H), 2.98～2.92(m, 1H), 2.82～2.74(m, 2H), 2.48(d,J=7.3 Hz, 2H), 2.25(s, 6H), 1.87(p,J=6.7 Hz, 2H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 155.84, 129.38, 128.72, 113.09, 101.71, 75.76, 75.64, 72.30, 68.94, 68.60, 64.36, 59.94, 54.31, 43.54, 33.63, 25.26; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C19H31NO7{[M+Na]+} 386.2179, found 386.2173。

X2:白色油状液体,收率46.90%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.82(d,J=8.6 Hz, 2H), 4.97(d,J=5.0 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.89(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.48(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.95(t,J=6.3 Hz, 2H), 3.91～3.86(m, 1H), 3.66(dd,J=11.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 3.59(dd,J=16.1 Hz, 8.6 Hz, 1H), 3.43(t,J=5.6 Hz, 1H), 3.16～3.10(m, 1H), 3.07(d,J=3.8 Hz, 1H), 3.04(dd,J=8.6 Hz, 5.0 Hz, 1H), 2.98～2.92(m, 1H), 2.83～2.72(m, 2H), 2.57～2.51(m, 2H), 2.49～2.43(m, 4H), 1.79(t,J=6.6 Hz, 2H), 0.94(t,J=7.1 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.55, 130.85, 130.32, 114.67, 103.32, 77.37, 77.25, 73.90, 70.56, 70.22, 66.11, 61.56, 49.16, 46.88, 35.24, 27.03, 12.21; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C21H35NO7{[M+Na]+} 414.2492, found 414.2485。

X3:白色油状液体,收率56.60%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.81(d,J=8.7 Hz, 2H), 4.97(d,J=5.0 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.88(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.47(t,J=6.0 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.9 Hz, 1H), 3.96(t,J=6.3 Hz, 2H), 3.93～3.86(m, 1H), 3.66(dd,J=11.8 Hz, 3.6 Hz, 1H), 3.59(dd,J=16.1 Hz, 8.6 Hz, 1H), 3.43(dt,J=11.4 Hz, 5.6 Hz, 2H), 3.16～3.01(m, 3H), 2.95(td,J=8.5 Hz, 4.6 Hz, 1H), 2.78(dt,J=11.4 Hz, 7.3 Hz, 2H), 2.52(d,J=8.8 Hz, 3H), 2.34(t,J=7.6 Hz, 4H), 1.79(p,J=6.6 Hz, 2H), 1.38(dt,J=16.1 Hz, 7.3 Hz, 4H), 0.82(t,J=7.3 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.55, 130.84, 130.32, 114.64, 103.32, 77.36, 77.25, 73.90, 70.56, 70.23, 66.02, 61.56, 55.99, 50.39, 35.24, 27.06, 20.31, 12.24; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C23H39NO7{[M+Na]+} 442.2805, found 442.2799。

X4:白色油状液体,收率51.90%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ:7.18(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.84(d,J=8.6 Hz, 2H), 4.96(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.93(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.89(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.47(t,J=5.8 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 4.00(t,J=5.9 Hz, 2H), 3.92～3.86(m, 1H), 3.66(d,J=5.6 Hz, 1H), 3.61～3.57(m, 1H), 3.45～3.41(m, 1H),3.37～3.34(m, 4H), 3.15～3.01(m, 4H), 2.95(dd,J=8.0 Hz, 4.9 Hz, 2H), 2.81～2.77(m, 2H), 2.10～1.89(m, 2H), 1.60～1.39(m, 4H), 1.30(dt,J=14.7 Hz, 7.3 Hz, 4H), 0.89(t,J=7.3 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.15, 130.13, 129.29, 113.65, 102.23, 76.28, 76.17, 72.82, 69.48, 69.13, 64.31, 60.47, 51.79, 48.83, 34.15, 25.40, 19.00, 13.07; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C25H43NO7{[M+Na]+} 470.3118, found 470.3112。

X5:白色油状液体,收率32.50%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.17(d,J=8.2 Hz, 2H), 6.83(d,J=8.4 Hz, 2H), 4.96(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.89(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.47(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.99(t,J=6.2 Hz, 2H), 3.92～3.85(m, 1H), 3.66(dd,J=9.7 Hz, 5.8 Hz, 1H), 3.62～3.54(m, 1H), 3.45～3.40(m, 1H), 3.38～3.32(m, 4H), 3.18～2.99(m, 4H), 2.98～2.92(m, 1H), 2.84～2.73(m, 3H), 2.19～1.03(m, 14H), 0.86(t,J=7.0 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.19, 130.04, 129.26, 113.61, 102.23, 76.22, 72.81, 69.46, 69.13, 64.34, 60.46, 52.07, 48.82, 34.15, 27.97, 25.01, 21.76, 21.23, 13.25; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C27H47NO7{[M+Na]+} 498.3431, found 498.3425。

X6:白色油状液体,收率46.00%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.4 Hz, 2H), 6.81(d,J=8.4 Hz, 2H), 4.96(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.89(d,J=5.1 Hz, 1H), 4.47(t,J=5.8 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.97(t,J=5.6 Hz, 2H), 3.89(dd,J=15.8 Hz, 7.7 Hz, 1H), 3.68～3.64(m, 1H), 3.59(dd,J=12.4 Hz, 5.7 Hz, 1H), 3.45～3.41(m, 1H), 3.36～3.32(m, 4H), 3.13(t,J=8.7 Hz, 1H), 3.10～3.06(m, 1H), 3.06～3.02(m, 1H), 2.97～2.94(m, 1H), 2.80～2.75(m, 2H),2.47～2.35(m, 2H), 1.97～1.75(m, 2H), 1.46～1.20(m 16H), 0.84(t,J=6.7 Hz, 6H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.44, 130.92, 130.30, 114.63, 103.33, 77.36, 77.25, 73.90, 70.54, 70.24, 65.69, 61.54, 53.69, 50.10, 35.25, 31.57, 26.81, 22.55, 14.37; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C29H51NO7{[M+Na]+} 526.3744, found 526.3738。

X7:白色油状液体,收率42.10%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.19(d,J=8.5 Hz, 2H), 6.86(d,J=8.6 Hz, 2H), 4.96(d,J=4.8 Hz,, 1H), 4.93～4.91(m, 1H), 4.89(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.48(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.16(d,J=4.6 Hz, 1H), 4.04(t,J=6.0 Hz, 2H), 3.91～3.88(m, 1H), 3.71～3.63(m, 4H), 3.42(t,J=6.1 Hz, 1H), 3.24～3.21(m, 2H), 3.13～3.08(m, 2H), 3.03(d,J=4.8 Hz, 1H), 2.95(d,J=4.4 Hz, 1H), 2.83～2.73(m, 2H), 2.15～2.08(m, 2H), 1.30(d,J=6.5 Hz, 12H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.02, 131.45, 130.42, 114.78, 103.31, 77.37, 77.25, 73.90, 70.56, 70.18, 64.99, 61.55, 57.79, 54.83, 35.23, 27.36, 18.60, 17.03; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C23H39NO7{[M+Na]+} 442.2805, found 442.2799。

X8:淡黄色油状液体,收率63.90%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.83(d,J=8.6 Hz, 2H), 4.97(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.89(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.48(t,J=5.8 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.96(t,J=6.4 Hz, 2H), 3.89(dd,J=16.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 3.68～3.64(m, 1H), 3.62～3.54(m, 5H), 3.43(dt,J=11.6 Hz, 5.8 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.10～3.06(m, 1H), 3.05～3.01(m, 1H), 2.95(t,J=8.5 Hz, 1H), 2.81～2.74(m, 2H), 2.49～2.25(m, 6H), 1.90～1.83(m, 2H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.21, 129.70, 129.07, 113.45, 102.05, 76.10, 75.99, 72.64, 69.30, 68.96, 65.25, 64.82, 60.29, 54.02, 52.46, 33.97, 24.96; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C21H33NO8{[M+Na]+} 428.2284, found 428.2279。

X9:淡黄色油状液体,收率56.50%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.82(d,J=8.7 Hz, 2H), 4.97(d,J=4.9 Hz, 1H), 4.92(d,J=4.8 Hz, 1H), 4.88(d,J=5.2 Hz, 1H), 4.47(t,J=5.9 Hz, 1H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.95(t,J=6.4 Hz, 2H), 3.89(dd,J=16.4 Hz, 8.4 Hz, 1H), 3.66(d,J=9.3 Hz, 1H), 3.59(dd,J=16.2 Hz, 8.5 Hz, 1H), 3.47～3.38(m, 2H), 3.16～3.02(m, 3H), 2.98～2.92(m, 1H), 2.82～2.73(m, 2H), 2.48～2.30(m, 5H), 1.85(t,J=6.7 Hz, 2H), 1.56～1.45(m, 4H), 1.39(d,J=5.9 Hz, 2H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.10, 129.54, 128.94, 113.32, 101.93, 75.98, 75.86, 72.51, 69.17, 68.83, 64.82, 60.17, 54.13, 53.04, 33.85, 25.19, 24.44, 23.00; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C22H35NO7{[M+Na]+} 426.2492, found 426.2486。

X10:淡黄色油状液体,收率49.00%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.83(d,J=8.7 Hz, 2H), 4.62～4.14(m, 5H), 3.97(t,J=6.3 Hz, 2H), 3.92～3.87(m, 1H), 3.66(d,J=11.7 Hz, 1H), 3.61～3.57(m, 1H), 3.43(dd,J=11.8 Hz, 5.9 Hz, 1H), 3.13(t,J=8.8 Hz, 1H), 3.10～3.06(m, 1H), 3.05～3.01(m, 1H), 2.95(t,J=8.9 Hz, 1H), 2.78(dd,J=14.6 Hz, 6.5 Hz, 2H), 2.74～2.71(m, 2H), 2.72～2.65(m, 4H), 1.95～1.90(m, 2H), 1.77～1.73(m, 4H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.40, 131.03, 130.34, 114.70, 103.32, 77.37, 77.25, 73.90, 70.55, 70.21, 65.92, 61.55, 53.84, 52.43, 35.23, 27.83, 23.45; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C21H33NO7{[M+Na]+} 412.2335, found 412.2330。

(4) 化合物J1～J5的合成(以J1为例)

将对羟基苯乙醇(0.69 g, 5.00 mmol)溶于10.00 mL丙酮,加入碳酸钾(2.07 g, 15.00 mmol)、溴乙烷(0.82 g, 7.50 mmol),加热回流6 h,过滤,滤饼用乙酸乙酯(3×5.00 mL)洗涤,合并滤液和洗液,蒸除溶剂,得淡黄色固体6。将化合物6和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯(1.69 g, 4.33 mmol)溶于10.00 mL无水二氯甲烷,加入三氟化硼乙醚溶液(0.46 ml, 3.61 mmol),加热回流反应6 h。依次用水、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤有机相(3×2.50 mL),无水硫酸钠干燥,蒸除溶剂,得淡黄色油状液体7。将7溶于10.00 mL甲醇,加入甲醇钠(0.24 g, 4.33 mmol)后室温下搅拌2 h。用40%盐酸甲醇溶液调节pH=7,滤除不溶物,减压浓缩后经硅胶柱层析(洗脱剂:二氯甲烷 ∶甲醇=20 ∶1,V∶V)纯化得0.63 g淡黄色油状液体。用相同的方法合成化合物J1～J5。

J1:淡黄色油状液体,收率52.90%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.82=(d,J=3.4 Hz, 1H), 6.81(d,J=3.4 Hz, 1H), 5.03～4.33(m, 5H), 4.17(d,J=7.8 Hz, 1H), 3.97(q,J=7.0 Hz, 2H), 3.89(dd,J=15.9 Hz, 9.0 Hz, 1H), 3.71～3.52(m, 2H), 3.42(dd,J=12.1 Hz, 6.2 Hz, 1H), 3.14～2.94(m, 3H), 2.78(q,J=6.9 Hz, 2H), 1.30(t,J=7.0 Hz, 3H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.39, 130.84, 130.32, 114.63, 103.32, 77.37, 73.91, 72.42, 70.73, 70.56, 63.31, 61.56, 35.24, 15.17; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C16H24NO7{[M+Na]+}351.1420, found 351.1414。

J2:淡黄色油状液体,收率40.60%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.16(d,J=8.5 Hz, 2H), 6.83(d,J=3.3 Hz, 1H), 6.81(d,J=3.3 Hz, 1H), 5.03～4.07(m, 6H), 3.88(t,J=6.5 Hz, 2H), 3.75～3.64(m, 1H), 3.60～3.48(m, 1H), 3.44～3.39(m, 1H), 3.17(d,J=5.3 Hz, 1H), 3.15～2.92(m, 3H), 2.80～2.75(m, 2H), 1.70(q,J=6.7 Hz, 2H), 0.96(t,J=7.4 Hz, 3H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 157.55, 130.84, 130.32, 114.68, 103.32, 77.37, 73.91, 72.42, 70.56, 70.23, 69.29, 61.56, 35.24, 22.54, 10.90; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C17H26NO7{[M+Na]+} 365.1577, found 365.1571。

J3:淡黄色油状液体,收率32.40%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.15(d,J=8.5 Hz, 2H), 6.82(d,J=3.2 Hz, 1H), 6.81(d,J=3.2 Hz, 1H), 4.98～4.15(m, 6H), 3.91(t,J=6.5 Hz, 2H), 3.74～3.64(m, 1H), 3.61～3.55(m, 1H), 3.44～3.40(m, 1H), 3.20～3.12(m, 1H), 3.12～2.93(m, 3H), 2.80～2.75(m, 2H), 1.70～1.66(m, 2H), 1.42～1.37(m, 2H), 1.32～1.28(m, 4H), 0.87(t,J=7.0 Hz, 3H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.44, 129.71, 129.19, 113.55, 102.20, 76.25, 72.79, 71.30, 69.44, 69.11, 66.66, 60.44, 34.12, 30.36, 28.04, 24.56, 21.43, 13.27; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C20H32NO7{[M+Na]+} 407.2046, found 407.2041。

J4:淡黄色油状液体,收率21.80%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.15(d,J=8.3 Hz, 2H), 6.81(d,J=3.1 Hz, 2H), 5.00～4.14(m, 6H), 3.90(t,J～6.5 Hz, 2H), 3.74～3.64(m, 1H), 3.61～3.55(m, 1H), 3.44～3.39(m, 1H), 3.25～2.87(m, 4H), 2.80～2.74(m, 2H), 1.67(dd,J=14.7 Hz, 6.8 Hz, 2H), 1.41～1.37(m, 2H), 1.32～1.24(m, 8H), 0.86(t,J=7.0 Hz, 3H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.49, 129.76, 129.24, 113.60, 102.25, 76.30, 72.83, 71.34, 69.49, 69.16, 66.70, 60.49, 34.17, 30.64, 28.15, 28.12, 28.07, 24.95, 21.48, 13.36; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C22H36NO7{[M+Na]+} 435.2359, found 435.2353。

J5:淡黄色油状液体,收率23.00%;1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ: 7.15(d,J=8.6 Hz, 2H), 6.81(d,J=3.1 Hz, 2H), 5.06～4.06(m, 6H), 3.90(t,J=6.5 Hz, 2H), 3.74～3.64(m, 1H), 3.61～3.56(m, 1H), 3.42(dd,J=11.7 Hz, 5.9 Hz, 1H), 3.20～3.11(m, 1H), 3.10～2.93(m, 3H), 2.80～2.75(m, 2H), 1.70～1.65(m, 2H), 1.41～1.36(m, 2H), 1.30～1.22(m, 12H), 0.86(t,J=7.0 Hz, 3H);13C NMR(151 MHz, DMSO-d6)δ: 156.47, 129.73, 129.22, 113.58, 102.23, 76.28, 72.81, 71.33, 69.47, 69.14, 66.68, 60.47, 34.15, 30.67, 28.39, 28.34 ,28.16, 28.10, 28.08, 24.91, 21.48, 13.34; HR-MS(ESI-TOF)m/z: calculated for C24H40NO7{[M+Na]+} 463.2672, found 463.2666。

1.3 体外抗缺氧实验

将对数生长期的H9C2细胞用胰酶消化并计数,调整细胞浓度为1×105个/mL,并接种于含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基的96孔板中,接种密度为每孔1×104个。将其置于37 ℃、 5% CO2的细胞培养箱中培养24 h后,换用无糖无血清的DMEM培养基进行培养[15-17],将细胞随机分为4组:正常对照组、缺氧模型组(不给药,加入等量PBS)、红景天苷组(红景天苷,25 μmol/L)、受试物组(红景天苷衍生物,25 μmol/L),每组设置3个复孔。除正常对照组外其他组均转移至放有安宁包和氧指示剂的2.5 L密闭培养盒中进行缺氧8 h[18-20]。缺氧结束后,将培养基换成10%胎牛血清的DMEM高糖培养基,再置于37 ℃、 5% CO2的细胞培养箱中复氧24 h。向96孔板每孔加入10 μL CCK-8溶液,随后在37 ℃、 5% CO2培养箱中继续培养2 h[21-22]。用酶标仪测定各孔在450 nm波长处的OD(Optical density)值。化合物的抗缺氧活性用细胞活力(Cell viability, %)表示。对活性优于红景天苷的化合物按上述步骤进行细胞复筛,给药浓度为10 μmol/L,筛出体外抗缺氧活性显著的化合物。

1.4 细胞毒性实验

对上述筛出的活性化合物,采用人肾上皮细胞293T、人肺上皮细胞BEAS-2B、大鼠心肌细胞H9C2和人正常肝细胞LO2这4种细胞,进行细胞毒性评价。细胞用胰酶消化并计数,调整细胞浓度为1×105个/mL,其中H9C2、 293T、和BEAS-2B接种于含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基的96孔板中, LO2接种于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中,接种密度均为每孔1×104个,然后置于37 ℃、 5% CO2的细胞培养箱中培养24 h。每个化合物设置7个浓度组:1、 2.5、 5、 10、 25、 50、 100 μmol/L,每组设3个复孔。给药24 h后,每孔加入10 μL CCK-8溶液,随后在37 ℃、 5% CO2培养箱中继续培养2 h。用酶标仪测定各孔在450 nm波长处的OD值。化合物的细胞毒性用细胞活力表示,细胞活力越高代表细胞毒性越小。

1.5 体内抗缺氧实验

对抗缺氧活性佳、细胞毒性低的化合物进行体内抗缺氧活性评价。KM小鼠雌雄各半,随机分为生理盐水组、红景天苷组和受试物组,每组8只。红景天苷及其衍生物均溶于生理盐水中,给药方式为腹腔注射,给药剂量均为720 mg/kg。在腹腔注射30 min后,将各组小鼠置于装有10 g钠石灰的250 mL塑料瓶中,每瓶1只,拧紧瓶盖,记录每只小鼠的存活时间[23-27]。瓶盖加一层封口膜以保证气密性。小鼠入瓶封盖后至死亡的时间即为密闭缺氧存活时间。

2 结果与讨论

2.1 合成方法分析

以红景天苷为先导化合物,设计出3类新结构衍生物。以对羟基苯乙醇和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯为起始原料,经酚羟基成醚、氧苷键形成、脱乙酰基保护及曼尼希反应等,实现了25个目标化合物的合成,收率较好。在Sal的合成过程中,采用多步反应一步纯化的策略,显著缩短了化合物的合成时间,避免了大量有机溶剂的使用。在中间体a和J系列衍生物的合成过程中,发现采用1,3-二溴丙烷和烷基保护酚羟基后,氧苷化反应可在无氩气保护的条件下进行,简化了实验步骤,且对收率无明显影响。在由中间体a合成X系列衍生物一步反应中,选用丙酮、乙醇、乙腈、四氢呋喃作溶剂,原料不发生反应,以N,N-二甲基甲酰胺为反应溶剂,反应能在较温和的条件下进行且收率较好,为具有相似结构的化合物的胺化反应提供了参考。

2.2 体外抗缺氧活性分析

通过H9C2细胞缺氧/复氧模型对25个化合物进行体外抗缺氧活性评价。初筛结果如表1所示。结果表明,在化合物浓度为25 μmol/L条件下,24个化合物均可显著提高缺氧H9C2细胞的细胞活力。由构效关系分析发现,红景天苷酚羟基邻位引入胺甲基时,链状胺较环状胺对抗缺氧活性有利,R5、R7活性均显著优于红景天苷,其细胞活力分别提高了17.84%、 15.28%。红景天苷酚羟基引入胺丙基,当链状胺的碳数为4或6时,其活性较强,X2、X3活性优于红景天苷,其细胞活力分别提高了9.27%、 9.12%;当碳数小于4或大于6时,其活性逐渐下降,如X1和X4对应的细胞活力分别为51.16%、 89.57%,低于X2和X3的97.49%、 97.34%;当环状胺的碳数为4时活性强,X8活性优于红景天苷,其细胞活力提高了17.30%。在酚羟基引入烷基时,随着碳数增加,化合物活性降低,其中J1、J2活性优于红景天苷,其细胞活力分别提高了18.33%、 12.99%。

表1 25 μmol/L化合物对H9C2细胞的抗缺氧活性*

表2 10 μmol/L化合物对H9C2细胞的抗缺氧活性*

2.3 细胞毒性分析

对上述体外抗缺氧活性优于Sal的R7、X2、X8和J1进行细胞毒性试验。分别选取了人肾上皮细胞293T、人肺上皮细胞BEAS-2B、大鼠心肌细胞H9C2、人正常肝细胞LO2进行测试。实验结果如图2所示,其中R7、X8、J1对4种细胞均无明显毒性。化合物X2随着浓度逐渐增大,对四种细胞均显示出一定的毒性:在浓度≥1 μmol/L时,X2对LO2细胞显示出较大的细胞毒性;在浓度≥2.5 μmol/L时,X2对BEAS-2B细胞显示出较大的细胞毒性;在浓度≥25 μmol/L时,X2对293T、 H9C2细胞逐渐显示出较小的细胞毒性。

图2 不同浓度下的目标化合物对4种细胞的活力影响

2.4 体内抗缺氧活性分析

根据体外抗缺氧活性及细胞毒性实验结果,选取R7、X8和J1进行体内抗缺氧活性评价,实验结果如表3所示。由表3可知,与生理盐水相比,红景天苷使缺氧小鼠的存活时间延长了12.03%,化合物R7、X8和J1分别使缺氧小鼠的存活时间延长了21.39%、 12.72%和24.21%;与红景天苷组相比,R7、J1明显延长了缺氧小鼠的存活时间,其结果具有显著性差异(P<0.05)。

表3 化合物腹腔给药对缺氧小鼠存活时间的影响

以廉价易得的对羟基苯乙醇和1,2,3,4,6-β-D-葡萄糖五乙酸酯为起始原料,设计合成了25个未见文献报道的红景天苷衍生物,合成方法简便易行,收率较好。经体内外抗缺氧活性及细胞毒性评价,发现R7、X8和J1表现出显著的体内外抗缺氧活性,且无明显细胞毒性,并总结分析了上述化合物抗缺氧作用的初步构效关系规律,在红景天苷酚羟基邻位引入胺甲基时,链状胺较环状胺对活性有利,酚羟基引入胺丙基,其活性与胺的碳数有关,链状胺碳数为4或6、环状胺的碳数为4时,化合物活性优于红景天苷;在酚羟基引入烷基时,随着碳数增加,化合物活性逐步下降。该研究为深入开展红景天苷衍生物的设计合成并进一步发现高效安全的抗缺氧新药提供了实验参考。