注射HCG 后不同受精时机对短时IVF 妊娠结局的影响

高松城 王惠洁 黄智勇

近年来,我国育龄夫妇生育年龄逐渐升高,但女性生育能力与年龄呈反比,不孕不育风险也随之较高,辅助生殖需求逐渐升高,需进一步提升辅助生殖技术水平［1］。短时IVF 是临床常用的辅助生殖技术,促排卵过程中注射HCG 可模拟体内激素变化,有助于促进卵母细胞成熟,并促进受精胚胎发育,但是注射HCG 后受精时机的选择仍存在一定差异,需进一步探明更为可靠的受精时机,改善受精效果,改善胚胎发育和妊娠结局［2,3］。当前,临床公认的短时IVF 最佳受精时间为注射HCG 后38～40 h,但是不同时间对受精效果、妊娠结局的影响尚不明确,有必要探明不同受精时机对短时IVF 的影响。为此本文分析了注射HCG 后不同受精时机对短时IVF 妊娠结局的影响,现总结报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性选取2021 年1 月～2022 年6 月在本院接受短时IVF 助孕的585 例患者作为研究对象,共纳入585 个周期,其中HCG 后38 h 组292 例,HCG后40 h 组293 例。HCG 后40 h 组合计293 个周期,女方平均年龄(35.96±2.02)岁,平均不孕年限(5.12±2.03)年；平均体质量指数(23.42±7.09)kg/m2；平均抗缪勒管激素(2.52±0.32)ng/ml；基础促黄体生成素(LH)(3.79±0.98)mIU/ml、基础卵泡刺激素(FSH)(8.13±1.12)mIU/ml、基础雌二醇(E2)(34.69±4.66)pg/ml；促排时间(9.46±1.56)d、促排总支数(30.56±7.63)支,平均获卵数(8.75±2.02)枚；平均胚胎移植个数(1.65±0.23)个。HCG 后38 h 组合计292 个周期,女方平均年龄(35.86±2.10)岁,平均不孕年限(5.15±2.17)年；平均体质量指数(23.41±7.14)kg/m2；平均抗缪勒管激素(2.59±0.28)ng/ml；基础LH(3.81±0.85)mIU/ml、基础FSH(8.08±1.20)mIU/ml、基 础E2(34.71±4.52)pg/ml；促排时间(9.46±1.41)d、促排总支数(30.53±7.42)支,平均获卵数(8.85±2.10)枚；平均胚胎移植个数(1.65±0.36)个。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：符合IVF 助孕治疗指征;女方年龄＜40 岁；促排周期中获卵数≥5 枚;男方精液常规检查正常［4］；患者夫妻双方均签署知情同意书。排除标准:重要脏器功能异常者；阴道分泌物异常者或合并盆腔疾病者［5］；合并精神障碍者；生殖系统发育畸形者；治疗前6 个月使用影响生殖系统药物者；凝血功能障碍者；循环功能障碍者等。

1.3 方法 两组均采用第一周期长效长方案进行促排卵治疗,达到垂直降调节标准时开始应用促性腺激素促排卵,促排卵期间动态监测E2、LH 等激素水平,超声监测卵泡发育情况,适时注射HCG 5000～6000 IU,行超声引导下经阴道穿刺取卵术,洗涤回收的卵母细胞；患者丈夫禁欲2 d 后,女方取卵日上午获取精液,精液充分液化后采用梯度离心加上游法处理；卵细胞与精液处理完成后实施IVF,精子终浓度均为1.0×106/ml,受精后4～6 h 观察受精情况,存在受精障碍者,必要时进行补救ICSI 受精。HCG 后40 h 组患者在注射HCG后40 h 行短时受精,卵子体外培养时间为(40.13±0.21)h。HCG 后38 h 组患者在注射HCG 后38 h 行短时受精,卵子体外培养时间为(38.15±0.17)h。随后进行胚胎培养及胚胎移植。受精后第18～19小时进行原核观察,培养65～68 h 评估卵裂期胚胎质量,依据中心制定卵裂胚胎评分方法,根据患者情况选择D3 优质胚胎(正常受精来源,7～9 细胞,Ⅰ～Ⅱ级的胚胎)1～2 枚进行移植,剩余胚胎根据患者情况进行冷冻和(或)囊胚培养。

1.4 观察指标

1.4.1 受精情况 观察并统计两组患者正常受精率、异常受精率、优质胚胎率及早期补救ICSI 率。

1.4.2 妊娠情况及妊娠结局 患者移植术后14 d 抽血检验人绒毛膜促性腺激素的β 亚基(β-HCG)；术后30 d 超声监测患者临床妊娠情况(孕囊及心管搏动),记录胚胎着床率、临床妊娠率,并追踪患者后续妊娠结局,记录两组患者早期流产率。

1.5 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示,采用t 检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者受精情况比较 HCG 后40 h 组正常受精率、优质胚胎率均显著高于HCG 后38 h 组,异常受精率、早期补救ICSI 率显著低于HCG 后38 h 组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组患者受精情况比较(%)

2.2 两组患者妊娠情况及妊娠结局比较 HCG 后40 h组胚胎着床率64.95%、临床妊娠率49.49%均显著高于HCG 后38 h 组的48.42%、38.01%,差异具有统计学意义(P＜0.05)；HCG 后40 h 组临床妊娠患者的早期流产率8.97%显著低于HCG 后38 h 组的29.73%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组患者妊娠情况及妊娠结局比较(%)

3 讨论

三胎政策出台后,希望生育夫妻占比逐渐升高,但较多夫妇已经错过最佳生育年龄,自然妊娠成功率显著降低,需要借助辅助生殖技术提升妊娠成功率。当前,辅助生殖技术不断优化、改进,有效提升了妊娠成功率,但部分患者妊娠结果仍不理想,需进一步提升技术水平,以改善患者妊娠结局［6］。

短时IVF 是临床常用的辅助生殖技术,注射HCG可促进促卵冠丘复合体的成熟和颗粒细胞的疏松化,对于卵母细胞成熟、受精和胚胎发育均具有较好的促进作用［7］；HCG 注射后38～40 h 是临床公认的最佳受精时间,但是短时IVF 助孕患者容易出现促排卵困难问题,获得的卵母细胞成熟度差,IVF 难度较大,需积极提升其受精效果,改善胚胎发育效果,以改善患者预后［8］。短时IVF 临床研究发现,HCG 注射后不同受精时间的IVF、胚胎移植结果存在一定差异,应对治疗周期中患者不同受精时机对短时IVF 妊娠结局的影响展开分析［9,10］。IVF 治疗周期相关临床研究发现,HCG 注射后受精时机与受精结果存在密切相关性,注射HCG 后39～40 h 受精率相对更高,与注射HCG 后38 h 受精者相比,正常受精率可进一步提升2%～15%,异常受精率显著降低,可有效降低早期补救ICSI 实施率,并可更好的促进胚胎发育,可用胚胎率和优质胚胎率均可显著提升,为胚胎移植创造了良好的条件［11,12］。本次研究对比分析不同受精时机的受精效果也发现,HCG 后40 h 组正常受精率92.57%、优质胚胎率54.01%均显著高于HCG 后38 h 组的85.57%、40.20%,异常受精率7.43%、早期补救ICSI 率3.04%显著低于HCG 后38 h 组的14.43%、10.57%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。提示注射HCG 后40 h,IVF 效果更佳,有助于降低早期补救ICSI 实施率,并可提升其胚胎发育效果,可为辅助生殖提供更多的优质胚胎。但是,当前临床尚未探明不同受精时机对短时IVF 妊娠结局的影响,因此本文追踪调查了患者妊娠结局,结果发现,HCG 后40 h 组胚胎着床率64.95%、临床妊娠率49.49%均显著高于HCG 后38 h 组的48.42%、38.01%,差异具有统计学意义(P＜0.05)；HCG 后40 h组临床妊娠患者的早期流产率8.97%显著低于HCG 后38 h 组的29.73%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。可见注射HCG 后38 h 行短时IVF 妊娠结局差于注射HCG后40 h,注射HCG 后40 h 进行受精可有效促进胚胎种植,提升临床妊娠率,并可降低早期流产率,有效改善了患者妊娠结局,有助于提升辅助生殖成功率。

综上所述,注射HCG 后38 h 行短时受精结局差于注射HCG 后40 h,尤其是早期补救ICSI 比例有所上升,应优先考虑注射HCG 后40 h 受精,以改善受精效果,提高临床妊娠率,并改善患者妊娠结局。