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IRMA及SP免疫组化染色检测在结肠癌诊断中的意义

2023-01-24陈敬信王小玲

贵州医药 2022年12期
关键词:结肠癌免疫组化结肠

陈敬信 王小玲

(1.陕西省森林工业职工医院病理科,陕西 西安 710300;2.渭南市第二医院病理科,陕西 渭南 714000)

结肠癌为结直肠癌的主要类型之一,其发生周期比较长,开始发病时多为结肠良性肿瘤,然后逐渐发展到结肠癌,这个过程涉及到多种基因的突变与异常表达等[1]。生长抑制因子2(ING2)为一种抑制因子,但是也在多种恶性肿瘤呈现高表达状况,可促进肿瘤增殖与侵袭[2]。基质金属蛋白酶-13(MMP-13)为一种促癌因子,也属于基质金属蛋白酶重要家族成员之一,MMP-13表达升高可参与恶性肿瘤的浸润与转移,导致患者的病情恶化[5]。当前诊断结肠癌的方法比较多,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)免疫组化染色为检测ING2与MMP-13表达的重要方法,但是多为定性分析,定量分析还存在一定的不足[3]。固相免疫放射分析法(IRMA)为当前比较新颖的诊断方法,是基于血清学的诊断方法。本文探讨了IRMA及SP免疫组化染色检测在结肠癌诊断中的意义,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年8月到2021年6月在我院手术切除的结肠良性肿瘤患者(结肠良性肿瘤组)78例与结肠癌患者(结肠癌组)78例。结肠癌组中男40例,女38例,平均年龄(57.39±3.68)岁,平均体质量指数(20.87±1.57)kg/m2,平均肿瘤直径(3.58±0.27)cm。纳入标准:年龄20~75岁;所有病例经过病理诊断为结肠癌或结肠良性肿瘤,病理类型:腺癌70例,鳞癌8例;浆膜浸润30例;组织学分化:高分化18例,中分化29例,低分化31例;临床分期:Ⅰ期28例,Ⅱ期 22例,Ⅲ期16例,Ⅳ期12例。结肠良性肿瘤组中男39例,女39例,平均年龄(57.29±5.11)岁,平均体质量指数(20.48±1.11)kg/m2,平均肿瘤直径(3.56±0.33)cm。纳入标准:年龄20~75岁;所有病例经过病理诊断为结肠癌或结肠良性肿瘤;本研究通过本院伦理委员会批准;具有详细的一般资料与病理资料;无结肠手术史;手术与病理检查前未给予任何治疗(包括放疗、生物治疗、化疗等);患者知情同意。排除标准:所取得标本不全者;临床资料不全者;样本无法进行后续检测分析者;妊娠与哺乳期妇女;合并其他部位肿瘤者。两组患者一般资料对比差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2SP免疫组化染色检测 采用免疫组化SP法检测肿瘤组织中肿瘤细胞ING2和MMP-13表达情况,统计阳性细胞数和阳性强度。肿瘤组织经4%甲醛固定、石蜡切片后,行SP法免疫组化染色。加入抗ING2和抗MMP-13,抗体滴度分别为1:50 和1:100,计算ING2与MMP-13阳性表达率。染色强度评分:0分-无色,1分-浅黄色,2分-黄色,3分-深黄色。阳性细胞百分比评分:0分-≤5%,1分-5%~25%,2分-26%~50%,3分-51%~75%,4分->75%。染色强度*阳性细胞百分比=最终得分,0~4分为阴性表达,5~12分为阳性表达。

1.3IRMA检测 取所有患者的空腹静脉血1~2 mL,静置30 min后,1 000 rpm/min离心10 min,取上层血清,采用IRMA法检测血清ING2与MMP-13含量,检测试剂盒购自北京福瑞生物工程公司,阳性阈值:ING2≥6.66 pg/mL,MMP-13≥4.45 pg/mL。

1.4调查内容 调查两组患者的性别、年龄、体质量指数、肿瘤部位、肿瘤直径等一般资料,重点记录结肠癌患者的组织学分化、浆膜浸润、临床分期、病理类型等情况。

2 结 果

2.1ING2与MMP-13 IRMA阳性率对比 结肠癌组的ING2与MMP-13 IRMA阳性率分别为71.8%和76.9%,高于结肠良性肿瘤组的14.1%和16.7%(χ2=52.977、56.875,P<0.05)。

2.2ING2与MMP-13 SP阳性率对比 结肠癌组的ING2与MMP-13 SP阳性率分别为74.4%和78.2%,高于结肠良性肿瘤组的15.4%和19.2%(χ2=54.833、54.292,P<0.05)。

2.3诊断情况 在156例患者中,IRMA诊断为结肠癌71例,结肠良性肿瘤85例;SP诊断为结肠癌77例,结肠良性肿瘤79例。

2.4诊断价值对比 IRMA诊断结肠癌的敏感性与特异性为89.7%(70/78)和98.7%(77/78),SP诊断的敏感性与特异性为98.7%(77/78)和100.0%(78/78),SP诊断的敏感性高于IRMA(χ2=5.778,1.006,P<0.05)。

3 讨 论

ING2在乳腺癌、胃癌、食管癌、白血病、肺癌等人类多种恶性肿瘤组织中表达上升,而这种表达上升的现象是由于mRNA 表达减少或稳定性下降有关,揭示ING2表达上升很可能参与了这些恶性肿瘤的发生发展,初步确定了ING2 促癌基因的地位[4]。MMP-13 蛋白的过表达属于病理状态,与肿瘤细胞的增殖与转移密切有关[5]。

本文结果显示,结肠癌组的ING2与MMP-13 IRMA阳性率分别为71.8%和76.9%,高于结肠良性肿瘤组的14.1%和16.7%(P<0.05);结肠癌组的ING2与MMP-13 SP阳性率分别为74.4%和78.2%,高于结肠良性肿瘤组的15.4%和19.2%(P<0.05),表明ING2与MMP-13在结肠癌患者IRMA及SP免疫组化染色诊断中都呈现高表达状况。当前也有研究显示结直肠癌组织中MMP-13蛋白高于非病灶组织,也高于正常人群,且与结直肠癌的病理特征具有相关性,还可预测患者的预后[6]。ING2 在肿瘤组织或正常组织中的表达情况可能存在对器官的选择性或是受不同蛋白的调控作用,ING2 高表达可能也参与了对一些与恶性肿瘤侵袭、浸润、转移相关的基因的调控,而基质属蛋白酶家族就是参与肿瘤侵袭、浸润、转移的主要基因家族[7]。

结肠癌也是最常见的恶性肿瘤之一,占消化道肿瘤的20.0%以上。早期结肠癌患者的5年生存率可在50.0%以上,而晚期结肠癌患者的5年生存率低于20.0%,因此早期诊断结肠癌具有重要价值[8]。IRMA检测属于无创性检测,还有简单、方便快速等特点,但是诊断的敏感性有待提高。免疫组化为病理科的常见检测方法,诊断的特异性与敏感性都比较高,但是诊断比较费时,对于诊断人员的经验要求比较高[9]。本研究显示,在156例患者中,IRMA诊断为结肠癌71例,结肠良性肿瘤85例;SP诊断为结肠癌77例,结肠良性肿瘤79例;IRMA诊断结肠癌的敏感性与特异性为89.7%(70/78)和98.7%(77/78),SP诊断的敏感性与特异性为98.7%(77/78)和100.0%(78/78),SP诊断的敏感性高于IRMA(P<0.05),表明两者诊断结直肠癌都有很高的特异性,但是SP诊断的敏感性更好。当前有研究显示显示ING2与MMP-13 在正常人类成纤维细胞中稳定的表达对维持其正常生长过程发挥着极其重要的作用,不过ING2与MMP-13在不同肿瘤类型中的表达也存在差异性[10]。

综上,ING2与MMP-13在结肠癌患者IRMA及SP免疫组化染色诊断中都呈现高表达状况,IRMA及SP诊断结直肠癌都有很高的特异性,但是SP诊断的敏感性更好。

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