牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定及临床治疗效果观察

2023-01-21朱晓琳

畜牧兽医科学 2022年11期

朱晓琳

（山东省博兴县畜牧兽医服务中心，山东滨州 256600）

0 引言

牛饲养过程中，子宫内膜炎病是一种存在较大危害的产科疾病，主要是牛产后感染细菌，导致子宫内发生膜粘液性、脓性局部炎症反应，若治疗不到位将会导致炎症快速扩散，诱发卵巢炎和输卵管炎等疾病，母牛产生发情、妊娠推迟、繁殖力下降、产犊时间间隔延长等症状，若症状严重，对牛体健康与繁殖性能造成影响。根据牛子宫内膜炎病原菌展开分析，需要开展分离鉴定，观察临床治疗效果，总结治疗子宫内膜炎的有效方法，提高牛子宫内膜病的治疗水平。

1 发病原因及判断标准

1.1 病因

牛的饲养产业一直以来呈持续增长趋势，逐渐形成规模化养殖模式。但在此期间也增加牛的繁殖障碍病的发病率，子宫内膜炎便是其中之一[1]。该病是牛饲养中比较常见的疾病之一，无论国内还是国外都有很高的发病率。如调查显示，牛的子宫内膜炎发病率为10%～70%。我国奶牛患子宫内膜炎的发病率同样较高，在成年母牛中占比大于17%。牛子宫内膜炎在繁殖与产业经济等方面均会带来非常严重的损失。

母牛在生产后，子宫机能的恢复一般和细菌感染有很大关系，病原菌引发子宫疾病，是导致母牛不孕症其中一个非常重要的病因。子宫内膜炎这类繁殖障碍病导致牛无法发情、不孕，因牛本身属于单胎动物，在患子宫内膜炎后，延长繁殖间距，饲养者的饲养成本与治疗成本也会不断增加。面对子宫内膜炎这一疾病，必须重视治疗工作。

1.2 判断标准

子宫内膜炎主要发生于子宫内膜部位，是母畜生产后比较常见的一种生殖器官疾病。通常产后子宫感染的原因是受到细菌污染，牛产后子宫内部会有细菌分离，但牛可自行净化。数据显示，10%～17%母牛在产后因入侵病原菌导致子宫感染。一旦造成子宫感染，致病菌会直接粘附于子宫黏膜，植入或是穿透上皮组织后将细菌释放，引发子宫疾病[2]。针对子宫内膜炎的有关研究中，子宫感染共有4类，分别是子宫内膜炎、子宫炎、化脓性肌炎、子宫蓄脓。

发生子宫内膜炎的时间是在产后10 d内，临床症状主要有体温骤增、精神欠佳、食欲不振等，还会伴有举尾、努责的症状，阴门部位会有灰白褐色黏液流出，甚至会有恶臭味道。饲养人员透过直肠检查牛子宫，发现比较明显的子宫角增粗、子宫壁增厚及弹性减弱等症状。很多产后牛无明显临床症状，平时发情周期无异常，只是出现屡配不孕现象。对此类牛进行阴道检查，子宫无异常，当其发情可发现分泌物明显增加，同时还会有浑浊与絮状物[3]。

第一，临床型子宫内膜炎。饲养人员可以利用直肠检查判定，或者直接观察阴道内子宫分泌物性质。在母牛产后21 d后，饲养人员采用直肠检查的方式进行触诊，如果发现子宫颈大、存在明显波动感和脓性子宫恶露、脓液性子宫恶露等现象，加之母牛并无全身症状，此时便可判断为临床型子宫内膜炎。一般临床层面的子宫内膜炎，即为此类子宫内膜炎。第二，隐性子宫内膜炎。此类子宫内膜炎是指阴道内部无脓性分泌物，建议通过子宫内部分离、培养分泌物的方式进行判定，或者也可直接采用细胞学检查、组织学检查等方式判定是否存在子宫内膜炎。细胞学检查在所有检查方法中操作最为简便且快速。研究发现，母牛产后20～33 d，子宫细胞学检查得出PMN（polymorphonuclear leukocyte，多形核白细胞，简称PMN）在18%以上；或者是在产后的34～47 d，子宫细胞学检查PMN在10%以上，满足以上条件即可判定为隐性子宫内膜炎。

2 子宫内膜炎病原菌分离鉴定

2.1 子宫内容物细菌

针对子宫内膜炎病原菌进行分离鉴定，其中子宫内容物的细菌分离，选取50头患牛子宫内容物，将其培养、分离、纯化后得到78株细菌，具体包括42株革兰氏阳性菌、36株革兰氏阴性细菌。经过鉴定，发现此次患牛感染子宫内膜炎的病原菌包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、奥斯陆莫拉菌、苏云金芽孢杆菌、溶血葡萄球菌、乳房链球菌、蜡样芽孢杆菌。在50头患牛中选择30头作为对照组，组内患牛的子宫内容物在经过培养、分离、纯化后，发现32株细菌，其中8个样品分离后没有发现细菌，具体包括17株革兰氏阳性菌、15革兰氏阴性细菌株。对比发现，鉴定结果和对照组内的健康牛分离获得的细菌相同。

2.2 细菌药敏试验

分离后得到的细菌分别进行针对阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、复方新诺明的试验，结果显示细菌对上述4种药物敏感。

2.3 细菌致病性

采集患牛子宫内容物分离菌组织致病性试验，试验过程中选取50只小鼠，以随机的方式分为10组，其中1组是空白对照。所有试验组采取腹腔注射方式，注入0.5 mL新培养细菌悬液。试验人员最后对发病与致死情况进行观察。发现试验样品包含大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，当小鼠腹腔攻毒后2 d内出现死亡现象，尤其是大肠杆菌，腹腔攻毒后2～3 h便会致死，此时试验人员在病变脏器内回收采集到接种菌。

3 临床治疗及饲养管理

3.1 诊断方法

3.1.1 临床诊断法

母牛处于健康状态时的子宫分泌物呈透明、拉丝状，分泌量较多。母牛一旦患子宫内膜炎，最为明显的症状便是子宫分泌物增加，而且更加稀薄，不再拉丝。还会有部分母牛在患病后，子宫分泌量极少，颜色转为灰白色，极为浑浊[4]。所以，采取临床诊断法，可以按照牛的临床症状进行观察和判断，按照子宫分泌物特征进行诊断，此方法比较适合患病初期的母牛。

3.1.2 直肠检查法

直肠检查法在子宫内膜炎的临床检查中常见，规范的直肠检查一般针对各个发病阶段和各状态的牛与子宫形态，展开反复检查，方可准确地判断发病症状。直肠检查法往往常适合经验丰富的兽医，检查水平越高，检查准确率也就会比较高。饲养人员采用该方法进行子宫内膜炎的检查，可能存在误诊率[5]。直肠检查患病牛子宫颈呈粗大状，双侧子宫角对称度高，子宫弹性减弱，但并不会因此扩大子宫腔。

3.1.3 内窥镜检查阴道法

内窥镜检查阴道法属于一种直接检查的方式，检查结果准确性往往较高，可以比较直接的观察到母牛子宫颈口分泌物特性。若将内窥镜检查阴道法和细菌分离组合应用，有利于提高子宫内膜炎检查准确率。实际上在临床诊断中，使用该方法往往会在诊断环境、诊断设备上有比较严格的要求，而且价格高，这也限制此方法在临床诊断中的应用。此外，内窥镜检查法与直肠检查法组合应用，也能提高诊断结果的准确性。若母牛患子宫内膜炎，子宫颈外口位置必然有脓性分泌物[6]。

3.1.4 微生物培养法

导致牛子宫内膜炎的原因与感染细菌有关，所以临床诊断也可以通过培养微生物的方式进行。诊断人员采集母牛在生产后子宫的排出物，便可了解子宫感染细菌的基本情况。临床检查环节建议将微生物培养法和药敏试验法组合，更有后续的临床治疗。

3.1.5 子宫活组织法与细胞学检查法

根据近年牛子宫内膜炎积累的诊断经验，细胞学检查是相对重要的诊断方法之一，诊断准确率高。诊断人员灌洗患病牛的子宫，观察灌洗液中的多形粒细胞，如果有多形粒细胞存在即可诊断为子宫内膜炎。子宫活组织检查法也可以诊断母牛子宫内膜炎，但该方法在应用中，采样可能会对子宫内膜造成损坏，降低牛的机体繁殖性能。此方法往往不常用于子宫内膜炎诊断。

3.2 治疗

诊断牛患有子宫内膜炎后，便可根据具体症状与类型提出治疗方案。第一，急性子宫内膜炎。患有此类子宫内膜炎的病牛，建议采用0.5%普鲁卡因（200 mL）、青霉素和链霆素各80万IU、100万IU，将其完全混合后注入病牛的子宫，每日注入1次，1周为1个疗程，待1个疗程后根据恢复情况决定是否再延续。开始治疗时病牛每日采取皮下注射、肌肉注射的方式，在病牛体内注射己烯雌酚（4 mL），同时采取肌肉注射方法，注入50 IU催产素，待3～4 d后观察病牛是否有全身症状，其间注意需要注意补糖、补钙等[7]。

第二，慢性子宫内膜炎。慢性子宫内膜炎包括慢性卡他性子宫内膜炎、慢性卡他脓性子宫内膜炎、慢性脓性子宫内膜炎3种。①慢性卡他性子宫内膜炎。需要用到土霉素（2 g）、青霉素（160万IU）、多粘菌素（1 g），将其与植物油（20 mL）混合后获得混悬剂，在病牛子宫内部1次注入，每隔2日注射1次，持续注射3次即可。另外，病牛采取肌肉注射方式注入己烯雌酚（2 mL），第2日起改为皮下注射，向病牛注入催产素（35 IU），每日注射1次，持续5日即可。②慢性卡他脓性子宫内膜炎。治疗此类子宫内膜炎，需要用到5%～10%的普鲁卡因（10 mL）、青霉素/链霉素（100 IU）、垂体后叶素/催产素（25～50 IU），完全混合后，在病牛的尾根侧面部位小窝前方上角，采取一次性注射方式注入体内，同时需要冲洗子宫，在子宫中灌注药物可获得更加理想的治疗效果。③慢性脓性子宫内膜炎。此类疾病的治疗，可根据病牛的体重，将链霉素（5 mg/kg）、5%葡萄糖溶液（20 mL）均匀混合，以静脉注射方式注入病牛体内，每日注射1次，在1个疗程内持续注射3 d，待3日后再继续1个疗程。若同时检查发现存在败血症，每日用药2次，5 d后可调整为1次/d，13 d为1个疗程，其间还需冲洗病牛子宫及子宫内部灌注药物。如果病牛出现子宫积水或是积脓现象，治疗人员应先扩张子宫颈，使子宫中的液体、脓汁快速排出，随后可冲洗子宫并在子宫内部灌注药物。

第三，隐性子宫内膜炎。一般母牛输精之前的6 h及后12 h，使用青霉素（160 IU）/链霉素（200 IU）和10%葡萄糖/生理盐水（50～80 mL），将其完全混合，一次灌入子宫。若输精前、后并无用药，建议在3 d后灌注，持续灌注3次，便可以将子宫炎症消除，增加母牛受孕可能性。

3.3 临床治疗效果

根据牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定结果与各项治疗方法，发现阿莫西林钠、氨苄西林钠、头孢噻呋钠、复方新诺明4种药物，经过2个疗程的治疗后，子宫内膜炎治愈率依次可达到91.55%、83.62%、100%、83.65%。在治疗过程中使用生理盐水，对应的无效率是91.66%。建议针对患病牛采取阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、复方新诺明进行治疗，可保证良好的治疗效果。

3.4 饲养管理

对于母牛的饲养，需要保证摄入充足的营养物质，采食饲料的过程中可以摄入有利于其免疫力的矿物质、维生素等。饲养人员定期清扫、消毒牛舍，确保饲养环境洁净度。母牛进入配种阶段，务必要对所有需要用到器械进行消毒，其中包括助产人员的消毒，以免母牛造成细菌感染。母牛分娩与助产阶段，其间各项操作都要规范，不能损坏母牛生殖道。