毒品美沙酮的液相色谱定量分析

王 帅 齐萌锴 韩君良 王敬艺 华 海＊

（昆山市公安局刑事科学技术中心，江苏 昆山 215300）

0 引言

美沙酮（Methadone）又名美散痛、阿米酮，是国家管制的麻醉药品。美沙酮维持治疗（Methadone Maintenance Treatment，MMT）是第一个治疗海洛因依赖被广泛使用的阿片类替代药物，由于美沙酮的戒断症状较轻，从而成为最常使用的脱毒药物，用于海洛因毒品成瘾的脱毒药品美沙酮多为白色片剂（不溶于水，防止二次注射）及橙色糖浆。MMT使海洛因成瘾者降低甚至消除对海洛因的渴求，从而减少由于毒品依赖带来的社会问题。当前，国家在许多地市都设有美沙酮替代治疗发放点，在这些发放点进行戒毒治疗的海洛因依赖患者中存在非真实服药（将药物吐出/未吞服）的情况，并将收集到的用于治疗美沙酮再次售卖。这样的新型犯罪会引发新的社会问题。当部分案件涉毒数量十分庞大时，必要时需要对可能被判处刑罚的嫌疑人的毒品案件物证进行毒品组分含量的检测，为依法严厉惩处相关毒品违法犯罪行为，对其中美沙酮含量的定量十分重要。

1 设备与材料

1.1 仪器设备

安捷伦1200高效液相色谱仪（HPLC）；自动进样器；低噪音空气泵；G—560E旋涡混合器（SCIENTIFIC INDUSTRIES公司）；SB6500超声波清洗器（上海必能信超声波仪器厂）；医用低速离心机：最大转速4 000 r/min；紫外分光光度计（赛默飞世尔科技有限公司）；玻璃研钵。

1.2 试剂与标准物质

甲醇（分析纯）；1.0 mg/mL美沙酮可溯源标准储备溶液（取美沙酮标准物质（二级标准溶液，1.0 mg/mL）为储备溶液，冰箱冷藏保存，有效期24个月）；不同浓度的美沙酮标准溶液（分别配制含美沙酮目标物浓度分别为0.01 mg/mL、0.025 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL和1.00 mg/mL的工作曲线用系列标准溶液，均采用1.0 mg/mL美沙酮可溯源标准储备溶液进行逐级稀释配制，随配随用）。

2 方法

2.1 色谱条件

色谱柱：Lichrocart RP-18e（25×4 mm，5μm）；流动相：甲醇：去离子水：三乙胺缓冲液（PH=8）=65∶34.8∶0.2；流速：1 mL/min；柱温：50℃；检测波长：220 nm、270 nm、290 nm。

2.2 样品处理

检测样品为涉毒案件查获的疑似毒品物证；取定性结果为美沙酮的毒品物证检材适量备用；平行称取约10 mg液体样品2份，置于10 mL具塞玻璃试管内，加入10 mL甲醇溶剂用超声波清洗器超声10 min至完全溶解，摇匀后置于离心机内4 000 r/min离心3 min作为样品制备溶液；吸取1 mL样品制备溶液，涡旋振荡混匀后作为样品测试液HPLC检测；平行吸取1 mg/mL标准美沙酮工作溶液1 mL为标准测试液HPLC检测；另取空白甲醇试剂作为空白对照。

2.3 进样与记录

吸取空白甲醇试剂、样品测试液、美沙酮标准测试液分别置于自动进样玻璃小瓶内，用内衬和瓶盖封口，放入液相色谱仪自动进样器中，每个测试样品吸取2 μL进样，样品测试液和不同浓度的美沙酮标准测试液各进样3次，记录各成分的峰面积。

2.4 单点计算法

按公式（1）计算样品中美沙酮组分的含量。

式中：W为样品中毒品美沙酮的百分含量（%）；A样为样品测试液中美沙酮的峰面积平均值；A标为美沙酮标准测试液的峰面积平均值；C标为美沙酮标准溶液浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；M为样品称取重量，单位为毫克（mg）；V初为样品溶液配置的初始体积，单位为毫升（mL）。

2.5 相对相差计算

按公式（2）计算出两个平行样品之间美沙酮含量的相对相差：

式中：RD为相对相差（%）；X1、X2为两个样品平行定量测定的含量数值；X为两个样品平行定量测定含量的平均值。

3 结果

3.1 美沙酮的液相色谱响应

利用美沙酮测试液，按上述实验部分的仪器分析条件进行HPLC分析，可以获得相应的色谱峰保留时间，其中美沙酮的保留时间为18.443 min，其色谱图如图1所示。

图1 HPLC色谱图中美沙酮的出峰情况（RT=18.443 min）

3.2 标准工作曲线

根据不同浓度的美沙酮标准溶液所得线性工作曲线数据点的色谱图如图2所示。获得的线性工作曲线及相关系数如图3所示。

图2 线性工作曲线数据点的色谱图

图3 线性工作曲线及相关系数

美沙酮工作曲线线性范围为0.01～1.0 mg/mL，在该浓度范围内具有良好的线性关系（相关系数r=0.999 6）。定量下限为0.01 mg/mL（1.0%）。

3.3 精密度

分别取低中高三个浓度的美沙酮标准溶液，每个浓度取三个样品，每个样品测试三次，连续做三天，其日内与日间精密度数据如表1所示。美沙酮HPLC测定中日内精密度普遍优于日间精密度，美沙酮浓度越高，其精密度也越好。日内精密度RSD＜5%。

表1 美沙酮HPLC检测的精密度（n=3）

3.4 实际案例应用

对某地市2019年8月份案件中查获的毒品美沙酮，取约10 mg平行样品两份，采用本方法进行含量检测，其结果如表2所示。检出样品中美沙酮的含量约为33%，其中两平行样品的相对相差为0.45%。

表2 美沙酮样品中含量

4 结语

含酸性硅羟基的填料可使碱性样品的保留值延长，导致峰型拖尾，这是由于碱性化合物与酸性硅羟基的二次硅羟基相互作用产生各类叔胺，选择三乙胺作为流动相，阻碍了样品中碱性化合物与硅羟基的作用，从而保证完好的峰型。用紫外可见分光光度法对一定浓度的美沙酮标准物质进行测定，可以得到检测美沙酮最适检测波长，将该波长应用于高效液相色谱仪的参数设置中，对美沙酮的准确定量起到关键作用。该方法测得的美沙酮标准工作曲线具有很好的线性关系（相关系数r=0.999 6），并且日间和日内精密度（RSD）较好。HPLC法测得的美沙酮含量日内精密度普遍优于日间精密度，并且随着美沙酮浓度增高，其精密度也越好（RSD＜5%）。得出结论采用该高效液相色谱法对美沙酮的含量进行定量分析，操作简便、数据准确、重现性好，适用于涉毒案件中查获毒品美沙酮物证的含量检测。

除本文中所述美沙酮外，有报道称社会上还有类似的地芬诺酯、莎菲等戒毒药品被不法分子收集储存并售卖的新型犯罪。此类药品大多以粉末制成片剂的形式存在，通过鼻腔粘膜给药、舌下含化或者直接吞服等方式吸收，具有极大的危害性和隐蔽性。本文所述的美沙酮除片剂外，另有液体形式存在，通过口服、直肠粘膜给药的方式吸收。由于此类违法犯罪的进行相当的隐蔽以及给药单位缺乏戒毒药品相关的专业知识，相关政府部门的监管尚存不足之处，许多违法分子并没有在给药时直接吞服，而是在监管人员放松警惕时将药品吐到小容器进行毒品二次售卖等行为的发生。笔者后续还会继续研究相关案例中该药品的检测方法，为打击该新型违法犯罪提供有力的法庭证据。