不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分初步分析
2023-01-15陈丽娟李洪雯张国薇王建辉
王 东,陈丽娟,李洪雯*,刘 佳,张国薇,王建辉
不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分初步分析
王 东1,陈丽娟1,李洪雯1*,刘 佳1,张国薇1,王建辉2
1. 四川省农业科学院园艺研究所,四川成都 610066;2. 成都大学食品与生物工程学院,四川成都 610106
风味改良是目前草莓育种最重要的工作之一,黄毛草莓因其具有特殊的香气成分而被广泛关注,四川等西南地区黄毛草莓资源丰富,但目前其香气成分的研究并不系统,本研究通过分析不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分,拓宽栽培草莓遗传背景,为创新利用黄毛草莓资源和育种攻关提供理论依据。本研究采用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术,初步分析6个不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分的差异。结果显示,共检测出89种香气物质,与文献报道的栽培草莓香气成分不同,除丽江玉龙雪山外,其他5个地理来源的草莓香气成分中酯类化合物所占比例均不高。本研究共检测出相对含量大于1%的挥发性物质56种,其中醛类2种,烃类19种,酯类16种,酮类5种,醇类4种,胺类和酸类5种,其他化合物5种。无共同的芳香成分,芳香成分以酯类和烃类为主,但未达50%。丽江玉龙雪山的黄毛草莓香气成分种类最为丰富,万源秦巴山的黄毛草莓香气成分种类最少。测得的香气成分中,相对含量较高的挥发性成分依次为:赤藓-9,10-二溴二十五烷、二丁基邻苯二甲酸酯、苯乙胺等。聚类分析和主成分分析结果表明,丽江玉龙雪山黄毛草莓的香气成分被划分为单独一簇。虽然同为黄毛草莓品种,香气成分却因为地理位置及环境特点大不相同,关于环境对草莓挥发性物质的影响需要进一步研究。
顶空固相微萃取;气相色谱-质谱联用;黄毛草莓;香气
草莓因其浓郁的香气、美味的风味和丰富的营养而被称为“浆果皇后”,受到消费者们喜爱[1]。目前国内栽培草莓面积前两位的主要以日本品种‘红颜’和美国品种‘甜查理’为主,我国自主生产品种‘宁玉’‘白雪公主’等也有少量栽培[2]。风味改良是目前草莓育种最重要的工作之一,许多野生草莓资源具有优良的遗传性状,比如特殊的芳香成分、较强的抗逆性等,这些都有重要的利用价值[3]。我国是野生草莓资源最丰富的国家[4-5],充分利用野生草莓资源可以拓宽栽培草莓遗传背景。黄毛草莓是野生二倍体草莓,原产于我国。其中,西南地区是我国黄毛草莓的最主要分布区,生长在此区的黄毛草莓植株健壮,有较强的抗逆性[6]。其花期通常为4—6月,果期在5—8月,聚伞花序,花序略高于或平于叶面,其果实白色、淡白黄色或红色,圆球形,具有特殊的蜜桃香气或杏子味[7-9],香味因产地的不同而有明显差异[1]。充分了解黄毛草莓的香气成分有利于拓宽目前栽培草莓的遗传背景,目前对黄毛草莓香气成分缺乏系统的研究,前人在不同黄毛草莓中均检测到100种以上挥发性物质[10]。黄毛草莓是目前具有发展前景的栽培草莓风味改良的材料。比如王爱华等[11]利用黄毛草莓与栽培品种‘红颊’选育出4个具有蜜桃香味的草莓新株系,NOGUCHI等[12-13]利用来自云南的黄毛草莓选育出具有蜜桃香味的‘久留米IH1号’‘桃熏’草莓等,为草莓育种工作开拓新的领域,可见野生黄毛草莓是栽培草莓育种和改造遗传背景的重要资源。草莓芳香是其风味的重要组成部分,黄毛草莓果实的蜜桃香味受遗传、环境等影响,包含挥发性酯类、醇类和萜类等成分,其代谢调控非常复杂[14]。通过分析黄毛草莓果实香气成分,有利于育种工作者利用黄毛草莓果实改良草莓香气品质。LI等[15]研究表明,在四川省,黄毛草莓具有巨大的遗传变异性,不同的草莓香气遗传特征都可能在未来被利用。本研究利用顶空固相微萃取和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术测试6个不同地理来源的黄毛草莓(其中5个来自四川省)果实中香气成分的差异,初步探索不同地理来源的黄毛草莓香气成分,为育种者培育草莓新品种以及种质资源的保存和利用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
黄毛草莓果实分别采自川西南(攀枝花大黑山、冷水箐)、川东(广安华蓥山)、川东北(万源秦巴山)、滇西北(云南丽江玉龙雪山)等6个不同的地理位置。在每个采样地点,选择同一生长条件下的健康果实400~500 g,冰袋存储运输至北京市农业科学院林业果树研究所,放置在–40℃冰箱中冷冻保存。
1.2 方法
1.2.1 样品处理 参考张运涛等[16]的方法进行取样,用打浆机把提前冷冻好的草莓果实打碎成匀浆,从中取8 g的匀浆装入样品瓶中,瓶上部留有2 cm左右的空间,加盖封口,6个不同地理来源的样品进行3次独立的重复实验。
1.2.2 香气成分的提取 在样品处理前先将固相微萃取头在气相色谱进样口250℃老化2 h。老化后的萃取头插入样品瓶顶空位置,室温下萃取40 min(低温有利于小分子易挥发物质的萃取)。然后将萃取头取出插入气质联用仪,250℃解吸1 min,进行GC-MS检测分析。GC-MS分析条件:采用岛津GCMS-GC 2010气质联用仪;毛细管柱(DB-5MS):30 m×0. 25 mm;膜厚度0.25 μm;载气为氦气;流速为1 mL/min;程序升温:60℃保持2 min,以8℃/min升温到220℃,保持20 min。进样口温度250℃;E1离子源电子能量70 eV,质量范围30~550 amu。
1.3 数据处理
GC-MS原始数据文件经处理,按峰面积归一化法测定各样品的相对百分含量,未知化合物质谱图与NIST library和Wiley library 2个质谱库相匹配,选用高相关的检索结果,初步分离确定各化合物成分。
采用Microsoft Excel 2019、Origin Pro2021b、R软件对数据进行进一步整理和分析。
2 结果与分析
2.1 不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分的差异
6个不同地理来源的黄毛草莓的GC-MS总离子流图如图1。草莓果实主要产生几种类型的挥发物,包括酯类、醛类、酮类、烃类、胺类和酸类等,本研究共检测出89种挥发性物质(图2)。黄毛草莓果实采自不同的地理区域,这些区域生态环境各异,其香气成分也大不相同。攀枝花大黑山黄毛草莓有19种香气成分,其中烃类化合物(6种)占31.58%,酯类(6种)占31.58%,酮类(2种)占10.53%,醇类(2种)占10.53%,胺类和酸类(3种)占15.79%。广安华蓥山黄毛草莓有17种香气成分,其中烃类化合物(4种)占23.53%,醛类(1种)占5.88%,酯类(3种)占17.65%,酮类(3种)占17.65%,醇类(1种)占5.88%,胺类和酸类(4种)占23.53%,其他类化合物(1种)占5.88%。攀枝花冷水箐黄毛草莓有17种香气成分,其中烃类化合物(5种)占29.41%,酯类(2种)占11.76%,酮类(2种)占11.76%,醇类(2种)占11.76%,胺类和酸类(4种)占23.53%,其他类化合物(2种)占11.76%。万源秦巴山黄毛草莓有14种香气成分,其中烃类化合物(5种)占35.71%,酯类(5种)占35.71%,酮类(1种)占7.14%,醇类(1种)占7.14%,胺类和酸类(2种)占14.29%。冕宁县灵山寺黄毛草莓有19种香气成分,其中烃类化合物(8种)占42.11%,酯类(4种)占21.05%,醛类(1种)占5.26%,酮类(1种)占5.26%,醇类(1种)占5.26%,胺类和酸类(2种)占10.53%,其他类化合物(2种)占10.53%。丽江玉龙雪山黄毛草莓有23种香气成分,其中烃类化合物(5种)占21.74%,酯类(8种)占34.78%,酮类(4种)占17.39%,醇类(1种)占4.35%,胺类和酸类(1种)占4.35%,其他类化合物(4种)占17.39%。
图1 不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分总离子流图
图2 不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分差异
与前期报道的栽培品种草莓香气成分不同,除丽江玉龙雪山的黄毛草莓外,其他5个地理来源的黄毛草莓中酯类挥发性化合物并不是占比最多[17-18]。丽江玉龙雪山的黄毛草莓果实香气成分种类最为丰富,其次为攀枝花大黑山及冕宁县灵山寺的黄毛草莓。
表1对草莓果实中相对含量大于1%的香气成分进行了统计,可以看出,酯类和烃类化合物是本次试验草莓果实相对含量较多的物质。其中攀枝花大黑山、冕宁县灵山寺、万源秦巴山的黄毛草莓酯类物质相对含量最多,分别为17.96%、10.29%、3.61%,但是都没有达到50%。其他地区的黄毛草莓果实烃类化合物相对含量最多。攀枝花大黑山地区的香气成分种类是最丰富的,为14种。
2.2 不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分组成特点
表2列出了本研究测得的相对含量大于1%的全部挥发性物质,一共有56种相对含量大于1%的挥发性物质,其中醛类2种,烃类19种,酯类16种,酮类5种,醇类4种,胺类和酸类5种,其他类化合物5种,相对含量较高的化合物有赤藓-9,10-二溴二十五烷,二丁基邻苯二甲酸酯等。本研究测得的黄毛草莓果实中没有共有的挥发性成分。在攀枝花大黑山的草莓果实中,N-[(五氟苯基)亚甲基]-β,3,4-三[(三甲基甲硅烷基)氧代]-苯乙胺相对含量占比最多;在广安华蓥山草莓果实中,九甲基-3-(三甲基甲硅烷氧基)四硅氧烷相对含量占比最多;在冕宁县灵山寺的草莓中,二丁基邻苯二甲酸酯相对含量占比最多;在攀枝花冷水箐的草莓中,草胺酰肼相对含量占比最多;在万源秦巴山的草莓中,2-碘-3-甲基-丁烷相对含量占比最多;在丽江玉龙雪山的草莓中,赤藓-9,10-二溴二十五烷相对含量占比最多。
表1 不同地理来源的黄毛草莓果实香气成分比较
注:括号前数据表示种类数;括号里百分数为该类化合物相对含量统计。
Note: The data before the brackets indicate the number of species; the figures in brackets are statistics of relative content of these compounds.
表2 黄毛草莓果实中香气成分部分鉴定结果
续表2 黄毛草莓果实中香气成分部分鉴定结果
Tab. 2 Part of identification results of aroma components in fruits of F. nilgerrensis Schlecht (continued) %
续表2 黄毛草莓果实中香气成分部分鉴定结果
注:此表仅统计草莓果实中相对含量大于1%的香气成分。-表示未检测出。
Note: Only aroma components with relative content greater than 1% in strawberry fruits are counted in this table. - means not detected.
2.3 不同地理来源的黄毛草莓果实的香气成分聚类分析
使用OriginPro 2021b软件将不同地理来源的黄毛草莓果实中相对含量大于1%的香气物质进行聚类分析,采用z-score方法标准化数据,最后得到图3。从聚类分析热图可以看出,攀枝花大黑山、广安华蓥山和冕宁县灵山寺的黄毛草莓聚在一簇,攀枝花冷水箐和万源秦巴山的黄毛草莓聚在一簇,丽江玉龙雪山的黄毛草莓香气成分被分成单独一簇。
1~56:表2中相同序号的香气物质。
主成分分析结果显示(图4),第一主成分的贡献率为39.50%,第二主成分的贡献率为22.60%,二者的累计贡献率达到62.10%,表明F1、F2两个主成分解释了原香气物质的大部分方差信息。6个地理来源的黄毛草莓根据距离远近被分在不同的区域里,左上区域攀枝花大黑山和冕宁县灵山寺的黄毛草莓距离较近,相似性较大。左下区域为万源秦巴山、攀枝花冷水箐和广安华蓥山三处的距离较近,说明相似性较大,而丽江玉龙雪山的黄毛草莓被单独聚在右上区域,说明与其他地方的黄毛草莓香气成分相似性较小。虽然同为黄毛草莓品种,香气成分却因为地理位置及环境特点大不相同,同在攀枝花采样的黄毛草莓都被2种分析方法隔开,说明攀枝花大黑山和冷水箐两地的黄毛草莓香气成分差异较大。据调查,川西南地区攀枝花大黑山光照充足、温差大以及热量充沛;滇西北玉龙雪山年平均气温为12℃左右,属于南温带型高原季风气候,由河谷到山顶的气候垂直差异较大,而攀枝花大黑山和玉龙雪山两处的黄毛草莓香气成分较其他地理来源的黄毛草莓丰富。黄毛草莓的香气成分与其生境条件相关,还需作进一步研究。
图4 不同地理来源的黄毛草莓 PCA得分
3 讨论
截至2016年,一共鉴定出了979种草莓果实挥发性物质,其中有659种挥发性物质只报道过1次[19]。本研究共测出89种挥发物质,包括烃类、酯类、醇类、酮类等化合物,草莓果实不同的风味正是这些物质共同作用的结果。攀枝花大黑山、丽江玉龙雪山的黄毛草莓香气成分丰富,且酯类和烃类相对含量较高。在前人的研究中,酯类在草莓挥发性成分中占比最高[20],本次测得野生草莓果实中酯类和烃类相对含量较高,但都未达到50%。γ-癸内酯是果实桃香味主成分之一,对草莓桃香味的形成起着决定性作用[5, 21]。邻氨基苯甲酸甲酯是具有典型野生草莓香气的单一化合物,在一些栽培品种中很少发现[22]。本研究中并未测得这两类酯类化合物,可能是因为采样、测样的时间间隔过长或者未被本实验条件测得[23],导致部分挥发性成分的损失。
本研究的野生草莓果实分别采自不同的地区,分析得到的挥发性物质也不同,果实挥发特性取决于遗传、发育、生长环境、采后条件以及分析技术等多种因素,前人研究表明,四川西南地区的黄毛草莓蜜桃香味浓于滇西北、川南、川东、川中和川东北的黄毛草莓,这可能与川西南地区的光照充足、温差大以及热量充沛有关[24]。本研究结果显示云南丽江的黄毛草莓挥发性物质最多,为23种,川西南地区的黄毛草莓挥发性物质其次,而两地的聚类分析和PCA分析都表明两地黄毛草莓香气成分差异较大,两地的环境气候也大不相同,草莓香气的形成是与周围环境不断相互作用的结果[25],关于环境对草莓挥发性物质的影响需要进一步研究。
4 结论
本研究共检测到黄毛草莓果实产生89种挥发性物质,以酯类和烃类挥发物质为主,四川攀枝花大黑山、广安华蓥山、攀枝花冷水箐、万源秦巴山、冕宁县灵山寺、云南丽江玉龙雪山的黄毛草莓挥发性物质种类分别为19、17、17、14、19、23种,不同地域的黄毛草莓香气成分差异较大,关于环境对草莓挥发性物质的影响需要进一步研究。
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Preliminary Analysis of Aroma Components in Fruits of Different Geographical Sources ofSchlecht
WANG Dong1, CHEN lijuan1, LI Hongwen1*, LIU Jia1, ZAHNG Guowei1, WANG Jianhui2
1. Institute of Horticulture, Sichuan Academy of Agricultural Sciences, Chengdu, Sichuan 610066, China; 2. College of Food and Biological Engineering, Chengdu University, Chengdu, Sichuan 610106, China
Flavor improvement is one of the most important tasks in strawberry breeding.Schlecht has been widely concerned because of its special aroma components. There are abundant strawberry resources in southwest of China such as Sichuan, but the researches on its aroma components are not systematic.In this experiment, the aroma components of strawberry fruits from different geographical sources were analyzed.It could broaden the genetic background of cultivated strawberry and provide theoretical basis for innovative utilization of.Schlecht resources and breeding. In this study, headspace solid phase microextraction and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) were used to analyze the differences of aroma components in six different geographical sources ofSchlecht.The results showed that a total of 89 aroma substances were detected. Different from the previously reported aroma components of cultivated strawberry, ester compounds did not account for the largest proportion in the other five geographical sources ofSchlecht, except Lijiang Yulong Snow Mountain. A total of 56 volatile substances with relative content greater than 1% were detected in this study, including 2 aldehydes, 19 hydrocarbons, 16 esters, 5 ketones, 4 alcohols, 5 amines and acids, and 5 other compounds. There were no common aroma components, and the aromatic components ofSchlecht were mainly esters and hydrocarbons, but they did not reach 50%. The aromatic components were mainly esters and hydrocarbons.The variety of aroma components ofSchlecht in Lijiang Yulong Snow Mountain was the most abundant, while that in Qinba Mountain of Wanyuan was the least. Among the aroma components measured, the first three with higher relative content were as follows: erythro-9,10-dibromopentacosane, dibutyl phthalate, benzeneethanamine. Cluster analysis and PCA analysis showed that the aroma components ofSchlecht in Yulong Snow Mountain of Lijiang were divided into a single cluster. Although they were bothSchlecht varieties, the aroma components were quite different due to geographical location and environmental characteristics. The influence of environment on the volatile compounds of strawberry needs further study.
headspace solid phase microextraction; gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS);Schlecht; aroma
S668.4
A
10.3969/j.issn.1000-2561.2022.12.020
2022-02-23;
2022-04-29
“十四五”四川省科技支撑计划项目(No. 2021YFYZ0023-09);现代农业学科建设推进工程(No. 2021XKJS028)。
王 东(1986—),男,本科,助理研究员,研究方向:草莓、樱桃育种与栽培技术。*通信作者(Corresponding author):李洪雯(LI Hongwen),E-mail:1301126101@qq.com。