羊支原体肺炎防治研究进展

刘红燕，郭亚男，王建东，闫背背，张正刚，何生虎*

（1.宁夏大学 农学院，宁夏 银川 750021；2.宁夏农林科学院动物科学研究所，宁夏 银川 750002）

羊支原体肺炎（Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats，MPSG），俗称“烂肺病”，羊群一旦发病难以在短期内控制疫情，死亡率较高。即使部分羊能够通过药物治疗缓解症状，但肺部因受到支原体的侵害，后期难以彻底痊愈，导致饲料利用率降低，羊群增重缓慢，生长速度不达标，饲养周期长且成本投入高，常给养殖户造成重大经济损失。目前，羊支原体肺炎在我国依然广泛流行，除养羊集中的西北地区外，在西南地区发生羊支原体肺炎的报道也屡见不鲜[1]。这可能与跨地区转运羊群有密切关系，异地调运种公羊、母羊和贩卖羔羊，在运输途中造成羊群应激以及体内抗体水平降低，极易诱发本病[2]。应加强对羊支原体肺炎的认识和研究，从而为该病的防治提供参考。

1 病原学

支原体又称“霉形体”，是一类没有细胞壁、高度多形性、能通过滤菌器、可用人工培养基培养的最小原核细胞型微生物，大小为0.1～0.3 μm[3]。支原体目下设一科，为支原体科，科内设两属：其一为支原体属（Mycoplasma），属内有120种；其二为脲原体属（Ureaplasma），属内有6种，常见的动物支原体属此两属，其结构并不复杂，既没有叶绿体，也没有细胞核、细胞壁[4]。它与同种科其他支原体一样，繁殖方式不单一，可以在培养基中自我繁殖，一般情况下是二分裂繁殖。支原体的繁殖速度比细菌缓慢，但是生长规律与多数细菌相似，分为迟缓期、对数生长期、平台期和衰老期[5]。其平均生长周期为1～3 h，长者可达6～9 h。支原体经过培养后菌落为直径125～500 nm的椭圆形，部分呈现出细长的柳叶形并伴有细丝分枝，长度为1～150 μm，最典型的形态是近似于圆形、表面顺滑、外周圆润、中间厚边缘薄，俗称“油煎蛋”状[6]。

羊支原体肺炎病原类型多样，目前常见类型有：绵羊肺炎支原体（M.ovipneumonia）[7]、丝状支原体山羊亚种（M.mycoidessubsp.Capri,Mmc）[8]以及山羊支原体山羊亚种（M.Capricolum subsp.Capricolum,Mcc）[9]。此类病原体对外界环境的抵抗力不高，临床常用消毒剂，如75%酒精、烧碱、5%新洁尔灭等都可将它杀灭。此外，它不耐高温对紫外线敏感，在50～60 ℃的环境下40 min即可被杀灭，且对大环内酯类抗生素、四环素类、氟喹诺酮类抗生素高度敏感，对β-内酰胺类抗生素、链霉素不敏感。

2 流行病学

该病一年四季皆可发生，尤其在3—5月和12月至次年1—2月较为多发，羊群感染后发病率和死亡率高，会给养殖户造成严重的经济损失[10]。病羊及其分泌物是主要传染源，通过呼吸道将胸腔和肺叶中的大量病原体排出体外而感染其他羊只。其传播途径为呼吸道和消化道，以呼吸道传染较为多见，通过空气、飞沫、气溶胶等媒介传染，传播时间长、波及范围广，因此难以防控[11]。绵羊较山羊更易感染，易感性与羊只的性别无关。易感动物为1岁以下的羊群，以3月龄以下的羊只最易感染，感染率高达95.3%，病死率为27.5%[12]。如果不及时发现，采取严格的隔离措施，就会对养殖户造成难以估量的危害。此外，外界环境的骤然改变也会促使该病暴发，如养殖密度过高、环境寒冷潮湿、排污和通风不畅、消毒工作欠缺、距离运输远等。

3 致病机理

研究者对支原体致病结果进行分析后，推测羊肺炎支原体借助空气流动，从鼻腔、咽喉和气管进入呼吸器官，然后利用细胞表面结构吸附在呼吸道上皮细胞纤毛隐窝内开始定植，或者定植在气管细胞膜表面，其作用是抵抗纤毛的清理作用以及吞噬细胞的吞噬作用，利用宿主细胞成分释放出有毒代谢产物，如过氧化氢、溶血素等。通过呼吸途径，形成过氧化物损害纤毛以及上皮细胞膜，导致呼吸道纤毛脱落，从而阻碍宿主细胞清除炎性渗出物质，最终引起呼吸道疾病。另外，羊肺炎支原体能吸附到气管绒毛和肺泡细胞表面，从而致使部分肺小叶发生病变，随后肺部组织发生一系列病理变化，造成肺机能失调，引起羊发生浆液性、纤维素性炎症，逐步侵袭到整个肺脏，引起肺脏出现病变，发生纤维化[13]。此外，动物机体感染后会出现一系列复杂的免疫学发病机理，产生特异性与非特异性抗体。特异性抗体具有免疫保护功能和抵御能力，抵抗机体发生各类感染反应；非特异性抗体极易成为致病性因素，有可能导致过敏反应，从而引起皮疹、哮喘等病症。与此同时，其他部分抗体被激活后，与某些抗原形成免疫复合物，如果不能及时分解或清除，就容易积聚起来激活补体或巨噬细胞，引发器官炎症反应[14]。

4 免疫预防

疫苗接种是许多国家防控MPSG的主要措施。目前在生产实际中广泛应用的支原体疫苗是弱毒疫苗和灭活疫苗，从疫苗使用后的反馈信息来看，弱毒疫苗的预防效果比灭活疫苗好。20世纪50年代，中国兽药监察所率先研制出山羊烂肺病的组织灭活苗，对我国防控山羊支原体肺炎起到了重要作用。但由于该病的致病菌类型多样且病原复杂，该疫苗只针对其中2种病原体，对剩余的病原体不具备防治效果，其余病原体依然严重危害着养羊业的发展。韩笑等[15]选取临床分离株Mo SC02株待培养菌液达到109CCU/ml时，将其浓缩20倍后用甲醛灭活，按1∶1加入油佐剂进行乳化制成Mo灭活疫苗，对实验动物的保护率为100%。冯广余[16]筛选最典型的Mo菌株经扩大培养、膜分离机浓缩，测定浓缩液的蛋白含量为1.348 mg/ml，浓缩液为2.25×107CFU/ml后加入甲醛灭活，按54∶46加入油相和水相，制成Mo灭活疫苗，对10～15日龄的羔羊攻毒后均能产生良好的免疫应答反应，能有效减弱Mo菌株的致病性。高媛[5]利用氢氧化铝佐剂和其他佐剂分别制备了不同灭活疫苗，经过动物临床试验和免疫效价评估，证明用氢氧化铝为佐剂制成的灭活苗的免疫保护效果更好，为畜禽肺炎支原体灭活苗的研制提供了参考借鉴。Ziegler等[17]为降低羊感染支原体的风险，采取了控制宿主体内病原体的措施，通过采用不同含量的全菌蛋白制作疫苗，最后用酶联免疫吸附试验评价免疫原性。结果表明，大剂量的抗原结合佐剂制作疫苗免疫母羊，母羊能够产生强烈的人工主动免疫效果，羔羊能够获得天然被动免疫。但因支原体具有高度的抗原变异性，其膜蛋白容易变动，随之抗原表位也就发生改变。动物接种疫苗后，机体产生的抗体与抗原表型不匹配，导致支原体传统疫苗效果不佳。因此，科学家们逐步将重心转移到新型疫苗研发上，尤其是基因疫苗的研发。Barbosa等[18]运用生物信息学方法分析PG2型蛋白质，明确其细胞定位，确定其B细胞线性和构象表位，筛选出3种抗原表面蛋白（MAG-1560、MAG6130和P40），将它们作为支原体疫苗研发的新靶点。

5 防治措施

5.1 加强饲养管理

赵军[19]应用“养重于防，防重于治”的养殖方案，提高了母羊生产效率，保证了羔羊出栏率。因此，养殖户要将生物安全措施放在生产计划的首位，这样能最大限度地降低羊群发病率。李发杰[20]通过科学合理地规划羊场及羊舍，为羊群提供适宜的生存环境，发现能有效预防各种疾病，提高羊群出栏量。同时，在饲养过程中根据羊只日龄提供科学配比、营养全面、适口性好的日粮，能够间接提高羊群免疫力，降低MPSG的发病率[21]。高仲强[22]研究发现日常巡栏必不可少，尽量做到早发现、早诊断、早治疗。通过平时巡栏，可以及时发现异常羊只，一旦确诊为传染病，要立刻采取严格的隔离措施，力争将发病率降到最低，降低经济损失。

5.2 接种疫苗

目前，免疫接种是预防羊支原体肺炎公认的最有效措施。当前，支原体疫苗获得新兽药证书和专利证书，是由中国农业科学院兰州兽医研究所研制成功的山羊支原体肺炎灭活疫苗，该疫苗是二联灭活疫苗，可以同时预防绵羊肺炎支原体和丝状支原体山羊亚种的感染，同时实现绵羊和山羊的支原体肺炎免疫注射，在此病的防控方面发挥了一定作用。

5.3 药物治疗

羊支原体肺炎病原体是一种特殊的菌体，它没有细胞壁，对部分抗生素较为敏感，使用抗生素治疗羊支原体肺炎是药物治疗措施之一。Jay M等[23]通过琼脂稀释法评估最小抑菌浓度，结果显示林可酰胺类、大环内酯类、氟苯尼考等药物的MIC较低，可作为临床治疗药物，但四环素的MIC有所增加，推测是由于核糖体的位点突变导致，与动物克隆研究没有关系。Rahman M等[24]通过肉汤微量稀释法对分离菌株进行体外药敏试验，发现羊支原体肺炎对四环素、环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考等药物敏感，环丙沙星可作为羊支原体感染治疗的首选药物，其最低抑菌浓度为0.039 g/ml。中西药结合的治疗方法可以有效减少耐药性的产生。高武成[25]用清瘟败毒散和健胃散灌服羊只，外加肌肉注射30%替米考星和磺胺对甲氧嘧啶钠与板蓝根注射液，治疗几天后饲养场内病情逐渐稳定，以上研究表明正确选用药物可有效治疗羊肺炎支原体。

6 结语与展望

近年来，羊支原体肺炎在养羊业中广泛流行，其传染性强、病死率高、防控难度大，制约着我国养羊业的蓬勃发展。因此，要加强对羊支原体肺炎的认识，从生产管理中降低该病的发生和蔓延。同时，利用现代科学技术的发展，加强对羊支原体肺炎新型疫苗和药物的研发。