尿毒清颗粒辅助治疗早期糖尿病肾病对机体氧化/抗氧化平衡及血清LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1的影响*

俞 华，梁从蝶，胡小华，俞 勇

上海市静安区闸北中心医院肾内科，上海 200040

近年来，糖尿病的发病率逐年升高，糖尿病患者机体长期处于高血糖状态，可能诱发微血管病变，导致肾功能损伤，严重者甚至可诱发肾功能衰竭[1]。既往有研究显示，终末期肾病患者中近30%为糖尿病肾病(DN)患者，其致病率仅次于慢性肾炎[2-3]。因此，及早诊断和治疗早期DN，控制病情发展，对于改善患者预后有重要意义，目前临床中对于早期DN患者的治疗主要以改善生活方式、降压、控糖、调脂等手段为主，虽具有一定临床疗效，但仍有部分患者难以获得满意的效果。LncRNA是细胞反应、发育和疾病进展中的重要调节因子，对于机体氧化应激、炎症反应、肾小管上皮细胞凋亡也有具有作用，并参与了DN的发生与发展过程[4]。既往有研究指出，正常状态下机体的氧化和抗氧化系统处于动态平衡中，若活性氧自由基过量，则抗氧化酶表达不足，导致氧化/抗氧化失衡，体内蓄积大量活性氧自由基，诱发细胞和组织损伤[5]。因此本研究通过了解氧化/抗氧化平衡及LncRNA KCNQ1重叠转录物1(KCNQ1OT1)、LncRNA 人肺腺癌转移相关转录本(Malat1)水平变化，探讨早期DN的常规治疗效果，同时本研究在常规治疗的基础上采用尿毒清颗粒辅助治疗，该药具有通腑降浊、活血化瘀、健脾利湿的功效，可缓解炎症反应，稳定肾功能，具有一定的临床作用效果[6]。现分析报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1月至2022年1月于本院就诊的100例早期DN患者为研究对象，采用随机数字表法分为观察组和对照组，每组50例。观察组中男30例，女20例；年龄47～69岁，平均(51.54±3.68)岁；体质量指数(BMI)在21～31 kg/m2，平均(26.49±3.24)kg/m2；糖尿病病程2～10年，平均(4.14±1.57)年。对照组中男32例，女18例；年龄48～70岁，平均(52.47±3.17)岁； BMI在21～31 kg/m2，平均(26.18±3.55)kg/m2，糖尿病病程2～10年，平均(4.37±1.61)年。两组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

纳入标准：(1)符合DN诊断标准，且Mogensen分期为Ⅲ期者；(2)年龄≥18岁者；(3)病程≥6个月者；(4)已经签署知情同意书者。排除标准：(1)合并继发性肾脏疾病者；(2)合并泌尿系统疾病者；(3)合并重要脏器功能障碍者；(4)有糖尿病并发症者；(5)妊娠期或哺乳期者；(6)有药物过敏史者；(7)有认知障碍或精神疾病者。

1.2方法 对照组给予常规治疗，包括低盐、低脂、优质蛋白饮食，配合适量运动，依据患者情况给予胰岛素或降糖药治疗，并口服0.1 g/d的拜阿司匹林(厂家：拜耳医药保健有限公司；国药准字：J20130078)和20 mg/d的阿托伐他汀钙(厂家：辉瑞制药有限公司；国药准字：H20051408)，治疗3个月。观察组给予常规治疗联合尿毒清颗粒辅助治疗，尿毒清颗粒辅助治疗： 每天3次口服尿毒清颗粒(厂家：康臣药业有限责任公司；国药准字：H20150115)，每次5 g。两组均治疗3个月。

1.3观察指标

1.3.1氧化和抗氧化指标 均于治疗前1 d和治疗后1 d采集两组患者清晨空腹肘静脉血3 mL，以3 000 r/min离心(半径10 cm)15 min取上清液，使用放射免疫沉淀法检测血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、终末氧化蛋白产物(AOPP)、丙二醛(MDA)水平，试剂盒购自上海羽朵生物科技有限公司。

1.3.2肾功能 均于治疗前1 d和治疗后1 d采集两组患者清晨空腹肘静脉血3 mL，以3 000 r/min离心(半径10 cm)15 min取上清液，使用全自动生化分析仪检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素C(Cys C)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。

1.3.3血糖指标 均于治疗前1 d和治疗后1 d采集两组患者清晨空腹肘静脉血3 mL，使用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FPG)，使用糖化血红蛋白仪检测糖化血红蛋白(HbA1c)水平。

1.3.4炎症指标 均于治疗前1 d和治疗后1 d采集两组患者清晨空腹肘静脉血3 mL，以3 000 r/min离心(半径10 cm)15 min取上清液，使用酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、C反应蛋白(CRP)水平。

1.3.5LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平 均于治疗前1 d和治疗后1 d采集两组患者清晨空腹肘静脉血3 mL，以3 000 r/min离心(半径10 cm)15 min取上清液，采用实时荧光定量PCR分析LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平，试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司，KCNQ1OT1上游引物5′-CCCAGAAATCCACACCTCGG-3′，下游引物5′-TCCTCAGTGAGCAGATGGAGA-3′；LncRNA Malat1上游引物5′-CAGACCACCACAGGTTTA-CAG-3′，下游引物5′-AGACCATCCCAAAATGCTTCA-3′；GADPH上游引物5′-TGACTTCAACAGCGACACCCA-3′，下游引物5′-CACCCTGTTGCTGTAGCCAAA-3′。

1.3.6临床疗效 24 h尿蛋白定量、血糖均为正常范围，或24 h尿蛋白定量下降超过1/2、血糖下降超过1/3，各临床症状及体征基本消失为显效；24 h尿蛋白定量、血糖均未达到显效的标准，各临床症状及体征明显好转为有效；24 h尿蛋白定量、血糖、各临床症状及体征无明显变化甚至加重为无效；总有效率=显效率+有效率。

1.3.7不良反应 统计并比较两组胃肠反应、乏力、头晕的发生率。

2 结 果

2.1治疗前后两组氧化/抗氧化指标水平比较 与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组T-AOC、SOD、CAT水平均升高，且观察组高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；治疗后，两组AOPP、MDA水平均降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前后两组氧化/抗氧化指标水平比较

2.2治疗前后两组肾功能指标水平比较 与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组肾功能指标水平均降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

组别nAOPP(μmol/L)治疗前1 d治疗后1 dMDA(μmol/L)治疗前1 d治疗后1 d观察组5035.89±4.8720.41±1.12a15.32±1.789.01±1.02a对照组5035.42±5.2625.78±2.14a15.78±1.3611.47±1.54at1.9262.5731.7832.489P0.0630.0110.0790.025

2.3治疗前后两组血糖指标水平比较 与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组血清FPG、HbA1c水平均降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表2 治疗前后两组肾功能指标水平比较

表3 治疗前后两组血糖指标水平比较

2.4治疗前后两组炎症指标水平比较 与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组血清IL-1β、IL-6、CRP水平均降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 治疗前后两组炎症指标水平比较

2.5治疗前后两组LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平比较 与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平均降低，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 治疗前后两组LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平比较

2.6两组临床疗效比较 观察组临床有效率为96.00%，高于对照组的82.00%，差异有统计学意义(P<0.05)，见表6。

表6 两组临床疗效比较[n(%)]

2.7两组不良反应发生率比较 观察组不良反应发生率为10.00%，对照组不良反应发生率为12.00%，两组比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表7。

表7 两组不良反应发生率比较[n(%)]

3 讨 论

DN的基本病理变化为肾小球基底膜增厚和基质增生，患者主要表现出尿液内蛋白量升高、身体水肿、肾功能排泄紊乱等临床症状[7]。目前世界范围内1亿多人口患有糖尿病，其中42%的患者可随病情的进展而发生肾脏疾病，加重肾脏负荷[8]。而糖尿病患者进展为DN患者的发病机制相对复杂，据报道与糖代谢异常、遗传、多元醇通路激活、氧化应激等多种因素均存在密切相关，且各因素相互作用会加剧病情严重程度，诱发肾功能衰竭，甚至导致患者死亡[9-10]。因DN患者复杂的发病机制，仅凭西药治疗无法有效控制其病情发展，因此考虑给予患者中西医结合疗法，考虑DN患者的病理机制特点为外体虚弱，内里实火，病情发展与各脏腑均存在密切相关，因此中医学认为治疗DN患者应当以消炎消肿、清热解毒、祛湿利尿为主，因此本研究辅以患者尿毒清颗粒治疗，以期能改善临床疗效[11-12]。

尿毒清颗粒内含大黄、桑白皮、黄芪、白芍、茯苓、丹参、白术、车前草、苦参、何首乌等药物，其中大黄可泻热通肠、逐瘀通经、解毒凉血，桑白皮可利水消肿，黄芪可利水消肿、补气固表、排毒祛浓，白芍可平肝止痛、敛阴止汗，茯苓可健脾渗湿、利水消肿，丹参可通经止痛、活血祛瘀，白术可健脾益气、燥湿利水，车前草可清热解毒、利水消肿，苦参可清热解毒、利尿燥湿，何首乌可补肝益肾、益精血，因此尿毒清颗粒内诸药共同发挥健脾利湿、活血化瘀、清热解毒的功效[13-14]。本研究结果显示，与治疗前1 d比较，治疗后1 d两组T-AOC、SOD、CAT水平均升高，且观察组高于对照组(P<0.05)；两组AOPP、MDA、肾功能指标、血清FPG、HbA1c、IL-1β、IL-6、CRP、LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平均降低，且观察组低于对照组(P<0.05)。氧化/抗氧化平衡为肾脏组织结构重要的病理缓解过程，若该平衡失衡，则会导致肾组织损伤，T-AOC、SOD、CAT、AOPP、MDA为临床常用的氧化产物和抗氧化指标，其水平的高低能够反映出氧化/抗氧化平衡情况[15-16]。因此，本研究结果提示尿毒清颗粒可帮助改善氧化/抗氧化平衡，减少DN患者体内氧化产物的生成，提高机体的抗氧化能力，缓解患者的氧化应激反应。同时有研究指出，LncRNA KCNQ1OT1在糖尿病患者和糖尿病小鼠心脏组织内均呈现高表达，其可促进血管生成，促进细胞增殖，相反敲除LncRNA KCNQ1OT1则可诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖[17-18]。本研究结果与既往研究结果相似[19]，提示LncRNA KCNQ1OT1可能会加速DN患者病情进展，临床中可通过抑制LncRNA KCNQ1OT1高表达而抑制DN病情进展。而LncRNA Malat1为miR-23c的靶基因，LncRNA Malat1高表达会降低细胞内miR-23c的表达，导致焦磷酸化相关蛋白表达上调，促进机体释放大量炎症因子，诱发炎症反应，因此调控LncRNA Malat1表达可通过缓解炎症反应而延缓DN病情进展[20]。本研究中观察组联合应用尿毒清颗粒治疗后患者LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平降低，炎症反应缓解，氧化/抗氧化平衡改善，进而改善了临床疗效。且观察组和对照组的不良反应发生率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示联合尿毒清颗粒治疗安全性较好。

综上所述，尿毒清颗粒辅助治疗早期DN可通过调控氧化/抗氧化平衡降低LncRNA KCNQ1OT1、LncRNA Malat1水平，改善血糖水平和肾功能，抑制炎症反应，改善临床疗效，且不良反应少。