Actinotignum schaalii血流感染1例及病原体鉴定报告
2022-12-26孙馨琳张译文缪应业
袁 琴,彭 澄,孙馨琳,张译文,缪应业
(贵黔国际总医院检验科,贵州 贵阳 550024)
Actinotignumschaalii(A.schaalii,曾用名ActinobaculiumSchalii),1997年由Lawson等[1]首次报道,归入Actinobaculum属。2015年Yassin等[2]将Actinobaculiumschaalii与Actinobaculiumurinale重新归入Actinotignum属,该属现包括Actinotignumschaalii、Actinotignumsanguinis和Actinotignumurinale,其中A.schaalii报道引起的感染最多。该菌为革兰阳性球杆菌,是一种新型条件致病菌,兼性厌氧,需在5% CO2或厌氧气体环境中培养,生长缓慢,培养48~72 h后呈细小、灰白色菌落。笔者从1例急性尿潴留患者血培养标本中检出A.schaalii,结合文献复习,报告如下。
1 病例报告
1.1 病史 患者,男性,80岁,汉族,以“前列腺增生,急性尿潴留”于2022年1月24日收治入院。自诉近三月来,出现尿急、尿频和夜尿,平均5~6次/晚,无腰痛不适,无畏寒、发热,无咳嗽、咯痰,无心慌、胸闷,粪便成形,无血便,未引起重视,未治疗。入院前2 d出现无诱因下腹部胀痛和尿排出障碍。入院体格检查:体温36.5℃,血压141/64 mmHg,身高160 cm,体重55 kg,营养良好;皮肤及黏膜无瘀斑及出血点,浅表淋巴结未见肿大;双侧瞳孔等大等圆,结膜无充血,巩膜无黄染,对光反射正常;口唇正常;颈软,无抵抗,气管居中;呼吸20次/分,双肺呼吸音正常,未闻及湿啰音;心率99次/分,律齐,心音可,未闻及病理性杂音;腹部饱满,触软,肝脾肋下未触及;肠鸣音正常;双肾区无明显红肿及隆起,双侧肋脊角无压痛,双肾下极未触及,双肾区无明显叩痛,双肾区未闻及血管杂音,沿双侧输尿管行程区无压痛,耻骨上膀胱区无明显充盈及叩痛。阴茎无畸形,导尿管在位,引流尿液淡黄清亮,尿道外口无红肿及分泌物,阴囊及内容物未触及异常;脊柱四肢正常。直肠指诊:前列腺II度增大,质韧,表面光滑,未扪及结节,中央沟变浅,无触压痛,肛门括约肌张力正常。
1.2 辅助检查 血常规白细胞10.88×109/L,中性粒细胞9.77×109/L,中性粒细胞百分比89.8%;C-反应蛋白186.55 mg/L;尿常规潜血4+,尿蛋白2+;降钙素原65.42 ng/mL,前列腺特异抗原25.28 ng/mL,游离前列腺特异抗原4.75 ng/mL,复合前列腺特异抗原20.53 ng/mL;天门冬氨基酸转移酶55.83 U/L,胆碱酯酶4 801.9 U/L,总蛋白52.31 g/L,清蛋白32.14 g/L,肌酐121.72 μmol/L,β2-微球蛋白3.25 mg/L,其余指标正常。泌尿道超声检查结果:(1)右肾囊肿伴囊壁钙化;(2)膀胱壁增厚;(3)前列腺增大并钙化;(4)前列腺回声不均匀。经腹前列腺超声(前列腺、双侧精囊)检查结果:前列腺增生、肥大并钙化;胸部CT平扫示: (1)双肺肺气肿;(2)双侧胸膜增厚并钙化;(3)主动脉及冠状动脉硬化;(4)胸椎退行性改变;(5)左侧锁骨陈旧性骨折可能;(6)肝内多发囊肿可能。
1.3 治疗经过 以静滴乐伽和糖盐,防止电解质失衡;以哈乐、保列治抗前列腺增生治疗;给予头孢他啶静脉滴注5 d,无感染症状后出院。
2 病原体鉴定
2.1 标本来源 患者于1月25日凌晨采集两套血培养,置于BD FX血培养仪中培养,两套报阳时长分别为40 h 35 min、48 h 20 min,直接涂片革兰染色镜检,可见革兰阳性球杆菌,见图1。同时转种于哥伦比亚血琼脂培养基(迪景)、麦康凯培养基和普通巧克力培养基(庞通),置于5%的CO2气体环境中培养,观察48、72 h的菌落形态。
2.2 分离培养及菌落形态特点 培养48 h,哥伦比亚血琼脂和普通巧克力培养基上可见细小菌落;麦康凯培养基上未见菌落生长。培养72 h后,哥伦比亚血琼脂培养基上可见白色、干燥、无溶血环小菌落,见图2。涂片为革兰阳性杆菌,见图3。
图1 血培养直接涂片革兰染色Figure 1 Direct blood culture smear by Gram staining
A:培养48 h菌落形态;B:培养72 h菌落形态。图2 哥伦比亚血琼脂培养基上A. schaalii的菌落形态Figure 2 Colony morphology of A. schaalii on Columbia blood agar medium
图3 A. schaalii分离株革兰染色结果Figure 3 Gram-staining of isolated strains of A. schaalii
2.3 分离鉴定结果 采用安图Autof ms1000微生物质谱仪进行鉴定,菌株的处理方法采用提取法。取1 μL标本凃于靶板上,加入1 μL基质液,待完全干燥后,质谱仪进行鉴定。重复以上操作检测5次。 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定结果显示均为A.schaalii,质谱峰清晰可见,特征峰鲜明,得分为9.29分(9.0以上即为种水平置信),见图4。
图4 A. schaalii分离株质谱图Figure 4 Mass spectrogram of isolated strains of A. schaalii
表1 A. schaalii药敏结果Table 1 Antimicrobial susceptibility results of A. schaalii
3 讨论
A.schaalii是Actinotignum属中一种新兴的共生泌尿病原体[3-5],培养要求苛刻,须在富含血液的培养基和5%的CO2或厌氧环境才能生长,大多数实验室将接种尿的培养基放在普通温箱中培养,加上鉴定技术有限,很难将其分离鉴定。近年来随着对A.schaalii关注度的提高和鉴定技术的发展,关于A.schaalii导致的尿路感染和侵袭性感染报道越来越多。Kristiansen等[6]研究表明,A.schaalii具有编码附着菌毛的基因,该菌毛极大地增强了A.schaalii在泌尿道上皮细胞定植的能力,常定植于老年患者和儿童的泌尿系统。Kotásková等[7]研究297份尿培养结果发现,虽然A.schaalii常与Propionimicrobiumlymphophilum、Fusobacteriumnucleatum、韦荣氏球菌属和摩根摩根菌属共生定植,促进炎症发展,但与肠杆菌和葡萄球菌属的生长相互排斥,所以肠杆菌和葡萄球菌常见于A.schaalii阴性标本中。Bank等[8]采用实时荧光PCR检测252例(其中包括177例住院患者和75例门诊患者)各年龄段患者常规尿液中A.schaalii,结果在60岁以上的患者中,22%检出A.schaalii,菌量约为104~107CFU/mL,表明A.schaalii是尿液中一种常见定植菌。Andersen等[9]为了解A.schaalii在儿童尿液中的定植和感染情况,使用实时荧光PCR检测29名儿童的尿标本,结果7名儿童尿液中检出了A.schaalii,菌量约为104~107CFU/mL,表明儿童尿液中亦有A.schaalii定植,尤其是使用了尿不湿的儿童及新生儿。Lotte等[10]回顾分析172份2015年以前检出A.schaalii的病例,结果泌尿系统感染121例(70%)、菌血症33例(19%)、脓肿12例(7%)、蜂窝组织炎2例(1.5%)、椎间盘炎2例(1.5%)、心内膜炎1例(0.5%)和坏疽1例(0.5%);121例泌尿系统感染患者平均年龄大于60岁,大多有泌尿系统疾病或潜在的泌尿系统感染易感因素,其中68例为膀胱炎或前列腺炎,51例为肾盂肾炎。
A.schaalii不仅在尿培养中检出率较高,血培养中检出也较多。Bank等[11]分析丹麦MiBa数据库中98例A.schaalii菌血症病例,发现91.8%的菌血症患者年龄大于60岁,多为老年男性泌尿道感染患者。Pedersen等[12]回顾性分析瑞典南部57例Actinotignum属菌血症,其中53例为A.schaalii,该组菌血症患者年龄中位数82岁,72%为男性,63%有泌尿系统疾病。Hashimoto等[13]关于A.schaalii菌血症的综述中,106例A.schaalii菌血症患者中有65例来源于泌尿系统。依据文献推测A.schaalii菌血症的可能易感因素为:(1)老年男性;(2)泌尿系统感染者;(3)潜在的泌尿系统感染的易感因素。
A.schaalii导致其他部位感染也有报道。Jacquier等[14]报道1例由A.schaalii引起的膝关节假体感染,患者为84岁男性,有前列腺增生和慢性尿潴留病史,并一直有尿痛症状,推测该感染可能是由于尿路感染入血扩散而致。Bryan等[15]从1例27岁女性腹腔内感染积液标本分离出A.schaalii,该患者曾接受尿失禁灌肠和Monti手术(需要频繁导尿)治疗泌尿系统疾病,虽然尿培养阴性,推测该感染来源于泌尿系统。此外,与A.schaalii相关的最新临床病例还包括脓肿[16],但这些病例患者的平均年龄小于其他部位的患者,126例平均年龄为31.1岁(年龄9月至80岁),部分老年患者有慢性病及免疫缺陷病等。Vázquez-Pérez等[17]报道首例由A.schaalii引起的儿童生殖器溃烂病例,可能是生殖器区长期的潮湿和厌氧环境,促进了A.schaalii生长,引起相关的生殖器疾病。
综上所述,A.schaalii为兼性厌氧的革兰阳性杆菌,常见于尿路感染或者患有潜在泌尿道疾病的老年患者,是一种新型的尿路感染病原体,常与一些细菌共生定植[7],易作为污染菌处理。大多数实验室没有微生物质谱仪,不能准确地将其鉴定,导致其错误鉴定和漏检。当无明显诱因的老年慢性尿路感染患者经验性治疗无效,尿培养在普通培养下无细菌生长,而镜检出革阳性杆菌时,应考虑可能为A.schaalii感染,重新在5% CO2或厌氧环境下进行尿培养。目前对A.schaalii引起的感染治疗尚无指南和共识,可考虑β-内酰胺类药物连续使用两周以上。本病例为前列腺增生和尿潴留的患者,血培养检出A.schaalii,推测可能是由于尿路感染引起的血流感染。尿培养阴性,是由于培养条件不是5% CO2和厌氧环境,导致A.schaalii漏检。当前A.schaalii感染相关报道以欧美居多,国内较少,目前仅有1例自尿标本分离的A.schaalii报道[20],本例是国内首次血培养分离出A.schaalii的报道。
利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突。