Nod样受体蛋白3、酪氨酸激酶B受体与颅脑肿瘤术后伴抑郁的关系

赵运杰

长垣市中医医院外二科，河南 新乡 453400

颅脑肿瘤是发生在颅腔内的神经肿瘤，颅脑肿瘤发病率约在7～10/10万，且多数为恶性肿瘤，可出现在任何年龄阶段［1］。目前，针对颅脑肿瘤的治疗方法主要以手术为主，但颅脑肿瘤患者术后多数会出现焦虑、紧张、恐惧的心理，严重影响患者的治疗效果以及术后恢复效果，因此对于颅脑肿瘤患者术后的抑郁预测是较为重要的［2］。酪氨酸激酶B受体（tyrosine kinase receptor B，TrkB）可与血清脑源性神经营养因子相结合，从而发挥生物学功能，对神经元发挥保护的作用［3］。Nod样受体蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）是具有特征性的炎性体，能够在被激活后介导组织的炎性反应［4］。有研究［5］发现炎症反应是抑郁症生理学的潜在促进因子。因此，本研究选取长垣市中医医院收治的60例行颅脑肿瘤术患者的临床资料进行分析，以研究NLRP3、TrkB与颅脑肿瘤术后伴抑郁的关系，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取2018年10月—2020年10月长垣市中医医院收治的60例行颅脑肿瘤术患者作为研究对象。术后采用汉密尔顿抑郁量表（hamilton depression scale，HAMD）评分进行分组，总共17项，总分为35分，＜8分为正常，8～20分为可能存在抑郁症，20～35分为确定存在抑郁症，将得分＜8分的患者列入对照组（n=26），得分8～20分的患者列入抑郁组（n=34）。对照组26例，男12例，女14例；年龄24～71岁，平均年龄（50.21±5.98）岁；BMI指数18～22 kg/m2，平均BMI指数（20.23±1.04）kg/m2。抑郁组34例，男18例，女16例；年龄24～72岁，平均年龄（50.32±5.07）岁；BMI指数18～22 kg/m2，平均BMI指数（20.21±1.11）kg/m2。两组患者性别、年龄、BMI指数等一般资料具有可比性（P＞0.05）。本研究经医院医学伦理委员会审批通过。（1）纳入标准：患者于样本医院接受颅脑肿瘤手术，患者精神意志正常可接受HAMD量表评分，患者年龄＞18岁。（2）排除标准：既往存在抑郁症，患者家族存在抑郁症病史，患者资料不完整。

1.2 方法

血清NLRP3、TrkB检测方法：抽取患者空腹静脉全血2.5 mL，高速离心分层，放入肝素抗凝管内，采用3 000 r/min离心机进行离心，10 min后分离血清，取上清液，送至检验科。血清NLRP3选取杭州艾森生物科技有限公司的ACEA NovoCyte系列流式细胞仪进行检测。在5 mL流式管内加入适量细胞悬液，将细胞悬液内加入固定剂，在室温孵育15 min，采用3 mL PBS洗涤1次，离心1 200～1 500 rpm 5 min，舍弃上清，震荡，重新悬浮细胞。向细胞悬浮液内加入破膜剂，加入20～50μL浓度为1：50的NLRP3I抗，加入Santa cruz公司的山羊抗兔FITC-II抗50μL，振荡2 s在室温内孵育20 min，采用3 mL PBS洗涤，离心1 200～1 500 rpm 5 min，舍弃上清，重悬于BPS内。随后立即分析于0.5 mL的多聚甲醛固定液内，在2～8℃内避光储存，在24 h内分析。血清TrkB选取上海酶联生物科技有限公司的ELISA试剂盒进行检测，首先将试剂摇匀，避免出现大量泡沫，根据待测样品数量加入标准品的数量决定板条数，标本采用标本稀释液1∶1稀释后滴入50μL反应孔内，加入稀释好的标准品50μL，随后加入50μL生物素标记的抗体，盖上模板，37℃下温育1 h，甩去孔内液体，每个孔加满洗涤液，震荡30 s，将洗涤液甩清并用吸水纸拍干，重复三次操作。每孔加入80μL亲和链酶素-HRP，轻轻晃荡摇匀，在37℃内温育30 min，甩去孔内液体，每个孔加满洗涤液，震荡30 s，将洗涤液甩清并用吸水纸拍干，重复三次操作，每孔加入底物A和B50μL，轻轻晃匀，在37℃内温育10 min，取出酶标板，并加入50μL终止液，随后在450 nm波长对各个孔的OD值进行测量。两种指标均为住院期间所测平均值。

1.3 观察指标

对比两组患者血清NLRP3、TrkB水平；对血清NLRP3、TrkB与HAMD评分进行相关性分析，同时采用ROC曲线分析血清NLRP3、TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测价值。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清NLRP3和TrkB水平情况

实验组血清NLRP3显著高于对照组，且实验组的血清TrkB低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者血清NLRP3和TrkB水平情况（±s）

表1 两组患者血清NLRP3和TrkB水平情况（±s）

组别实验组（n=72）对照组（n=70）t值P值血清NLRP3（pg/mL）152.61±10.52 102.53±10.46 0.086 0.931血清TrkB（mg/mL）4.69±1.11 8.62±1.04 0.312 0.755

2.2 两组患者HAMD评分情况

实验组HAMD评分为（15.61±1.04）分，对照组的HAMD评分为（4.53±1.46）分，实验组的评分高于对照组，差异有统计学意义（t=52.294，P＜0.05）。

2.3 血清NLRP3、TrkB与HAMD评分相关性分析

经过相关性分析得出：血清NLRP3与HAMD评分呈正相关（r=0.622，P＜0.001），血清TrkB与HAMD评分评分呈负相关（r=-0.587，P＜0.001）。

2.4 血清NLRP3、TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测价值

通过ROC曲线得出：血清NLRP3、TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测灵敏度和特异度均较高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2、图1。

图1 血清NLRP3、TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测价值

表2 血清NLRP3、TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测价值

3 讨论

颅脑肿瘤是目前临床上较为多见的肿瘤，由于去发病位置特殊，所以，治疗难度较大［6］。目前，主要采取手术治疗，但更多的是对脑组织进行保护，控制脑部或者脊髓血液失调的问题，但手术会对患者的精神状况造成严重的影响，常常可伴有焦虑、抑郁的心理，对患者的术后效果造成严重的影响［7］。临床上常采用HAMD量表进行诊断，虽然效果较高，但是诊断不够及时，可导致严重焦虑抑郁情绪，所以寻找较为敏感的血清指标是较为重要的。近年来，尚无此方面的研究，本次研究首次研究血清NLRP3、TrkB与颅脑肿瘤术后伴抑郁的关系，为临床的诊治提供相关参考。

NLRP3是核苷酸结合寡聚化结构域样受体的一种，具有自身固有免疫模式识别的受体，NLRP3炎症体参与到人体免疫以及炎性反应，包括内、外源性多种信号均可激活NLRP3炎症体，造成局部或者全身炎性反应下游通道被激活［8］。本研究表示，相比于对照组，实验组血清NLRP3显著更高，且血清NLRP3与HAMD评分呈正相关，表明血清NLRP3与患者抑郁程度呈明显正相关。分析其原因：脑肿瘤患者术后因为抑郁的状态，产生心理应激，而应激反应有可以诱导NLRP3炎症体对糖皮质激素抵抗进行上调，加剧抑郁症患者生物学异常，促进炎性反应。多项研究［9-10］表示，当机体出现慢性炎性反应时，可激活内源性损伤相关分子模式，激活NLRP3和凋亡相关半点样蛋白相结合，进而加剧炎性反应，最终形成恶性循环。本研究表示，血清NLRP3对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测灵敏度和特异度均较高。TrkB是神经营养因子的高亲和受体，能够相结合进而起到营养神经的效果，但是也需要先与TrkB相结合，产生生化反应并启动信息传导［11］。Mao等［12］发现，脑卒中后抑郁组小鼠酪氨酸激酶受体B表达水平显著高于正常组。本研究表示，相比于对照组，实验组血清TrkB显著更低。这说明脑肿瘤手术后合并抑郁的患者的血清TrkB同样会降低。本研究表示，血清TrkB与HAMD评分呈负相关，血清TrkB对颅脑肿瘤患者合并抑郁的预测灵敏度和特异度均较高。这也进一步证明血清TrkB可以作为预测患者抑郁心理的标志物。本研究将血清学指标运用于颅脑肿瘤术后伴抑郁患者当中，并发现血清NLRP3、TrkB可以作为预测患者抑郁心理的标志物。但本研究可能因为病例收集较少以及并未进行动态监测的因素，导致实验可能存在一定的偏差性，以后应扩大病例的收集以及增加对于血清的动态监测，以使研究更加充分。

综上所述，颅脑肿瘤术后伴抑郁患者血清NLRP3明显升高，血清TrkB明显降低，同时血清NLPR3和TrkB与患者抑郁程度具有明显相关性，并且对于颅脑肿瘤术后伴抑郁具有一定的预测价值。